Fascin在散发性大肠管状腺瘤癌变过程中的表达及其意义

赵振亚 许 欣 薛延光

(邢台市人民医院病理科，河北 邢台 054031)

大肠管状腺瘤是一种具有癌变潜能的良性病变，发病率较高，而且是大肠癌主要的癌前病变〔1〕。本研究探讨Fascin在大肠管状腺瘤癌变过程中的表达及可能作用。

1 资料与方法

1.1资料 选取河北邢台市人民医院病理科2000年12月至2008年1月期间存档蜡块，除外家族性结肠多发息肉病、幼年性息肉和其他类型的大肠腺瘤。所有病例全部切片均由2位高年资病理医师进行明确诊断复核，按照病史及病理资料选择伴有不同程度(轻中、重度)异型增生的散发性大肠管状腺瘤82例，大肠管状腺瘤癌变病例76例作为研究对象，同时以40例大肠黏膜作为对照，均取自大肠癌标本距肿物10 cm以上的大肠黏膜。本组研究病例中，男112例，女86例；年龄60～85(平均68.5)岁。82例大肠腺瘤组中，轻中度异型增生38例，重度异型增生44例。76例大肠腺瘤癌变组中，浸润深度未侵及浆膜32例，侵及浆膜44例，无淋巴结转移的34例，有淋巴结转移的42例，Dukes分期A+B期34例，C+D期42例，高-中分化46例，低分化30例。

1.2方法 采用免疫组织化学ElivisionTMplus两步法进行免疫组化染色。选用鼠抗人Fascin单克隆抗体，购自上海沪峰生物科技有限公司。用已确定为阳性的转移性乳腺癌作为阳性对照。Ki-67抗体购自福州迈新生物技术开发有限公司，用已确定为阳性的乳腺癌作为阳性对照。

1.3免疫组化结果判定标准 Fascin蛋白阳性表达主要定位于细胞质,表现为胞质内有棕黄色颗粒。在间质中高表达,因此,在间质中的表达可以作为内对照。免疫组织化学染色结果采用以下判断标准〔2〕。首先将染色程度评分：无色计0分、淡黄色计1分、棕黄色计2分和棕褐色计3分；再将阳性细胞所占的百分比评分：0分为阴性、阳性细胞数≤10%计1分、11%～50%计2分、51%～75%计3分、>75%计4分,然后计算两者的乘积。乘积<3分为阴性，≥3分为阳性。Ki-67的评定标准：阳性表达位于细胞核，核内有棕黄色颗粒，阳性率：阳性细胞数<5%为-，5%～25%为+，26%～50%为，>50%为。以-和+为低表达，和为过表达进行分析。

1.4统计学分析 应用SPSS13.0软件进行χ2检验。

2 结 果

2.1Fascin蛋白在大肠管状腺瘤癌变中的表达情况 在大肠黏膜、大肠管状腺瘤伴上皮异型增生及大肠腺瘤癌变中Fascin蛋白阳性表达率分别为5.0%、30.5%、64.5%。其阳性表达率随病变程度的加深而增高(P<0.05)(图1)，且不同的组别之间存在显著差异(P<0.05)(表1)；在大肠管状腺瘤伴上皮异型增生中，Fascin蛋白阳性表达率分别为10.5%(轻中度)、47.7%(重度)，阳性表达率逐渐增高(P<0.05)。

表1 Fascin在大肠腺瘤癌变中表达与临床病理参数的关系(n)

2.2Fascin在大肠腺瘤癌变中表达与临床病理参数的关系 Fascin蛋白的表达与患者的年龄、性别无关(P>0.05)，与肿瘤分级、浸润深度、淋巴结转移、Dukes分期密切相关(P<0.05)(表1)。

图1 Fascin在大肠管状腺瘤不同病变中的表达(DAB，×100)

3 讨 论

大肠癌居全球恶性肿瘤发病率的第3位〔3〕。侵袭、转移行为是恶性肿瘤的本质特性和致死原因，癌转移使局部病变扩散成全身多灶性分布的疾病。及早发现、诊断及治疗癌前病变是降低大肠癌发生率的最好办法，在大肠癌变之前(大肠腺瘤阶段)，治疗方法简单，效果明显，治愈率高。最近美国肿瘤研究所的Liatla 提出了肿瘤浸润三步学说，即黏附、溶解和移动。癌细胞需经历从原发灶脱落、细胞黏附于基质、蛋白水解酶降解基质、肿瘤细胞移动等过程，向周围组织侵袭或进入血液循环及淋巴系统而进一步向远处转移。Fascin蛋白与细胞的黏附、移动有关。

