三七总皂苷对急性脑梗死患者血清VEGF和VEGFR含量的影响

黄宁芳，唐国传，余祖辉，颜钟生，唐尚伟，陈强，李汶桎，劳显丽，黄芫，方丛丽，宋志强

三七总皂苷对急性脑梗死患者血清VEGF和VEGFR含量的影响

黄宁芳，唐国传，余祖辉，颜钟生，唐尚伟，陈强，李汶桎，劳显丽，黄芫，方丛丽，宋志强

目的：研究三七总皂苷（PNS）对急性脑梗死（ACI）患者血清血管内皮生长因子（VEGF）和VEGF受体（VEGFR）的含量影响。方法：选择60例脑梗死患者分为治疗组和对照组各30例，并设立健康组60例，治疗组和对照组均给予脑梗死治疗，治疗组还给予PNS。采用ELISA法测定VEGF和VEGFR于入院时和治疗第14天血清含量的变化，治疗前及治疗后14 d进行神经功能评分。结果：治疗后14 d，治疗组的VEGF、VEGFR水平高于对照组（P＜0.05）；治疗组的神经功能评分与对照组比较差异有统计学意义（P＜0.05）。结论：PNS能提高ACI患者的VEGF和VEGFR表达水平，且能改善神经功能缺损。

脑梗死；三七总皂苷；血管内皮细胞生长因子；血管内皮细胞生长因子受体

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血管内皮生长因子（vascularendothelialgrowth factor，VEGF）又称血管通透因子，是诱导和调控血管新生的多种因子中最重要的因子之一[1]，是目前已知的所有促血管生成因子中同时具备促血管增生和增强血管通透性功能的生长因子。血管内皮生长因子受体（vascular endothelial growth factor receptor，VEGFR）是VEGF的特异性受体。近年文献报道，VEGF和VEGFR在缺血性脑卒中（acute cerebral infarction，ACI）患者组织中的表达与血管发生有密切的关系[2]。三七总皂苷（panax notoginseng saponins，PNS）对ACI有保护作用，虽然从促血管新生的角度，PNS对ACI后血浆VEGF表达有影响的研究已有不少报道，但对VEGFR的研究不多。本研究同时测定ACI患者血浆VEGF和VEGFR的含量，并观察PNS对其影响。

1 资料与方法

1.1 一般资料

收集2012年5月至2013年10月在我科住院的发病时间＜72 h的初发ACI患者60例，均符合中国急性缺血性脑卒中诊治指南2010[3]，经头颅CT证实；男40例，女20例；年龄48～82岁，平均（79.1±9.1）岁；基底核梗死32例，额叶、颞叶、顶叶梗死20例，脑干梗死5例，小脑梗死3例；合并原发性高血压病39例，2型糖尿病7例，冠心病14例。本研究获得我院伦理委员会批准，患者或家属签署知情同意书。排除出血性卒中及有感染、肿瘤、免疫性疾病、血液病、心肝肾功能不全、急性心肌缺血、手术或外伤史及昏迷者。60例患者按入院先后顺序按1∶1的比例分为2组各30例：①治疗组30例，男17例，女13例；年龄49～82 岁，平均（78.8±8.2）岁；基底核梗死 15例，额叶、颞叶、顶叶梗死10例，脑干梗死3例，小脑梗死2例；合并原发性高血压病20例，2型糖尿病3例，冠心病7例；②对照组30例，男16例，女14例；年龄48～81岁，平均（78.9±8.5）岁；基底核梗死16例，额叶、颞叶、顶叶梗死11例，脑干梗死2例，小脑梗死1例；合并原发性高血压病19例，2型糖尿病3例，冠心病6例。2组一般资料比较差异无统计学意义（P＞0.05）。另收集在我院体检的职工干部中正常的人员60例为健康组，男38例，女 22例；年龄 51～81岁，平均（63.2±4.25）岁。3组年龄、性别经齐同性检验后差异无统计学意义（P＞0.05）。

1.2 方法

本研究采用前瞻性设计，通过住院观察并分析各组患者的症状、相关检验值及用药干预后的变化情况。

1.2.1 治疗方法 2组给予曲克芦丁400mg+胞二磷胆碱1 000mg加入0.9%氯化钠注射液250m L i.v.gtt，qd，肠溶阿司匹林100mg qd，伴有颅内高压者加用20%甘露醇。治疗组在此基础上加用注射用PNS 400mg（购于哈尔滨珍宝岛制药有限公司，400mg/支）加入0.9%氯化钠注射液250m L i.v.gtt，qd，2周为一疗程。

