新辅助化疗PF方案对口腔鳞癌Survivin、EGFR和MVD表达的影响及意义

王 芳

(滨州医学院附属医院口腔颌面外科，山东 滨州 256600)

口腔鳞癌是常见的口腔恶性肿瘤，临床主要是手术治疗并常规使用术前化疗联合术后放化疗以提高口腔鳞癌患者的远期疗效。术前化疗又称诱导缓解治疗或新辅助化疗，是指在放射性治疗或手术治疗前进行缓解治疗，有利于减少患者机体的肿瘤负荷。研究〔1〕认为：化疗对颌面部鳞癌没有确切的根治作用，临床上不适宜将化疗作为口腔鳞癌的根治性治疗措施。也有报道〔2〕指出：新辅助化疗有利于提高患者的疗效，但临床上缺乏客观评价其化疗疗效的评价标准。本研究分析PF方案新辅助化疗对组织凋亡抑制剂因子(Survivin)、表皮生长因子受体(EGFR)、微血管密度(MVD)的表达影响，探讨其疗效与作用途径。

1 资料与方法

1.1临床资料 选取2009年12月至2013年12月我院口腔科112例未经任何辅助治疗的口腔鳞癌患者，全部患者符合口腔鳞癌的诊断标准〔3〕，排除具有化疗禁忌证的患者。根据患者术前是否行PF方案新辅助化疗将患者分为观察组与对照组。观察组56例，男29例，女27例，年龄56～74〔平均(63.62±4.23)〕岁，肿瘤部位：颊部12例，口底10例，舌缘9例，舌腹8例，舌根5例，唇部3例，牙龈6例，咽旁3例；依照世界抗癌联盟(UICC)对肿瘤的TNM临床分期标准〔4〕，Ⅱ期6例，Ⅲ期26例，Ⅳ期24例；组织分级：Ⅰ级12例，Ⅱ级38例，Ⅲ级6例。对照组56例，男28例，女28例，年龄57～75〔平均(64.68±4.55)〕岁，肿瘤部位：颊部11例，口底11例，舌缘10例，舌腹7例，舌根5例，唇部4例，牙龈5例，咽旁3例； Ⅱ期5例，Ⅲ期26例，Ⅳ期25例；组织分级：Ⅰ级11例，Ⅱ级37例，Ⅲ级8例；两组性别、年龄、发病部位、肿瘤临床分期与组织分级等比较差异无统计学意义(均P>0.05)，具有可比性。

1.2化疗方案 全部患者均行手术切除术，观察组患者术前行PF方案〔顺铂(CDDP)+5-氟尿嘧啶(5-Fu)〕新辅助化疗，完成术前2个疗程的化疗后7 d内行手术治疗。新辅助化疗方法：①d1：快速静滴250 ml 20%甘露醇(厂商：北京双鹤药业公司，批号：H20060353)，避光环境下静滴500 ml 2.5%氯化钠溶液(天津药业公司，批号：H20013006)联合CDDP(云南生物谷灯盏花药业公司，批号：H20043889)100 mg/m2，静注20 mg呋塞米(金陵药业公司，批号：H20054671)。②d1～d5：缓慢静滴250 ml 5%葡萄糖液(中国大冢制药公司，批号：H12020021)联合5-Fu(商品名：扶时可，海南普利制药公司，批号：H20041742)375 mg/m2。治疗过程中需依据患者的年龄、病情、耐受等情况调整药物剂量，并及时补充水电解质，避免酸碱失调及对症支持治疗。对照组患者术前未行化疗，两组患者术中获取病理组织，术后采用免疫组化方法检测Survivin、EGFR、MVD的表达。

1.3检测方法 4%甲醛固定，石蜡包埋，厚度约4 μm。染色一抗Survivin、EGFR、MVD鼠抗人单克隆抗体，由北京生物公司提供。检测试剂盒购自北京中杉金桥公司。

1.4观察指标

1.4.1免疫组化结果评定 随机选取镜下5个不重叠的高倍视野(×400)，记录细胞总数与阳性细胞数，统计阳性细胞率。Survivin的阳性细胞为细胞质出现棕黄色的颗粒状物质，EGFR阳性细胞为细胞膜呈现浅褐色或棕褐色，MVD阳性表达是指单个或多个血管内皮细胞呈现棕黄色。

1.4.2化疗疗效评估 依照UICC疗效评估标准〔4〕，完全缓解(CR)是指肉眼观察肿瘤完全消失，无新病灶的出现；部分缓解(PR)是指肿瘤体积减小≥50%，无出现新病灶；稳定(SD)是指肿瘤体积减小<50%，无新病灶；进展(PD)是指肿瘤体积无变化，伴有新病灶的出现，完全缓解与部分缓解提示临床治疗有效，而稳定与进展提示临床治疗无效。

