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脓毒血症患者血小板参数变化及其与血小板膜糖蛋白的关系

2014-09-18陈玉时

中国医学创新 2014年36期
关键词:糖蛋白毒血症脓毒症

陈玉时

脓毒血症是严重创伤、感染、烧伤、休克、重症胰腺炎、重大手术等临床危重患者最为常见的严重并发症之一,是导致多器官功能障碍综合症(MODS)及脓毒性休克的发生的重要病因[1]。已有研究表明,过度的炎症反应和凝血系统功能紊乱在脓毒血症病情加重、恶化过程及MODS发生、发展中起了重要作用,而血小板活化是凝血系统激活的启动因素之一,同时还是连接炎症反应和凝血系统之间的桥梁[2-3]。本研究通过测定脓毒血症患者血小板各参数及血小板膜糖蛋白PAC-1、CD62P的表达水平,探讨脓毒血症患者血小板各参数与血小板膜糖蛋白PAC-1、CD62P的表达水平的关系,以寻求精确判断血小板功能状态的办法。现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2013年2月-2014年1月于本院住院治疗的脓毒症患者48例为病例组,均符合2001年国际脓毒血症定义会议提出的脓毒症的新诊断标准[4],其中男29例,女19例;年龄19~67岁,平均(41.86±11.76)岁;排除合并血液系统疾病、免疫性疾病、恶性肿瘤、器官移植、肝肾功能异常、妊娠者、近2周内应用阿司匹林等可能影响血小板功能的药物者及临床病例资料不全者。另选取本院健康体检者32例作为对照组,其中男21例,女11例;年龄20~69岁,平均(42.14±11.57)岁。两组研究对象的性别、年龄等一般资料比较差异均无统计学意义(P>0.05),具有可比性。本研究经本院伦理委员会批准,所有入选试验对象均签署知情同意书。

1.2 检测指标和方法

1.2.1 血小板参数检测 病例组患者于确诊次日、对照组健康体检者于体检当天清晨空腹应用负压采血针抽取肘静脉血2 mL,以质量分数为2%,比例为1:10的乙二胺四乙酸二钾(EDTA-K2)抗凝管抗凝,轻轻混匀后于2 h内采用全自动血细胞分析仪,采用电阻抗法进行测定,测得血小板计数(PC)、血小板平均体积(MPV)、血小板分布宽度(PDW)。

1.2.2 血小板膜糖蛋白检测 病例患者于确诊次日、对照组健康体检者于体检当天清晨空腹应用负压采血针抽取肘静脉血2 mL,以质量分数为2%,比例为1:9的乙二胺四乙酸二钾(EDTA-K2)抗凝管抗凝,轻轻混匀后30 min内送检,静置取上清液,加入终浓度为1%的多聚甲醛1 mL,轻轻混匀,室温下固定15 min,取富含血小板血浆层,加入TEN缓冲液调整血小板浓度为300×109/L,将20 μL异硫氰酸荧光素标记的血小板膜糖蛋白GP b/a复合物单克隆抗体(PAC-1)及藻红素标记的血小板a-颗粒膜蛋白抗P-选择素单克隆抗体(CD62P)(均购自美国Becton-Dickson公司)加入至100 μL用多聚甲醛固定的血小板中,混匀后于室温暗处静置15 min,采用流式细胞仪进行检测,测定10 000个血小板,计算PAC-1、CD62P的百分含量。

1.3 统计学处理 采用SPSS 17.0统计学软件进行数据处理,计量资料以(±s)表示,比较应用t检验,计数资料采用 字2检验,血小板参数与血小板膜糖蛋白的相关性采用Pearson 相关性分析,以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组血小板参数的比较 病例组PC显著下降,而MPV、PDW均显著升高,与对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05),见表1。

表1 两组血小板参数的比较(±s)

表1 两组血小板参数的比较(±s)

