血清肿瘤标志物NSE、CA-125在非霍奇金淋巴瘤诊断及预后判定中的临床价值

房丽 王轶楠 马守东 肖建波 李海丽 王玲玲 刘翠华

·论著·

血清肿瘤标志物NSE、CA-125在非霍奇金淋巴瘤诊断及预后判定中的临床价值

房丽 王轶楠 马守东 肖建波 李海丽 王玲玲 刘翠华

目的探讨血清肿瘤标志物NSE和CA-125在非霍奇金淋巴瘤(NHL)中的表达情况及临床意义。方法采用电化学发光免疫测定法测定56例NHL患者血清肿瘤标志物NSE和CA-125的表达水平，判定NSE和CA-125的表达与NHL患者临床特征及其预后的相关性。结果56例NHL患者化疗前血清NSE值(34.63±8.54)μg/L，CA-125(47.59±9.53)μg/L，均明显高于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)；且NSE、CA-125表达水平的高低与NHL患者B症状、临床分期、IPI预后指数及治疗效果等临床特征相关(P<0.05)。结论血清肿瘤标志物NSE、CA-125联合定量检测可提高NHL诊断敏感性，同时对NHL临床分期、疗效判定及预后等方面具有一定临床意义。

神经元特异性烯醇化酶；糖链核心蛋白抗原；非霍奇金淋巴瘤；肿瘤标志物

非霍奇金淋巴瘤(NHL)是来源于造血淋巴组织、异质性非常强的一类肿瘤，近年来发病率呈逐年升高趋势；目前，NHL的诊断主要依据组织病理学结果，而病理检查手段并不能反映临床分期、肿瘤负荷、侵袭能力和浸润程度以及治疗的反应等。所以，临床上除结合疾病特征和影像学检查外，一些血清肿瘤标志物也越来越多显示其在淋巴瘤的早期诊断、监测治疗、疗效评价、预后判定和预测复发中的临床意义。本文通过探讨NSE、CA-125与NHL的关系，拟寻找一种或多种和肿瘤生物学行为相关、特异性较强、易于检测、适合随访的分子蛋白水平的检测指标，以便为临床实现个体化诊治提高可靠实验依据。

1 资料与方法

1.1 一般资料 收集2008年1月至2011年1月唐山市人民医院收治初诊NHL 56例(NHL组)，男42例，女14例；年龄19～76岁，平均52岁；病例均经组织病理活检及免疫组织学检查确诊为NHL，B细胞亚型44例(弥漫大B细胞淋巴瘤32例，结外边缘区B细胞粘膜相关淋巴组织淋巴瘤5例，滤泡性淋巴瘤和套细胞淋巴瘤各3例，小淋巴细胞淋巴瘤1例)；T细胞亚型12例(非特异性外周T细胞淋巴瘤6例，NT/T细胞淋巴瘤5例，T淋巴母细胞淋巴瘤1例)。原发结内和结外NHL分别为32例和24例。按Ann Arbor分期，Ⅰ、Ⅱ期患者32例，Ⅲ、Ⅳ期患者24例。按国际预后指数IPI评分，低危-低中危35例，高中危-高危21例。所有患者均有明确可评价的病灶。详细记录每位患者年龄、性别、病理分型、临床分期、是否有B症状、LDH水平、β2-MG水平、血常规、IPI评分、治疗方案、化疗周期数、疗效评价等观察指标，建立数据库。另选取同期有高热症状、查体淋巴结肿大、最后病理诊断排除恶性疾病的淋巴结良性病变患者12例(良性淋巴结组)；男8例，女4例；年龄16～64岁，平均46岁；其中，急性反应性淋巴结炎6例，慢性淋巴结炎和淋巴结结核患者各3例。健康对照组20例为唐山市人民医院体检中心健康体检者，男12例，女8例；年龄24～72岁，平均50岁。

1.2 排除标准 有严重合并症、重要脏器器质性病变以及有神经系统疾病者。

1.3 实验方法

1.3.1 标本采集：分别于化疗前和4～6周期CHOP/R-CHOP或EPOCH方案化疗后采集NHL组患者静脉全血各2 ml，健康对照组和淋巴结良性组分别于入院初期采全血2 ml。3 500 r/min离心5 min后分离上清液，置于-80℃冰柜冻存备用。

1.3.2 采用电化学发光免疫测定法测定血清NSE、CA125值；试剂盒购自罗氏公司；实验步骤：按说明书操作，以全自动Labsystems 352型酶标仪测定。用常规法测定外周全血常规、血清LDH和β2-MG水平。试剂盒测定的正常人血清NSE范围：0～18.0 μg/L；CA125：0～35 μg/L。

1.4 疗效评价 疗效评价按国际淋巴瘤工作组制定的NHL治疗反应标准，分为完全缓解(CR)、不确定的完全缓解(CRU)、部分缓解(PR)、稳定(SD)和进展(PD)；其中，CR+CRU+PR为治疗有效组，SD+PD为治疗无效组。

2 结果

2.1 NHL组、良性淋巴结组与健康对照组间血清NSE和CA-125标志物表达水平的比较 NHL组化疗前血清NSE和CA-125水平明显升高，与良性淋巴结组和健康对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)；良性淋巴结组与健康对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。见表1。

