ICP-MS法测定复方龙血竭胶囊中5种有害元素的残留量

云南省食品药品检验所，云南 昆明 650011

ICP-MS法测定复方龙血竭胶囊中5种有害元素的残留量

郭毅新张元杰来国防

云南省食品药品检验所，云南 昆明 650011

目的建立复方龙血竭胶囊中铅、镉、砷、汞、铜5种重金属及有害元素含量的测定方法。方法采用电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS)，样品经微波消解后测定，在线引入内标以校正基体效应。结果各元素在一定浓度范围内线性关系良好(r≥0.9990)；检测限为0.389 ng·g-1～3.548ng·g-1；加样回收率为87.5% ～109.4%，RSD(n=9)均小于9.1%。结论该方法较简便、快速、准确，可用于复方龙血竭胶囊中有害元素的测定。

电感耦合等离子体质谱法；复方龙血竭胶囊；重金属及有害元素；微波消解

复方龙血竭胶囊是由三七、龙血竭、冰片3味中药组成的复方制剂，具有活血化瘀、通窍止痛之功效，临床试验表明其缓解心绞痛等症状的效果明显优于复方丹参胶囊，可用于冠心病、稳定型心绞痛等心血管疾病的治疗[1]。心血管疾病多需要长期用药的特点，对重金属及有害元素等影响药物安全性的关键因素提出了更高的要求。

近年来，主产地土壤砷污染以及对土壤中镉等有害元素的富集作用使得对重金属有害元素的测定成为三七及其成方制剂如三七通舒胶囊、三七葛根胶囊等质量控制的重要指标[2-5]。因此，在复方龙血竭胶囊质量标准制定及质量控制过程中，有害元素的测定有充分的必要性。本实验运用电感耦合等离子体质谱建立了同时测定复方龙血竭胶囊中铅、镉、砷、汞、铜5种重金属及有害元素的方法，该方法简便、快速、准确，可用于复方龙血竭胶囊的质量控制。

1 仪器与试剂

1.1 仪器 Agilent 7700x电感耦合等离子体质谱仪(美国Agilent)；ETHOS One高效微波消解仪(意大利Mlistone)；TB-215D电子天平(美国 Denver)；UP ulupure超纯水制造系统(成都超纯)。

1.2 标准溶液 铅单元素标准溶液GBW08619 (1000μg/ml，中国计量科学研究院)；镉单元素标准溶液GBW08612 (1000μg·ml-1，中国计量科学研究院)；砷单元素标准溶液GBW08611 (1000μg·ml-1，中国计量科学研究院)；汞单元素标准溶液GBW08617 (1000μg·ml-1，中国计量科学研究院)；铜单元素标准溶液GBW08615 (1000μg·ml-1，中国计量科学研究院)；多元素内标混合标准溶液5188-6525(美国Agilent)；杨树叶成分分析标准物质GBW07604 (国家标准物质研究中心)；

1.3 试剂 A.C.S级硝酸(美国J.T.Baker)；全部实验用水均为超纯水制造系统制备的电阻率大于18.25MΩ·cm的超纯水。

2 方法与结果

2.1 测定条件 正向功率：1.55kW；采样深度：9.0mm；He碰撞气流量：4.2L·min-1；载 气 流 速：0. 90L·min-1；进 样 速 度：0.1rps；测量点数/峰：3；重复次数：3；各元素采集质量数与采集时间见表1。

表1 各元素采集质量数与时间

2.2 供试品溶液制备 将本品内容物适量，研磨混合均匀。取约0.5g，精密称定，置微波消解罐中，加硝酸10ml，密闭并按表 2所列参数进行消解。消解完全后，消解液冷却至60℃以下，取出消解罐，放冷，将消解液转入50ml样品管中，用少量水洗涤3次，洗涤液合并于样品管中，加水稀释至刻度，摇匀，即得。

2.3 标准品溶液制备 精密量取铅、镉、砷、铜元素标准溶液适量2%硝酸溶液稀释制成每1ml含铅、砷0ng、1ng、5ng、10ng、20ng，含镉0ng、0.5ng、2.5ng、5ng、10ng，含铜0ng、50ng、100ng、200ng、500ng的系列浓度混合标准溶液。另精密量取汞元素标准溶液适量，用2%硝酸溶液稀释制成每1ml分别含汞0ng、0.2ng、0.5ng、1ng、2ng、5ng的系列标准溶液(临用现配)即得。

表2 微波消解仪工作参数

2.4 内标溶液制备 精密量取多元素内标混合标准溶液适量，用水稀释制成每1ml分别含锗(Ge)、铟(In)、铋(Bi)1μg的混合溶液，即得。

2.5 方法学考察

2.5.1 线性关系 依次将仪器的样品管插入各个浓度的标准溶液中，按“2.1”项下条件进行测定，以3次测量值的平均值为纵坐标 Y，相应浓度(ng·ml-1)为横坐标 X，绘制标准曲线。5种元素的标准曲线线性关系良好，相关系数均在 0. 9990以上(见表3)

