KIF14过表达与肝细胞肝癌手术预后密切相关

杨 涛，孙轶飞，王立伟，张 颖，白文彩(.河北省石家庄市第一医院普通外科，河北 石家庄 0500；.河北省沧州市传染病医院传染科，河北 沧州06000；.河北省宁晋县医院妇产科，河北 宁晋 055550)

·论著·

KIF14过表达与肝细胞肝癌手术预后密切相关

杨 涛1，孙轶飞1，王立伟1，张 颖2，白文彩3
(1.河北省石家庄市第一医院普通外科，河北 石家庄 050011；2.河北省沧州市传染病医院传染科，河北 沧州061000；3.河北省宁晋县医院妇产科，河北 宁晋 055550)

目的KIF14是有丝分裂驱动蛋白超家族成员，其在染色体分离和胞质分裂过程中起着重要作用，KIF14表达增高与一系列人类癌症发生、发展密切相关。本研究通过观察KIF14表达与临床变量的关系，探讨KIF14过表达与肝细胞肝癌手术预后的关系。方法取2005年2月—2010年12月我院进行肝癌手术，并且术后病理证实为肝细胞肝癌的患者102例。应用RT-qPCR检测102例肝细胞肝癌组织中KIF14的表达量，并分析其与肿瘤分级、分期和无病生存率的关系。结果KIF14过表达与肿瘤分级(P=0.002)、分期(P=0.013)和无病生存率(P<0.001)均密切相关。结论肝细胞肝癌组织中KIF14过表达不利于手术预后，它也许可以作为肝细胞肝癌手术预后评估的重要指标及潜在治疗靶点。

癌，肝细胞;驱动蛋白;预后

10.3969/j.issn.1007-3205.2014.03.006

肝细胞肝癌具有高侵袭、转移早、易复发、预后差的临床病理特征，是癌症致死的第三大原因，而且还是肝硬化患者的首要致死原因。每年全球超过60万人被诊断为肝癌，而我国又是全球肝癌发病率最高的国家，每年新发病例数占全球总数的55%，是目前对我国人民健康和生命威胁较大的恶性肿瘤之一[1]。改进外科技术，使用新的化疗药物，改变化疗方式和新兴的分子靶点治疗有利于改善患者的生存状况。但是，对肝癌致癌机制了解不完全导致很难评估肝癌手术预后效果及选择有针对性的治疗方案并提高生存率。驱动蛋白在无数细胞进程，如胞内运输和细胞分裂中起重要作用[2]。有迹象表明，具有异常表达和功能的驱动蛋白对多种人类肿瘤的进展起关键作用。更好地了解驱动蛋白功能可能有利于肿瘤预后评估及靶向治疗的发展[3-4]。人的KIF14是具有6 586个碱基对的驱动蛋白家族成员[5]，像所有驱动蛋白一样，KIF14包括一个驱动蛋白域和一个叉头关联域[6]，并且KIF14预计在1q区域扮演可能的癌基因的角色。已有研究[7-9]表明，KIF14表达是乳癌、肺癌和卵巢癌的预后标记，是卵巢癌的潜在治疗目标。本研究检测原发肝癌组织中KIF14的表达，旨在探讨其与肿瘤分级、分期及无病生存期的关系。

1 资料与方法

1.1 一般资料：选择2005年2月—2010年12月期间河北省石家庄市第一医院进行肝癌手术，并且术后病理证实为肝细胞肝癌的患者102例，组织标本置于液氮中-80℃冷冻保存。102例患者的随访数据来源于医院记录和肝切除术后与患者的直接沟通。随访日期定为从手术切除肿瘤后到死亡或上次随访日。无病生存率(disease free surviva，DFS)定为患者肝癌切除后无肝癌复发迹象的时间。本研究通过我院审查机构许可并书面征得所有患者同意。

1.2 组织RNA分离和实时定量逆转录聚合酶链反应(real-time quantitative reverse transcription-PCR,RT-qPCR)：根据说明书使用TRIZOL试剂提取总RNA。使用5μg总RNA和SuperScript Ⅱ及寡dT执行逆转录。RT-qPCR分析使用Fast SYBR Green MasterMix系统。KIF14引物和GAPDH内参序列见表1。PCR反应条件为95℃ 20s、95℃ 3min、60℃ 30s，使用ABI-7500(应用生物系统)共计40个循环。相对定量方法得到的CT值，通过三联反应测定所有样本的KIF14与GAPDH。取探测基因的可用三联反应CT平均值，减去GAPDH的CT值，获得ΔCT。KIF14的相对mRNA表达水平应用2-ΔCT方法计算。