表1 3组两种血清肿瘤标志物水平比较 ±s

注：与NHL组比较，*P<0.05

2.2 NHL患者临床特征与血清NSE、CA-125表达相关性分析 56例NHL患者中，血清NSE、CA-125表达水平灵敏度分别为57.14%和41.07%，两种肿瘤标志物联合检测灵敏度和特异度分别为75.6%和93.8%，NHL患者的性别、年龄、病理亚型、淋巴结类型等临床特征与血清NSE、CA-125的阳性表达差异无统计学意义(P>0.05)；而临床分期越晚、IPI评分越高、有B症状的NHL患者血清NSE、CA-125表达多阳性。见表2。

表2 NHL患者临床特征与血清NSE、CA-125表达相关性分析 例(%)

2.3 NHL不同分期间血清NSE、CA-125水平的比较 Ⅲ、Ⅳ期NHL患者化疗前血清NSE和CA125水平较Ⅰ、Ⅱ期患者明显升高，差异有统计学意义(P<0.05)。见表3。

表3 血清NSE、CA-125水平与NHL分期的关系

2.4 NHL不同疗效组间血清NSE、CA-125水平的比较 56例NHL患者经4～6个周期CHOP/R-CHOP或ECHOP等方案化疗后，48例获得CR或PR(有效组)，8例为SD或PD(无反应组)；与化疗前比较，化疗后有效组血清NSE、CA125水平明显降低，差异有统计学意义(P<0.05)；而无反应组化疗前后则无明显变化(P>0.05)。见表4。

3 讨论

恶性淋巴瘤预后评估标准多数以临床表现为主；NHL国际预后指数为年龄>60岁，血清LDH>1倍正常值，一般状况评分2～4分，临床分期Ⅲ-Ⅳ期，结外受累部位>1个。而推荐较多的LDH、β2微球蛋白干扰因素太多，特异性差；如肝炎、心肌损伤、感染、血液系统疾病等均可致LDH升高；β2微球蛋白测定主要用于监测近端肾小管的功能，糖尿病肾病、血液系统肿瘤等均可使其升高。随着现代生物化学、免疫学、分子生物学研究的迅速发展，一些具有潜在前景的标志物正逐渐为人们所认识和评估；血清肿瘤标志物检测具有损伤性小、敏感性高、操作过程简便、费用成本低、出结果快等优点；因此，在恶性淋巴瘤辅助诊断中有其独特优势。有研究显示，不同类型肿瘤标志物可出现于不同类型的肿瘤细胞，而同一种肿瘤细胞也可出现2种及以上的肿瘤标志物[1]。

表4 NHL患者不同疗效组间血清NSE、CA-125表达情况

注：与治疗前比较，*P<0.05

烯醇化酶是糖元酵解关键酶，由α、β、γ 3个亚型组成。神经元特异性烯醇化酶(NSE)是烯醇化酶的γ型同工酶，是一种能量代谢酶，可以反映细胞更新和凋亡率；主要特异性的存在于神经元和神经内分泌细胞胞质中[2]，如APUD细胞；它被发现在与神经内分泌组织起源有关的肿瘤中，特别是SCLC中有过量表达；目前NSE主要作为神经系统损失和小细胞肺癌的标志物。近年来随着研究的深入，已有多项NSE与NHL的相关性研究。1987年即有文献显示NSE在恶性淋巴瘤中有表达(11/23)[3]；1999年Massarelli等[4]测定了51例恶性淋巴瘤患者淋巴标本中NSE的表达，16例HL患者中，NSE阳性12例；35例NHL患者中，13例NSE阳性，且NSE阳性病例均在CD30(+)的R-S细胞中有表达，提示恶性淋巴瘤中NSE表达与CD30表达密切相关。2011年Liang等[5]研究显示：NSE和弥漫大B细胞的关系：NSE高水平组预后更差，美罗华作用有限。综上研究显示，NSE在霍奇金淋巴瘤以及非霍奇金淋巴瘤中均有不同程度的表达，且和预后差相关。国内樊慧杰等[6]曾报道NSE在非霍奇金淋巴瘤中的临床意义：40例NHL中25例患者血清NSE浓度高于正常值上限(占所有病例的62.5%)。

糖链核心蛋白抗原(CA125)为一种来自体腔上皮的可微量存在于正常组织的蛋白，是卵巢癌和宫颈癌的首选肿瘤标志物。近几年研究发现，CA125在NHL患者中显著增高，且与临床分期、疾病进展、肿瘤浸润等相关[7]；NHL最重要的血清学标志物中，β2-MG反映肿瘤负荷，LDH反映肿瘤增生活性，而CA125则反映肿瘤侵袭潜能[8]。实际上CA125并非由NHL细胞直接表达，而可能是NHL细胞释放的淋巴因子刺激间皮细胞，使后者表达和分泌CA125；所以，CA125不同于由淋巴瘤细胞直接释放的β2-MG和LDH，而是反映间皮细胞对肿瘤的反应性[9]。钱思轩等[10]报道结果表明，约42% NHL患者血清CA125阳性，而且CA125升高与患者病变范围、程度、治疗有关；在化疗后则下降，当达到完全缓解时，CAA125可降至正常。

