中风回语颗粒对大鼠脑血流动力学及小鼠微循环的影响
2014-08-25，，，，，，
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(长春中医药大学，长春 130117)
中风回语颗粒对大鼠脑血流动力学及小鼠微循环的影响
常志达，律广富，张婧卓，王建玮，林贺，曲晓波，林*
(长春中医药大学，长春 130117)
目的 观察中风回语颗粒对大鼠脑血流动力学和小鼠肠系膜微循环的影响，进而探讨其抗脑缺血的作用机制。方法 采用结扎大鼠颈外动脉的方法，以大鼠脑血流量、脑血管阻力、血压、心电等为观测指标，采用注射高分子右旋糖酐造成小鼠微循环障碍，以小鼠肠系膜微动脉的流速、血管入口直径和出口直径的变化为观测指标。结果 中风回语颗粒(6，3，1.5 g/kg)可增加大鼠脑血流量(P<0.05)，降低脑血管阻力及血压，但对大鼠心率无明显影响；中风回语颗粒(6，3 g/kg)可以升高小鼠血液流速、扩张血管管径(P<0.05，P<0.01)。结论 中风回语颗粒对大鼠脑血流动力学及小鼠肠系膜微循环具有较好的改善作用，其抗脑缺血的作用机制可能与其增加脑血流量及改善微循环有关。
中风回语颗粒；血流动力学；微循环；大鼠
中风回语颗粒是临床多年的经验方，该方由石菖蒲、胆南星、冰片、黄连、远志、川芎、郁金、土鳖虫、大黄(酒炙)组成，是国医大师任继学教授多年临床经验总结而成，其散剂作为长春中医药大学附属医院的院内制剂已在临床应用十余年，疗效好。现代临床研究表明本方用于治疗缺血性中风引起的痰瘀阻络症，症见舌蹇言涩或不语。本实验通过观察中风回语颗粒对实验性大鼠脑血流量、脑血管阻力、血压、心电和小鼠肠系膜微循环等的影响，旨在进一步探讨中风回语颗粒抗脑缺血的作用机制[1-2]。
1 材料
1.1 动物 Wistar雄性大鼠50只，体质量230～270 g；昆明种小鼠50只，体质量18～22 g，雌雄各半，均由吉林大学动物中心提供，动物合格证编号：SCXK-(吉)2003-0005。
1.2 药品与试剂 中风回语颗粒(长春中医药大学研发中心提供);银杏叶分散片(湖南方盛制药股份有限公司，国药准字Z20050272，产品批号：120505)；水合氯醛(沈阳市试剂三厂)；肝素(北京鼎国生物技术有限公司)；PBS缓冲液；盐酸肾上腺素注射液(上海禾丰制药有限公司)。
1.3 仪器 Power Lab 8通道生理记录仪(埃德仪器国际贸易有限公司产品)；微循环系统(成都泰盟科技有限公司产品)。
2 方法
2.1 大鼠脑血流动力学指标测定 取Wistar大鼠50只，随机分为5组,即中风回语颗粒高(6 g/kg)、中(3 g/kg)、低(1.5 g/kg)剂量组、阳性药组(银杏叶分散片0.2 g/kg)和空白组，每组10只。各组均灌胃给药6 d。第7天腹腔注射10% 水合氯醛(0.35 mL/100 g)麻醉，进行手术。仰卧固定在手术台上，切开右上腹，暴露十二指肠，以备十二指肠给药。颈部碘伏消毒后，正中切口，钝性分离甲状腺等组织。分离左侧颈总动脉及颈外动脉，并结扎颈外动脉，阻断颈外动脉供血。选用1 mm电磁流量探头按放在颈总动脉上(其口径与颈总动脉直径一致),利用颈总动脉的血流量反映供应脑内的颈内动脉血流量[3-4]。分离右侧颈总动脉，插管经压力感受器记录血压(mmHg)。插肢体电极检测心电图。
完成有关记录装置的准备工作，待动物状态稳定后，同步记录给药前及给药后即刻和5，10，30，60，90，120 min各时间点的颈总动脉血流量、心电图、血压等。脑血管阻力用血管两端压力差与血流量的比值表示。
2.2 小鼠肠系膜微循环观察 将昆明种小鼠随机分成5组,每组10只，雌雄各半。即空白组、阳性组(银杏叶分散片 0.3 g/kg)、中风回语颗粒高(8 g/kg)、中(4 g/kg)、低(2 g/kg)剂量组。
各组采用等容积不等浓度药液灌胃给药，空白组灌胃等体积蒸馏水，1次/d，连续7 d。实验前动物禁食不禁水12 h，第7天给药后60 min，各组小鼠用3%水合氯醛(0.1 mL/10 g)腹腔注射麻醉，仰卧固定于手术台上，四肢线绳固定，腹部去毛，于腹部正中耻骨联合上切一长约1.5 cm的切口，轻轻拉出一段肠袢，将肠系膜放在恒温37 ℃平台上,肠管浸入PBS缓冲液中,脱脂棉吸净周围体液，采用透射光源，放大倍数为6×10倍。观察滴加盐酸肾上腺素(Ard溶液50 μg/mL,10 μL)前后及滴加盐酸肾上腺素5 min后，各组小鼠肠系膜微动脉的流速、血管入口直径和出口直径的变化，以血管出口直径和入口直径的平均值，微动脉流速为指标，进行判定。
3 结果
3.1 中风回语颗粒对大鼠脑血流量的影响 见表1。
表1 中风回语颗粒对大鼠脑血流量的影响 mL/min
注：与空白组比较，#P<0.05，##P<0.01
3.2 中风回语颗粒对脑血管阻力的影响 见表2。
3.3 中风回语颗粒对小鼠微循环的影响 见表3。
表2 中风回语颗粒对大鼠脑血管阻力的影响 mmHg(mL/min)
注：与空白组比较，#P<0.05，##P<0.01