表1 KIF14的RT-qPCR扩增引物Table 1 Primers used to perform RT-qPCR of KIF14

1.3 统计学方法：应用SPSS13.0计算软件进行统计分析，按照Kaplan-Meier法进行生存分析。KIF14与各种临床病理变量间的关系采用卡方检验。P<0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

由于在所有原发肝癌组织中KIF14 mRNA的分布不符合正态分布，所以我们基于肝癌患者的KIF14 mRNA相关水平和DPS状况绘制ROC曲线。以1.5×10-3为界将患者分为KIF14低表达组(KIF14low)和高表达组(KIF14high)。

观察KIF14表达与年龄，肿瘤大小、分级、分期，门静脉癌栓和乙型肝炎病毒感染等相关因素的关系。结果显示在KIF14高表达与肿瘤分级(P=0.002)和分期有关(P=0.013)，而与不同年龄、不同肿瘤大小癌栓和有无乙型肝炎病毒感染之间无关，见表2。

KIF14high患者DFS较KIF14low明显缩短(图1)。

表2 102例肝细胞肝癌患者中临床病理因素与KIF14表达的关系Table 2 Relationship between clinicopathological factors and KIF14 expression in 102 hepatocellular carcinoma patients

图1 102例肝细胞肝癌患者中KIF14 mRNA表达与5年无病生存率Kaplan-Meier曲线分层的关系(P<0.001)
Figure 1 The Kaplan-Meier plot of 5-year disease free survival curves stratified by KIF14 mRNA expression in 102 HCC patients(P<0.001)

3 讨 论

本研究结果显示，KIF14在肝癌中过表达，这种过表达与肿瘤分级、分期有关。表明KIF14在人类肝癌癌变过程中具有重要作用，KIF14过表达与肝细胞肝癌手术预后密切相关。

KIF14是胞质分裂和染色体分离的必要条件[9]。多篇报道[6,8,10]称，KIF14表达增加与多种不同的肿瘤发生有关，包括肝癌。在以往的研究中由于标本数有限，Kim等[10]没有观察到KIF14表达水平与肿瘤侵袭性、分级、大小和生存率之间的特殊联系。而本研究观察到了KIF14表达水平与肝癌分级、分期及生存率之间密切相关。

尽管KIF14的确切功能尚不清楚，但它在细胞分裂中期使染色体对齐的作用[2]表明它在形成非整倍体方面可以发挥重要作用，并且它的过表达可能在癌症进展中起到加速细胞周期的作用。不管它的作用模式是什么，它在肝癌中的特异性过表达及它与肿瘤分级、生存率的关系，均证明KIF14作为可疑癌基因、治疗靶点和预后目标的重要性。

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《河北医科大学学报》编辑部

OVER EXPRESSION OF KIF14 IS CLOSELY RELATED WITH THE PROGNOSIS OF HEPATOCELLULAR CARCINOMA AFTER OPERATION

YANG Tao1,SUN Yifei1,WANG Liwei1,ZHANG Ying2,BAI Wencai3
(1.DepartmentofGeneralSurgerytheFirstHospitalofShijiazhuangCity,Shijiazhuang，HebeiProvince，050011； 2.DepartmentofInfectiousDiseasestheContagiousHospitalofCangzhouCity,HebeiProvince，Cangzhou061000,China；3.DepartmentofObstetricsandGynecologytheHospitalofNingjinCounty，HebeiProvince，Ningjin055550,China)

ObjectiveThe mitotic kinesin superfamily protein KIF14 is essential for cytokinesis and chromosome segregation and increased KIF14 expression is related to a variety of human cancers.This study is to explore the relationship between KIF14 expression and operation prognosis of hepatocellular carcinoma by investigating the connection between KIF14 expression and clinical variables.MethodsThe study involved 102 patients who were confirmed as hepatocellular carcinoma by pathology after operation from February,2005 to December,2010 in our hospital.The expression of KIF14 in 102 hepatocellular carcinoma cases was detected by RT-qPCR and coalition statistical analysed with tumor grade,stage and disease-free survival.ResultsKIF14 overexpression was closely related with tumor grade (P=0.002),stage (P=0.013) and disease-free survival (P<0.001).ConclusionKIF14 overexpression in hepatocellular carcinoma is not conducive to prognosis.It may be used as an important index and potential treatment target in evaluating the prognosis of hepatocellular carcinoma after operation.

carcinoma，hepatocelluar;kinesin;prognosis

2013-12-06；

2014-01-25

河北省科技支撑计划项目(132777236)

杨涛(1979-)，男，河北枣强人，河北省石家庄市第一医院副主任医师，医学硕士，从事普通外科疾病诊治研究。

R730.261

A

1007-3205(2014)03-0263-03

许卓文)