本研究结果显示，血清NSE、CA125在56例NHL患者中表达阳性率为57.14%和41.07%；而在健康患者及淋巴结良性患者中含量比较稳定，差别有统计学意义(P<0.05)。两种肿瘤标志物联合检测灵敏度和特异度分别为75.6%和93.8%；阳性率高于单一检测，灵敏度及特异度均明显提高；而且NHL临床分期越晚，IPI评分越高，上述两项指标表达水平越高，患者预后也越差；而治疗有效患者中，治疗后的血清NSE、CA-125表达水平较治疗前明显下降(P<0.05)。因此，我们认为联合检测血清NSE、CA-125含量可作为NHL患者辅助诊断、疗效观察和预后判定的重要指标之一。因考虑到肿瘤细胞生物学行为的多样化和治疗过程中异质化的可能，我们建议肿瘤标志物应该多项联合、多次检测，以动态反映肿瘤细胞学的变化。

综上所述，血清NSE、CA-125可能是与恶性淋巴瘤疾病侵袭性相关的、新的分子标志物；两种肿瘤标志物联合检测可明显提高NHL诊断的灵敏度，在NHL诊断、临床分期、疗效判定及预后评估中将具有重要临床价值，而且可能是美罗华时代新的预后因子，值得临床进一步关注。

1 宋红伟,王雅杰.三种血清肿瘤标志物联合检测对恶性肿瘤的诊断价值.实用癌症杂志，2009,24:483-485.

2 Tracy MR,Hedges SB.Evolutionary history of the enolase gene family.Gene,2000,259:129-138.

3 Judith N,Annic G,Jacqueline E,et al.Neuron-specific enolase and malignant lymphomas(23 cases).Virchows Archiv A，1987，412:89-93.

4 Massarelli G,Onida GA,Piras MA,et al.Neuron-specific enolase(gamma enolase,gamma-gamma dimer)expression in Hodgkin’s disease and large cell lymphomas.Anticancer Res，1999，19:3933-3938.

5 Liang W,Panpan L,Qirong G,et al.Prognostic significance of neuron-specific enolase in patients with diffuse large B-cell lymphoma treated with rituximab-based immunochemotherapy.Leukemia δLymphoma,September，2011,52:1697-1703.

6 樊慧杰，耿其荣，徐海鹏，等.血清神经元特异性烯醇化酶在非霍奇金淋巴瘤中的临床意义.中国肿瘤,2006,15：50-53.

7 Zidan J,Hussein O,Basher W,et al.Serum CA125:a tumor mallker for monitoring response to treatment and follow-up in patients with non-Hodgkin’s lymphoma.Oncologist,2004,9:417-421.

8 Benboubker L,Valat C,Linassier C,et al.A new serologic index for low-grade non-Hodgkin’s lymphoma based on initial CA125 and LDH serum levels.Ann Oncol,2000,11:1485-1490.

9 Zeillemaker AM,Verbrugh HA,Hoynck AA,et al.CA125 secrection by peritonwal mesothelial cells.Clin Pathol,1994,47:263-265.

10 钱思轩，李建勇，吴汉新，等.非霍奇金淋巴瘤血清CA125测定的临床意义.临床血液学杂志，2004,17：37-38.

ClinicalsignificanceofserumtumormakersNSE,CA125inthediagnosisandprognosisassessmentofnon-Hodgkin’slymphoma

FANGLi,WANGYinan,MAShoudong,etal.

DepartmentofRadio-Chemotherapy,TangshanPeople’sHospital,Hebei,Tangshan063000,China

ObjectiveTo investigate the clinical significance of the two serum tumor markers-neuron specific enolase(NSE)and carbohydrate antigen 125(CA-125) in the diagnosis and prognosis evaluation of non-Hodgkin’s lymphoma (NHL).MethodsThe serum levels of NSE and CA-125 in 56 patients with NHL were measured by electrochemiluminescence immunoassay.The correlation between the expressions of NSE,CA125 and clinical characteristics as well as prognosis of patients with NHL were analyzed.ResultsBefore chemotherapy the serum levels of NSE [(34.63±8.54)μg/L] and CA-125 [(47.59±9.53)μg/L] in 56 patients with NHL were significantly higher than those in control group (P<0.05),furthermore,the expression levels of NSE and CA-125 were correlated with patient’s symptoms,clinical stage,IPI prognosis index and therapeutic effect.ConclusionThe quantitive detection of NSE combined with CA125 plays an important role in diagnosis,clinical staging and prognosis assessment for patients with NHL,which can increase diagnostic sensitivity.

neuron specigic enolase；carbohydrate antigen 125；non-Hodgkin’s lymphoma；tumor markers

10.3969/j.issn.1002-7386.2014.20.003

063000 河北省唐山市人民医院放化科(房丽、王轶楠、马守东、肖建波、李海丽、王玲玲)；河北省唐山市丰润区韩城医院(刘翠华)

R 730.4

A

1002-7386(2014)20-3051-04

2014-06-01)