组 别血流速度/(μm/s)管径/μm空白组 116．5±16．7 70．2±20．1 8．74±1．58 7．23±1．31 阳性组 156．2±35．0##103．1±13．9###12．31±2．99##8．79±1．80#高剂量组136．0±21．9# 108．6±27．9## 10．49±2．08# 8．50±1．37#中剂量组130．6±18．7 107．9±26．1## 10．40±1．91# 8．01±1．15 低剂量组126．9±25．3 79．3±16．9 8．93±1．87 7．47±1．53
注：与空白组比较，#P<0.05，##P<0.01，###P<0.001
4 讨论
中风回语颗粒方中君药石菖蒲涤痰宣窍，宁神益志；胆南星清化热痰；冰片开窍醒神，清热；郁金化瘀开窍，清泻心火；黄连苦寒，擅清泻心火。4药合用，既可助君药涤痰宣窍，又可清心包热邪，以治痰热蒙蔽清窍，共为臣药。佐使以川芎活血行气，土鳖虫活血化瘀通络；大黄清热泻火，泻下通便，导热下行。诸药合用，共奏涤痰宣窍，透脑清神之功效。
本实验主要考察中风回语颗粒对大鼠脑血流动力学及小鼠肠系膜微循环的影响，研究结果表明，中风回语颗粒具有增加脑血流量，降低脑血管阻力及血压，改善血液微循环，加快血液流动、扩张血管等作用。其抗脑缺血的作用机制可能与改善脑血流动力学及血液微循环有关[5-7]。
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EffectsofZhongfengHuiyuParticlesonhemodynamicsofratsandmicrocirculationofmice
CHANG Zhida,Lyu Guangfu,ZHANG Jingzhuo,WANG Jianwei,LIN He,QU Xiaobo,LIN Zhe*
(Changchun University of TCM,Changchun 130117,China)
ObjectiveTo observe the effect ofZhongfengHuiyuParticleson hemodynamics of rats and mesenteric microcirculation of mice,and to explore its mechanism of action of cerebral ischemia.MethodsThe method of ligation of extenal carotid artery of rats was adopted.The blood flow,cerebral vascular resistance,blood pressure and ECQ of rats are observational indexes.The injection of polymer dextran was used to cause microcirculatory disturbance in mice.The mesenteric arterioles of velocity,outlet diameter,blood vessels,entrance diameter changes of mice are observational indexes.ResultsZhongfengHuiyuParticles(6 g/kg,3 g/kg,1.5 g/kg)can increase the blood flow of the rats (P<0.05),reduce cerebral vascular resistance and blood pressure,but it had no obvious effect on rats’ heart rates;ZhongfengHuiyuParticles(6 g/kg，3 g/kg)can increase blood flow in mice,expand blood vessel diameter.ConclusionZhongfengHuiyuParticleshave a good effect on hemodynamics of rats and mesenteric microcirculation of mice.The mechanism of action of cerebral ischemia might be related with the increase of blood flow and the improvement of microcirculation.
ZhongfengHuiyuParticles;hemodynamics;microcirculation;rats
10.13463/j.cnki.cczyy.2014.04.009
科技部“重大新药创新”专项课题(2009ZX09012-115)。
常志达(1989-)，女，硕士研究生。研究方向：中药复方制剂分子药理学及其应用研究。
] 林 ，男，教授，博士研究生导师，电子信箱：linzhe1228@163.com。
R285.5
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：2095-6258(2014)04-0587-03
2014-03-22)
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