肺鳞癌术后组织中B7-H4、泛素特异性蛋白酶10和p53的表达及关系

王再红

(秦皇岛市海港医院呼吸内科，山东 秦皇岛 066000)

肺鳞癌以中央型肺癌最多见。病变起源于支气管黏膜柱状上皮鳞化的上皮细胞。肿瘤的侵袭作用明显，在此过程中，多种基因和蛋白均有明显的促进作用〔1〕。B7-H4是共刺激分子B7家族中的新成员〔2〕，在正常上皮中不表达或低表达，在多种肿瘤的表达上调，介导肿瘤的发生及发展〔3，4〕。泛素特异性蛋白酶(USP)10是一种泛素特异性蛋白酶，可以调控p53的功能，同时可以逆转MDM2诱导的p53转运和降解过程〔5〕。本文关注肺鳞癌术后组织中B7-H4、USP10和p53的表达，关注其相关性。

1 材料和方法

1.1一般资料 2011年1月至2013年12月我院确诊为肺鳞癌，并行根治手术的患者117例作为观察组，均符合WHO诊断标准。男70例，女47例；年龄51～85(平均66.5)岁。高分化67例，中分化33例，低分化17例。选取支气管黏膜上皮鳞化组织共46例作为对照组，男30例，女16例；年龄52～80岁，平均69.7岁，两组一般临床资料无明显差别，具有可比性。

1.2B7-H4、USP10和p53蛋白表达的检测 B7-H4、USP10和p53蛋白的浓缩液均购自武汉博士德生物工程有限公司，按不同比例进行稀释后行预实验，选取表达最理想的浓度用于正式实验。正式检测均应用免疫组化二步法。操作均由同一主管技师进行，严格按实验步骤进行操作，严格质量控制。

1.3B7-H4、USP10和p53蛋白检测结果的判定方法 B7-H4以细胞质和(或)细胞膜内出现黄色颗粒为阳性反应细胞，USP10以细胞质内出现棕黄色颗粒为阳性反应细胞，p53以细胞核中出现棕黄色颗粒为阳性反应细胞。每张切片选择5个400倍的高倍视野，取其平均值作为样本最终的阳性表达率，以阳性细胞≥5％定为阳性，以阳性细胞<5％定为阴性。

1.4统计学方法 采用SAS6.12软件进行χ2检验、线性相关分析。

2 结 果

2.1两组B7-H4、USP10和p53蛋白表达阳性率的比较 观察组B7-H4和p53表达的阳性率明显高于对照组，USP10表达阳性率明显低于对照组(P<0.000 1)。见表1。

2.2B7-H4、USP10和p53在观察组不同临床特征中的表达比较 观察组B7-H4、USP10和p53表达与肿瘤最大径、分化程度、脉管浸润和是否伴有坏死密切相关。见表2。

表1 两组B7-H4、USP10和p53蛋白表达阳性率的比较〔n(％)〕

2.3观察组B7-H4、USP10和p53的相关性 观察组B7-H4和p53的表达正相关(r=0.47，P=0.025 4)，USP10和p53负相关(r=-0.49，P=0.019 8)。

表2 B7-H4、USP10和p53在观察组不同临床特征中的表达比较〔n(％)〕

3 讨 论

肺鳞癌是肺组织发生的非小细胞肺癌中最常见的类型，占男性的44％和女性的25％，吸烟是重要的决定性危险因素。患者常表现为进行性气短、咳嗽、胸痛、压迫感、咯血等〔6〕。近来学者关注在鳞癌病变进展中多种基因和蛋白的调控作用〔7〕。B7-H4是近年来关注的重要蛋白之一，其能抑制CD4和CD8阳性的T细胞活化，减少机体IL-2和IL-4的分泌，阻断细胞周期，使其停留在G0/G1期。从而负向调控T细胞介导的免疫性功能〔8，9〕。也有研究显示B7-H4是一种保守的抗原，由282个氨基酸组成，在胞外区存在一个Ig样的结构域，但是缺乏明显的跨膜区〔10，11〕，此种结构使其易于肿瘤基因结合，促进肿瘤的进展。USP家族可以与转录复合物SAGA的亚单位结合，促进SAGA乙酰化染色体上的组蛋白H2A表达，同时激活基因的转录，使细胞向G1/S的过渡，引发肿瘤的进展〔12，13〕。USP10作为USP家族中的重要成员，可以引起p53的稳定表达，此时p53可以引起USP10由胞质向胞核移位〔14〕。USP10的此种功能受ATM介导的磷酸化调控，当细胞质中的USP10进入细胞核，其构型和成分发生变化，也使细胞丢失了USP10的基本功能，这是细胞恶变的潜在危险因素〔15〕。p53分为野生型和突变型，野生型在实验中极难检测到，因此p53常表达突变型〔16，17〕。本实验检测的亦为突变型。有学者认为p53是细胞凋亡的调控因子〔18〕，在多种肿瘤中高表达，不仅引发肿瘤细胞的增殖，还可以促进肿瘤的进展〔19〕。

本研究提示B7-H4和p53高表达、USP10低表达能促进肿瘤的发生。B7-H4、USP10和p53三种蛋白异常表达引起肿瘤的快速生长，加速肿瘤的进展，提高肿瘤的临床分期。B7-H4、USP10和p53参与肿瘤的分化过程，也提示三种蛋白是肿瘤内在分化过程中的重要调节蛋白。三种蛋白参与肿瘤的播散过程，这种过程直接引起肿瘤的进展，形成远隔器官的转移灶。由于三种蛋白与肿瘤的坏死相关，提示B7-H4、USP10和p53的异常表达可以引起肿瘤性的坏死，也使肿瘤的恶性程度增加。肿瘤性的坏死是彻底的，因此形成坏死组织不能恢复，加剧病变的进展及器官功能的丧失。B7-H4、USP10均与p53具有协同作用，也提示B7-H4、USP10的作用一定程度上是通过影响p53实现的。B7-H4、USP10在肿瘤进展中还参与多种生物学过程，如多肽与蛋白质激素的合成与分泌、膜受体的成熟过程及血浆蛋白前体的激活等〔20〕。近来学者认为USP10可以调节细胞的恶性转化及过程，同时加速肿瘤细胞的侵袭和播散〔21〕，B7-H4、USP10在作用过程中均与增殖相关，由于p53是增殖有关的直接蛋白，因此其协同作用更明显，作用通路更直接〔22〕。

总之，肺鳞癌术后组织中B7-H4、USP10和p53均异常表达，三者对肿瘤的进展有明显的促进作用。B7-H4、USP10均可能通过对p53的调节发挥作用。

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