热休克蛋白70在胶质细胞瘤中的表达以及与肿瘤病理分级的相关性

王晓东 陈善成 杨俊保

(暨南大学附属第一医院神经外科，广东 广州 510000)

热休克蛋白70(HSP70)普遍存在于生物细胞内，在细胞的生长发育、分化以及基因转录等方面均起着核心作用〔1〕。实验研究证实〔2〕，HSP70的主要生物学功能在于应激状态下保护细胞生命活动必要的蛋白质，维持细胞的生存。此外，HSP70临床上还可以作为肿瘤标志物，在肿瘤免疫中发挥重要的作用〔3〕。胶质细胞瘤属于中枢神经系统较为多见的原发性肿瘤，由于其复发率较高，预后往往不佳。笔者通过检测胶质细胞瘤组织中HSP70的表达，试图阐述HSP70与胶质细胞瘤病理分级间的相关性，同时分析肿瘤复发对HSP70表达的影响。

1 材料与方法

1.1一般材料 纳入胶质细胞瘤组织样本50例，均为2010年1月至2013年1月于我院进行胶质细胞瘤切除手术患者的存档标本。年龄62～84〔平均(66.2±11.2)〕岁，男33例，女17例。根据世界卫生组织(WHO)2000年颁布的神经系统肿瘤分类和分级标准，Ⅰ级9例、Ⅱ级12例、Ⅲ级13例、Ⅳ级16例。局部复发患者21例，无复发患者29例。

1.2主要试剂 鼠抗人HSP70单抗，购于美国Santa Cruz公司；SP免疫组化试剂盒，购于北京中杉金桥生物技术有限公司；3%过氧化氢；DAB等。

1.3免疫组化检测 采用免疫组化SP法进行HSP70蛋白的测定，操作按试剂盒说明书进行。免疫组化检测分别设立阳性以及阴性对照组。以细胞核或细胞质内出现棕黄色颗粒作为阳性细胞，将阳性细胞比例与显色强度相结合判断，观察每张切片，以高倍视野(40×)计数1 000个细胞。(-)：阳性细胞<5%；(+)：阳性细胞5%～50%；()阳性细胞>50%。

2 结 果

2.1HSP70在胶质细胞瘤各病理分级中的阳性表达比较 Ⅰ级、Ⅱ级、Ⅲ级、Ⅳ级胶质细胞瘤中HSP70阳性表达率分别为33.33%、66.67%、84.62%、100.00%。χ2检验显示各级胶质瘤间HSP70阳性表达有显著差异(χ2=8.699，P<0.05),见表1。

2.2HSP70在胶质细胞瘤局部复发组与无复发组中的阳性表达比较 HSP70在胶质细胞瘤局部复发组与无复发组中的阳性率分别为87.50%、55.56%，无差异(χ2=5.520，P>0.05)，见表2。

表1 HSP70在胶质细胞瘤各病理分级中的阳性表达比较(n)

2.3HSP70对胶质细胞瘤局部复发时间及1年死亡率的影响 结果表明，HSP70阳性患者复发时间〔(5.13±0.97)个月〕明显早于HSP70阴性患者〔(8.34±1.04)个月〕(t=5.264，P<0.05)。1年死亡率方面，HSP70阳性患者为65.79%，HSP70阴性患者为16.67%，组间差异显著(χ2=5.115，P<0.05)。

表2 HSP70在胶质细胞瘤局部复发组与无复发组中的阳性表达比较(n)

3 讨 论

胶质细胞瘤是临床常见的颅内肿瘤类型，约占颅内肿瘤的45%〔4〕。胶质细胞瘤主要侵袭中枢神经系统白质与灰质的胶质细胞，严重危害人类生命〔5〕。目前的研究表明〔6，7〕，胶质细胞瘤具有无限增殖与抗细胞凋亡两个主要特点，因此在肿瘤的发生、发展过程中，肿瘤细胞密度逐渐上升，核分裂象增加，细胞异型性改变显著。胶质细胞瘤分子生物学改变涉及多种癌基因的异常激活、扩增以及高表达等，抑癌基因的突变、失活以及细胞周期基因与凋亡相关基因的异常表达〔8，9〕。

HSP70蛋白家族属于HSPs中最保守及最主要的一类蛋白，目前的实验表明〔10〕，HSP70拥有分子伴侣样的作用。实验研究证明〔11〕，HSP70可以通过抑制多种凋亡通路起到抑制细胞凋亡的效果。因此，HSP70对于细胞的生长以及增殖起到显著的保护作用。本研究发现随着肿瘤分级的逐步提升，肿瘤恶性化程度的逐步越高，HSP70的阳性表达亦出现逐步升高的趋势，说明HSP70与胶质细胞瘤的分化程度存在较大的关系〔12〕。因此，检测HSP70可以预测胶质细胞瘤患者恶性化程度与预后。有研究表明，HSP70阳性表达，不但能够介导错配蛋白的降解，协调肿瘤细胞蛋白的快速代谢平衡，还能介导癌基因及抑癌基因产物的构像成熟、跨膜转运，通过影响细胞增殖过程参与细胞周期、细胞间信号转导，使肿瘤细胞得以无限增殖〔13〕。此外，胶质细胞瘤的临床复发率较高，本研究发现局部复发组HSP70阳性率较高，而且HSP70阳性组患者复发时间明显早于HSP70阴性组。说明检测HSP70可以作为早期预测肿瘤有无复发的一个重要指标，而且HSP70蛋白对于患者的预后，特别是1年期死亡率，有着较高的价值。

4 参考文献

1周金桥，王景涛，刘秋红，等.人脑星形胶质细胞瘤恶性程度相关蛋白表达谱的分析与鉴定〔J〕.中华神经医学杂志，2012；11(8)：780-3.

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3赵东利，谢小卫，王书文，等.热休克蛋白70反义寡核苷酸诱导胶质细胞瘤凋亡的研究〔J〕.现代肿瘤医学，2007；15(7)：909-11.

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7Li G，Xu Y，Guan D,etal.HSP70 protein promotes survival of C6 and U87 glioma cells by inhibition of ATF5 degradation.〔J〕.J Biol Chem，2011；286(23)：20251-9.

8孙翠云，于士柱，金树梅，等.少突胶质细胞起源肿瘤染色体DNA失衡的比较基因组杂交研究〔J〕.中华神经外科杂志，2011；27(5)：519-23.

9戴春来，陈 亮，邱 香，等.人脑星形细胞瘤的病理分级与微血管密度相关性的研究〔J〕.中国实验诊断学，2009；13(10)：1454-5.

10尹 宏，永 胜，赵海龙，等.星形胶质细胞瘤组织中NGF和TrkA表达及临床意义〔J〕.山东医药，2013；53(6)：15-7.

11邵淑红，李尊岭，潘 芳.差异性应激对青、老年大鼠海马HSP70 mRNA表达的影响〔J〕.中国老年学杂志，2010；30(2)：236-7.

12闫国防，廖勇仕，梁日初，等.RhoE在诱导人脑胶质细胞瘤凋亡中的作用〔J〕.实用医学杂志，2013；29(6)：864-7.

13任 力，郑吉春，李德昌，等.脑少突胶质细胞瘤颅外转移临床病理观察〔J〕.诊断病理学杂志，2010；17(4)：271-4.