1.5统计学方法 应用SPSS18.0软件行χ2、t检验。

2 结 果

2.1两组口腔鳞癌组织Survivin、EGFR、MVD表达情况 观察组Survivin、EGFR、MVD阳性表达率分别为44.64%(25/56)、16.07%(9/56)、25.00%(14/56)，均显著低于对照组的57.14%(32/56)、46.43%(26/56)、42.86%(24/56)(均P<0.05)，口腔鳞癌组织Survivin、EGFR表达情况见图1。

图1 口腔鳞癌Survivin、EGFR阳性表达(×400)

2.2Survivin、EGFR、MVD表达与化疗疗效的关系 56例观察组患者经化疗后，CR 6例(10.71%)，PR 40例(71.43%)，SD 9例(16.07%)，PD 1例(1.79%)，临床治疗有效率〔29例(63.64%)、42例(91.30%)、40例(86.96%)〕高达82.14%， 未经术前化疗的对照组临床治疗有效率仅达51.79%(29/56)，两组比较差异具有统计学意义χ2=5.03，P<0.05)，Survivin、EGFR、MVD阴性表达组化疗有效率显著高于Survivin、EGFR、MVD阳性表达组〔18例(39.13%)、4例(8.9%)、6例(13.04%)〕(均P<0.05)。

3 讨 论

鳞状细胞癌是口腔常见的恶性肿瘤，随着对鳞癌发生发展机制的研究的不断深入，研究发现鳞癌的发病与细胞迁移、细胞周期调控紧密相关〔5〕。Survivin是一类具有参与细胞周期调控与抑制细胞凋亡的作用的重要蛋白，大量研究〔6〕证实了Survivin可在多数肿瘤组织中呈现高表达，其表达情况与癌症患者的病情发展与恶性肿瘤的组织学分级等呈正相关。此外，陈中等〔7〕采用免疫组化方法检测正常口腔组织与口腔鳞癌组织中发现口腔鳞癌组织Survivin阳性表达率显著高于口腔黏膜下纤维化病变组织，同时，Western Blot方法验证了Survivin在口腔黏膜下纤维化病变表达增加，从而推测Survivin在癌变发展过程中的促进作用，而正常口腔黏膜组织无Survivin的表达，鳞癌组织的阳性表达率高达55%，并随着临床分期、组织分级的增加，其Survivin阳性表达率明显增加。刘换新等〔7，8〕提示Survivin通过抑制正常细胞凋亡，增强癌症细胞的生存能力，因而，Survivin表达越高，恶性肿瘤细胞的恶性程度越强，越容易发生癌症细胞的转移与侵袭。EGFR是具有酪氨酸激酶活性的重要受体，具有指导细胞增殖，且与肿瘤的形成发展密切相关，研究〔9〕指出：经术前放疗联合化疗后，恶性肿瘤的EGFR阳性表达临床显著降低。国内研究〔10〕也显示：EGFR在正常口腔黏膜组织与口腔鳞癌组织中的阳性表达具有明显差异，且其表达在口腔鳞癌的转移、浸润中起着重要的作用。MVD是恶性肿瘤在血管形成期的肿瘤发生发展的重要预测指标，同时它也是常见的提示癌症患者预后的指标，MVD表达水平越高，患者的预后越差。因为当肿瘤生长直径达1～2 mm时，恶性肿瘤若要继续生长时，必须要求机体提供足量的营养物质，这促进了新生血管的形成〔11〕。目前，口腔鳞癌PF新辅助化疗对Survivin、EGFR、MVD表达的影响及Survivin、EGFR、MVD在化疗过程中的作用途的研究少，因此，本研究旨在探讨PF方案新辅助化疗对Survivin、EGFR、MVD表达的影响。

本研究结果提示PF方案新辅助化疗可降低鳞癌组织Survivin、EGFR、MVD阳性表达，提高患者的治疗有效率。经进一步分析发现，新辅助化疗可通过增加Survivin、EGFR、MVD阴性表达以提高患者的化疗疗效。分析Survivin、EGFR、MVD阴性表达率越高、患者化疗疗效越佳的原因可能是Survivin、EGFR、MVD通过不同途径干扰了细胞正常凋亡与增殖的平衡，增强肿瘤细胞的生存能力，促进了口腔鳞癌细胞的发生与发展〔12〕；同时，PF方案新辅助化疗可能通过抑制Survivin、EGFR、MVD的表达，降低了肿瘤细胞的增殖活性与生长能力。因此，推测Survivin、EGFR、MVD在PF方案新辅助化疗的作用机制中发挥重要的作用。

4 参考文献

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