组别 PC(×109/L) MPV(L) PDW(L)病例组(n=48) 211.45±77.67 14.43±0.82 17.68±1.71对照组(n=32) 273.58±34.24 9.51±0.63 14.30±1.46 t值 5.82 4.75 4.59 P值 <0.05 <0.05 <0.05

2.2 两组血小板膜糖蛋白PAC-1、CD62P水平的比较 病例组PAC-1、CD62P表达水平均明显高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05),见表2。

2.3 脓毒血症患者血小板参数与血小板膜糖蛋白PAC-1、CD62P的相关性分析 经Pearson相关性分析,脓毒血症患者的MPV与PAC-1、CD62P表达水平均呈明显正相关(r=0.377、0.306,P<0.05),PV、PDW与PAC-1、CD62P表达水平之间无明显相关性(P>0.05)。

表2 两组血小板膜糖蛋白PAC-1、CD62P水平的比较(±s) %

表2 两组血小板膜糖蛋白PAC-1、CD62P水平的比较(±s) %

组别 PAC-1 CD62P病例组(n=48) 42.13±8.66 7.59±1.62对照组(n=32) 21.04±3.50 1.43±0.47 t值 8.94 8.67 P值 <0.05 <0.05

3 讨论

脓毒血症是临床急危重患者常见的严重并发症之一,其诱发的脓毒性休克、MODS是目前危重疾病患者死亡的主要病理生理因素,已成为重症监护病房患者死亡的主要原因之一[5]。已有多项研究表明,脓毒血症患者血小板功能出现异常,且随着病程加重和恶化,血小板功能障碍程度加重[6-8]。过度的炎症反应和凝血系统功能紊乱在脓毒血症病情加重、恶化过程及MODS发病机制中起了重要作用,而血小板活化是启动凝血系统激活及连接炎症反应和凝血系统之间的桥梁。

在人体正常血液循环中,血小板处于静止状态,而当机体受到生理或病理刺激因子作用,导致血管内皮受损后,血小板立即粘附于受损血管处暴露的内皮组织,形成血小板栓子并被内皮下组织或局部形成的凝血酶激活。活化的血小板可直接释放凝血酶、V因子、Ⅷ因子、纤维蛋白原等凝血因子,也可同时释放大量二磷酸腺苷、血小板活化因子等产物,反馈引起血小板持续活化。血小板还可释放血管活性物质、细胞因子等,促使中性粒细胞及白细胞聚集、活化,导致血管内皮损伤和炎性反应加重,引起器官功能障碍的发生[9-11]。血小板膜糖蛋白PAC-1、CD62P在血小板黏附、聚集及活化反应中起重要作用,均为血小板活化特异性标志物[12]。本研究结果显示病例组患者PAC-1、CD62P表达水平上调,表明脓毒血症患者体内存在血小板活化。

已有许多研究证实,PC、MPV、PDW等血小板参数与脓毒血症患者病情严重程度密切相关[13]。本研究结果显示,脓毒症患者PC明显下降,而MPV、PDW明显升高,与国内相关研究报道相符[14]。PC下降可能与高凝状态下消耗增多、血液稀释、细菌毒素破坏及药物的继发作用等有关,而MPV、PDW升高则可能与PC下降后引发骨髓代偿增生,导致大量体积更大的不成熟血小板产生有关[15]。另外,本研究对血小板参数与PAC-1、CD62P的相关性进行分析,发现MPV与PAC-1、CD62P之间均存在显著正相关关系,表明PAC-1、CD62P均可作为血小板活化的特异性标志物的同时,MPV也可作为判断脓毒血症患者体内是否存在血小板活化的参考数值。

综上所述,脓毒症患者体内存在血小板明显活化,血小板参数与血小板膜糖蛋白PAC-1、CD62P共同参与血小板活化过程。MPV与PAC-1、CD62P之间均呈显著正相关,为患者机体血小板活化状态的评估及指导临床预防、诊治、评估脓毒血症提供了简便、可行的依据。

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