1.2.2 标本采集及处理 所有患者均于发病后72 h内和第14天时各采血1次，均于早晨空腹时抽取肘静脉血3m L，所有血样均以无菌试管留取，静置30m in，3 000 r离心10m in收集血清，－20℃保存，健康组空腹采血1次。采用双抗体夹心ELISA法测定血清VEGF和VEGFR浓度，VEGF和VEGFR试剂盒购自深圳晶美生物制品有限公司，严格按操作说明书进行检验。

1.2.3 临床疗效判定标准 神经功能评分采用中华医学会全国第四届脑血管病学术会议修订的《脑卒中患者临床神经功能缺损程度及疗效评分标准》[4]；使用改良爱丁堡斯堪的纳维亚量表（Scandinavian stroke scale，SSS），将患者分为 3 型：轻型（10～15分）18例，中型（16～30分）26例，重型（31～45分）16例。全部患者分别在治疗前及治疗14 d进行评分。

1.3 统计学处理

采用SPSS 21.0软件分析数据，计量结果以（x±s）表示，t检验，P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 3组VEGF、VEGFR水平比较

入院后及第14天时，对照组、治疗组的VEGF、VEGFR水平明显高于健康组（P＜0.05），入院后治疗组、对照组 VEGF和VEGFR水平无明显无统计学意义（P＞0.05）；治疗 14 d 后，治疗组的 VEGF、VEGFR 水平高于对照组（P＜0.05），见表1。

2.2 治疗组与对照组神经功能评分比较

治疗前，对照组与治疗组的神经功能评分分别为 （24.75±4.33） 分、（25.49±9.63）分，2组差异无统计学意义（P＞0.05）；治疗后，2组神经功能明显改善，对照组与治疗组的神经功能评分分别为（13.36±6.53）分、（10.66±4.23）分，治疗组与对照组比较，差异有统计学意义（P＜0.05）。

2.3 不同神经功能缺损程度VEGF、VEGFR水平比较

随着神经功能缺损程度加重，VEGF和VEGFR水平均于发病后72 h及14 d逐渐升高，轻型、中型和重型患者在组间、不同时点、组间和不同时点交互作用中差异均有统计学意义（P＜0.05），见表 2。

3 讨论

研究发现，ACI急性期有大量的生长因子和细胞因子表达以对抗兴奋毒性、缺氧、酸中毒、氧化应激等损伤。Marti等[1]和何佳等[5]发现，在脑缺血48 h和72 h的缺血中心区及周围脑组织可见VEGF和两种VEGFR不同程度上调。VEGF和VEGFR是对血管形成具有特异性的重要生长因子，VEGF和VEGFR有高度亲和力，VEGF通过与其受体结合调控血管发生和成熟。由于脑组织对缺氧非常敏感，低氧作为一种信号激活VEGF/VEGFR系统，促使半暗带VEGF和VEGFR高表达，并能特异性地作用于血管内皮细胞，促进血管内皮细胞增殖，促使半暗带大量新生血管形成，促进侧枝循环的建立，增加受累脑组织的灌注及供氧，使神经元凋亡或坏死数量减少，从而最终减轻脑缺血再灌注脑损伤。

本研究显示，ACI患者血清VEGF和VEGFR水平明显升高，于发病后即升高，持续至第14天。大量实验表明，ACI发生后数小时梗死灶内及缺血半暗带区均可见 VEGF-mRNA、VEGF蛋白及 VEGFR表达，7 d达高峰，后逐渐下降，至14 d仍维持高水平，其含量的多少与缺血缺氧程度呈正比，这与动物研究结果一致，显示在第1～14天VEGF和VEGFR免疫活性增高，3 d后表现强烈的血管生成活性[5,6]。这提示在脑梗死急性期缺血脑组织对VEGF和VEGFR的需求增加，有利于内皮细胞增殖和血管再生的长期需求。随着侧枝循环的建立，VEGF和VEGFR的表达也逐渐减少，说明VEGF和VEGFR的变化随缺血缺氧的程度动态变化。

表1 3组不同时点血清VEGF和VEGFR水平比较（x±s）

表2 不同神经功能缺损程度VEGF、VEGFR水平比较

动物研究发现，VEGF和VEGFR既可反映病情的严重程度，也是脑梗死急性期的自我保护因素，其直接的神经保护作用可以减轻急性期的缺血损伤，而神经元发生、血管再生有助脑损伤的长期修复[5,7,8]。本研究中不同神经功能缺损程度VEGF、VEGFR水平差异有统计学意义（P＜0.05），这表明 VEGF和 VEGFR 水平与损伤程度有关，对判断缺血缺氧程度和病情轻重有一定价值。亦有文献报道，VEGR和VEGFR水平与患者预后密切相关[9,10]。