细胞形状的改变如膜突起形成、细胞间的黏附性降低等是肿瘤早期发生浸润转移的重要原因之一，而这些改变与细胞周边肌动蛋白微丝、细胞骨架的重排及肌动蛋白结合蛋白的聚集形成伪足密切相关。结直肠癌的进展和侵袭与癌细胞运动性增加及肌动蛋白细胞骨架结构改变密不可分。三维的肌动蛋白微丝的结构和功能是由众多肌动蛋白捆绑蛋白调节和控制〔4〕。人类Fascin基因是定位于染色体7q22，编码一种分子量为55 kD的细胞骨架蛋白，可与F-肌动蛋白结合，定位于细胞质张力纤维和细胞膜皱褶边缘的丝状伪足、微棘的核心肌动蛋白束中，Fascin蛋白N端11～50之间的氨基酸残基高度保守，其中第39位的丝氨酸为蛋白激酶C(PKC)的磷酸化位点，该位点的磷酸化可调节Fascin蛋白与F-actin的结合活性〔5〕以及细胞膜表面丝状伪足和微棘的形成〔6〕。细胞的丝状伪足和微棘与细胞的运动、癌细胞的转移有密切关系，这提示Fascin蛋白在细胞迁移，细胞黏附以及细胞间信息交流等过程中发挥作用〔6，7〕。近年来的研究发现Fascin蛋白在正常上皮细胞中不表达或低表达，但在一些上皮组织肿瘤如胃癌、乳腺癌，非小细胞肺癌，胰腺癌，卵巢癌，食管癌中常表达上调。在霍奇金淋巴瘤、多发性骨髓瘤、指突状树突细胞肉瘤、Sjogren综合征、(HIV)相关的淋巴细胞增生疾病等高表达。Fascin表达与肿瘤的进展、高侵袭性、预后不良和生存率的降低呈正相关〔8,9〕。

有研究者认为在结直肠癌中Fascin表达可能受wnt途径的调节〔10〕，导致Fascin蛋白的异常表达，提高了细胞运动能力和移动性，促使细胞产生各种恶性行为，从而引起大肠癌的发生发展。也有可能在细胞恶变后上调了Fascin基因的表达或增加转录，使其蛋白表达亦随之上调。还有研究者认为：Fascin蛋白可能是c-erbB-2在细胞骨架上的一种效应蛋白，c-erbB-2在癌中的扩增激活Fascin的转录，由此看来，大肠癌中可能存在多条途径调节Fascin蛋白的表达。

本研究提示随着Fascin表达的增高，致使细胞膜表面突起增多，细胞增殖旺盛，肌动蛋白骨架重建，细胞运动和移动性增强，促使细胞产生各种恶性行为，在大肠从正常黏膜-腺瘤-癌变的发生发展过程中起到了一定作用，提示Fascin蛋白可能参与了大肠管状腺瘤的形成及癌变。因此，阻断Fascin蛋白表达或阻断对其细胞运动装置或黏连结构的作用可能成为未来结肠癌治疗的新措施〔11〕。在大肠管状腺瘤癌变组中Fascin的表达与肿瘤的分化程度、浸润深度、淋巴结转移、Dukes分期有关,与性别、年龄均无关。这与文献报道相类似〔12〕，Ki-67是显示肿瘤增殖活性和判断预后的重要指标，Fiscin与Ki-67的表达呈正相关，由此说明Fascin蛋白也可成为判断肿瘤预后新的指标。

4 参考文献

1郑 杰. 结直肠息肉和结直肠癌 〔J〕. 中华病理学杂志, 2005;34(1): 4-5.

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4Buda A, Pignatelli M. Cytoskeletal network in colon cancer: from genes to clinical application〔J〕. Int J Biochem Cell Biol,2004;36(5):759-65.

5De Arcangelis A, Georges-Labouesse E, Adams JC. Expression of fascin-1, the gene encoding the actin-bundling protein fascin-1, during mouse embryogenesis〔J〕. Gene Expr Patterns, 2004;4(6): 637-43.

6周 亮, 王德盛. Fascin-1与消化系恶性肿瘤〔J〕. 世界华人消化杂志，2012；20(23):2125-30.

7De Arcangelis A, Georges-Labouesse E, Adams JC. Expression of fascin-1, the gene encoding the actin-bundling protein fascin-1, during mouse embryogenesis〔J〕. Gene Expr Patterns, 2004;4(6): 637-43.

8Hashimoto Y,Ito T,Inoue H,etal. Prognostic significance of Fascin overexpression in human esophageal squamous cell carcinoma〔J〕.Clin Cancer Res, 2005;11(7): 2597-605.

9Hashimoto Y, Shimada Y, Kawamura J,etal. The prognostic relevance of Fascin expression in human gastric carcinoma〔J〕. Oncology,2004;67(3-4):262-70.

10Tao YS,Edwards RA,Tubb B,etal.Beta-Catenin associates with the actin-bunding protein fascin in a noncadherin complex〔J〕. J Cell Biol,1996；134 (5):1271-81.

11宋晓昕. Fascin在大肠腺瘤癌变过程中的表达及意义〔J〕. 河北医药， 2010;32(17):2370-1.

12李宏伟,王铁山,黄 勇，等. 结直肠腺癌中Fascin-1蛋白表达与其临床病理特征的关系〔J〕. 中国普外基础与临床杂志，2010;17(4):362-4.