表3 标准曲线及线性范围

2.5.2 仪器检出限 以 2%硝酸溶液连续测定10次，以测定结果的3倍标准偏差所对应的浓度值作为各元素的检出限。铅、镉、砷、汞、铜的检出限分别为：2.917ng·g-1，0.389ng·g-1，0.516ng·g-1， 0.821ng·g-1，3.548 ng·g-1。

2.5.3 重复性 取本品内容物约 0. 5 g，共6份，分别按供试品溶液的制备方法操作，按“2.1”项下条件进行测定，计算各元素含量。结果铅、镉、砷、汞、铜含量RSD(n=6)分别为6.3%，4.9%，6.2%，5.1%，4.4%。

2.5.4 精密度 取前述重复性试验所用样品约0.5g，按供试品溶液的制备方法操作，按“2.1”项下条件连续测定6次，计算铅、镉、砷、汞、铜6次测定结果的RSD(n=6)分别为0.9%，1.6%，2.5%，5.3%，3.7%。

2.5.5 加样回收率 取前述重复性试验所用样品内容物共9份，每份约0.5g，精密称定，置消解罐中，分低、中、高3水平，分别加入各元素的混合标准溶液(含铜10000 ng·g-1，砷500 ng·g-1的，镉1000 ng·g-1，铅1000 ng·g-1)和汞100ng·g-1的标准溶液，每水平3份，按供试品溶液制备项下步骤进行消解处理，并按“2.1”项下条件进行测定，计算加样回收率及RSD。测得5种元素的平均回收率见表4。结果表明，各元素的回收率均在87.5%～109.4%之间，符合痕量分析要求。

表4 各元素的加样回收率

2.5.6 质控物质验证 取杨树叶成分分析标准物质约0.5g，共3份，按供试品溶液的制备方法操作，按“2.1”项下条件测定，测定值与参考值吻合，结果见表5。

表5 杨树叶成分分析标准物质测定结果

2.6 样品测定结果 取复方龙血竭胶囊10批，按前述方法分别测定各元素含量，结果见表6。

表6 样品测定结果(μg·g-1)

a：ND为未检出

3 讨论

相对于原子吸收法(AAS)和原子荧光法(AFS)等传统方法，ICP-MS具有低检出限、宽线性范围、可同时进行多元素测定等特点，已成为重金属及有害元素测定的首选方法。

研究显示，铅、镉、砷、汞等重金属聚积可促发动脉粥样硬化、冠心病、心律失常、高血压等心血管疾病[5]。因此，对于需长期服用的心血管疾病药物，重金属及有害元素安全性指标的控制须引起充分的重视。参照《中国药典》2010年版一部对于甘草等中药材中铅不得过百万分之五，镉不得过千万分之三，砷不得过百万分之二，汞不得过千万分之二，铜不得过百万分之二十的限度标准，复方龙血竭胶囊中各元素含量均低于规定值。一定程度上说明生产过程中的重金属及有害元素污染得到了较好的控制，且渗漉提取工艺使用的70%乙醇对于三七中有害元素的可能溶出率相对较小。

[1]庆慧，范军铭，王守富，等. 复方龙血竭胶囊治疗稳定型心绞痛随机对照多中心临床研究[J]. 中国中医药信息杂志，2009，16(2)：10～12.

[2]阎秀兰，廖晓勇，于冰冰，等. 药用植物三七对土壤中砷的累积特征及其健康风险[J].环境科学，2011，32(3)：880～885.

[3]林龙勇，于冰冰，阎秀兰，等. 三七对土壤中镉、铬、铜、铅的累积特征及健康风险[J/OL].生态学报，2014(11). http://www.cnki.net/kcms/detail/10.5846/stxb201307261958.html

[4]刘洋，杨华蓉，林大胜，等. 符合欧盟技术要求的三七通舒胶囊原料及制剂重金属测定方法研究[C].2010年中国药学大会暨第十届中国药师周论文集. 2010.

[5]崔蕴慧，利奕成. ICP-AES法测定三七葛根胶囊中重金属的含量[J].中国卫生检验杂志，2012，22(11)：2560～2561，2565.

[6]杨菊贤，杜勤. 环境污染是促发心血管疾病的重要危险因素[J].心血管病学进展，2008，29(2)：214～217.

Determinationof5heavymetalsinFufanglongxuejiecapsulesbyICP-MS

GUO Yi-xin，ZHANG Yuan-jie，LAI Guo-fang*

Yunnan Institute for Food and Drug Control，Kunming 650011，China

ObjectiveTo establish a method for determination of Pb，Cd，As，Hg and Cu in Fufanglongxuejie capsules.MethodsThe samples were determined by inductively coupled plasma-mass spectrometry (ICP-MS) after microwave digestion. The internal standard solution was used to eliminate the matrix effect.ResultEach element showed good linearity in certain concentration range(r≥0.9990).The detection limits ranged from 0.389 ng·g-1～3.548ng·g-1. The average recoveries were from 87.5% to 109.4% with RSD no more than 9.1%.ConclusionThe method is simple，efficient and accurate for determination of heavy metals in Fufanglongxuejie capsules.

ICP-MS; Fufanglongxuejie capsules; Heavy metals; Microwave digestion

郭颜新(1955-)，云南食品药品检验所仪器室主任，E-mail:gyxxk@sina.com

R917

A

1007-8517(2014)14-0011-03

2014.05.26)