本研究还显示，ACI经PNS干预治疗后，能有效促进VEGF和VEGFR表达，且使其维持在一个相对较高的水平。目前已有药理研究证明PNS是一种Ca2+阻滞剂，能降低细胞内钙、钠等含量，抑制钙超载，缓解脑水肿，对缺血再灌注损伤有保护作用，能明显抑制由ADP引起的血小板凝集，可抑制血栓形成，降低脑细胞耗氧量，延长细胞生存时间，缩小梗死范围，减少致残率和死亡率。同时有学者发现急性脑损伤48 h内开始应用PNS可促进神经功能恢复[11]。结合本研究结果，ACI患者入院前后VEGF和VEGFR明显高于健康组；治疗组应用PNS干预后VEGF和VEGFR明显高于对照组，且治疗组神经功能恢复优于对照组。笔者认为PNS主要通过诱导VEGF和VEGFR的表达，同时加强脑梗死患者新生血管的形成和侧枝循环的建立，改善脑血液供应，促进神经功能恢复。因此，VEGF和VEGFR可能可以成为反映脑梗死缺血缺氧严重程度与预后的一个指标，但PNS治疗上调VEGF和VEGFR浓度的确切机制还有待进一步研究。

[1]MartiHJ,Bemaudin M,Bellail A,etal.Hypoxia-inducible vascular endothelial growth factorexpression precedesNeo vascular inaction after cerebral ischem ia[J].Am JPatrol,2000,156:965-976.

[2]Nishijima K,NgYS,Zhong L,etal.Vascular endothelial growth factor A is a survival factor for retinal neurons and a critical neuron protection during the adaptive response to ischemic injury[J].Am JPatrol,2007,171:53-67.

[3]中华医学会神经病学分会脑血管病学组急性缺血性脑卒中诊治指南撰写组.中国急性缺血性脑卒中诊治指南2010[J].中华神经科杂志,2010,43:146-153.

[4]中华神经科学会.各类脑血管疾病诊断要点[J].中华神经科杂志,1996,29:379-381.

[5]何佳,丁凤菲,刘敏珍,等.VEGF/VEGFR在脑缺血再灌注损伤中的神经保护作用[J].神经损伤与功能重建,2013,8:177-180.

[6]Shen F,Fan Y,Su H,etal.Aden o associated viral vector mediated hypoxia regulated VEGF gene transfer promotes angiogenesis following focal cerebral ischemia in mice[J].Gene Thea,2008,15:30-39.

[7]Wang Y,Kilic E,Kilic U,et al.VEGF over expression induces post ischemic neuron protection but facilitates hemoid dynamic steal phenomena[J].Brain,2005,128:52-63.

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E ffect of Panax Notoginseng Saponins on the Concentration of Plasm a VEGF and VEGFR of

the Patients with Acute Cerebral In farction

HUANG Ning-fang,TANG Guo-chuan,YU Zu-hui,YAN Zhong-sheng,TANG Shang-wei,CHEN Qiang,LIWen-zhi,LAO Xian-li,HUANG Yuan,FANG Cong-li,SONG Zhi-qiang.Departmentof InternalMedicine,Fangcheng DistrictPeople'sHospitalofFangchenggang city,Guangxi 538021,China

Objective:To study the effectof Panax Notoginseng Saponins(PNS)on the concentration of plasma vascular endothelialgrowth factor(VEGF）and plasma vascular endothelial growth factor receptor(VEGFR)of the patientswith acute cerebral infarction(ACI).Methods:Sixty ACIpatientswere divided into treatmentGroup and controlgroup(n=30 in each group).Healthy Group of 60 healthy casesalso setup.The treatmentgroup and control group were given routine therapy,and the treatment group was given PNS.At admission and 14 days after the treatment,ELISA was used to determine VEGF and VEGFR concentration,and neurological deficit scoreswere recorded.Results:At the 14 days,the concentration of VEGFand VEGFR in the treatmentgroup were higher than those of the controlgroup (P＜0.05),and therewassignificantdifference between the neurologicaldeficitscoresof the treatmentgroup and the controlGroup(P＜0.05).Conclusion:PNS can improve VEGFand VEGFR expression,and can improveneural function defectof ACIpatients.

cerebral infarction;Panax Notoginseng Saponins;vascular endothelial growth factor;vascular endothelialgrowth factor receptor

R741;R741.05

A

DOI10.3870/sjsscj.2014.05.009

防城港市防城区人民医院内科 广西防城港538021

广西防城港市科研课题 [No.防科字(2012)9号]

2014-05 -24

黄宁芳

（本文编辑：王晶）