应用水溶助长剂从酸藤果中提取摁贝素

曾宪彪，韦宝伟，韦桂宁

0 引言

水溶助长剂是一种能促进其他非水溶性有机物在水中溶解度的物质。其助溶作用发生在远高于其最小助溶浓度(MHC)之上。在MHC之上，其助溶作用几乎呈指数上升，但更高的浓度之后，其助溶作用几乎达到坪值，不会再升高。用水将饱和溶液稀释到MHC以下时，即可回收到溶解在助长剂溶液中的植物疏水成分。水溶助长剂的增溶能力取决于助长剂的疏水性，也就是芳香磺酸盐分子上的烷基。芳香磺酸盐疏水性是随着其烷基长度增加而增加，同时对非极性分子的增溶作用增加。水溶助长剂首先被细胞表面吸附，降低细胞壁的张力，改变细胞壁通透性，进入纤维素膜[1]，穿透细胞进入细胞壁内部。水溶助长剂进入细胞壁内部之后，诱导组织结构瓦解，溶化细胞壁成分，提高细胞膜通透性，溶解疏水活性成分。

摁贝素(2,5-二羟基3-十一烷基-对苯醌)是酸藤果的活性成分，具有多种药理活性，包括抗肿瘤、抗炎、镇痛[2]，抑制丙肝病毒[3]，抗菌[4-5]，X连锁凋亡抑制蛋白的小分子抑制剂[6]，抗生育[7]，细胞毒活性[8]，脑损伤的保护[9]，抗惊厥[10]，促进伤口愈合[11]，抗抑郁[12]等作用。

摁贝素的常规提取方法有索氏提取法或用有机溶剂(苯、乙醚、乙酸乙酯、乙醇或甲醇)。其提取过程耗时而复杂，而且有机溶媒可能带来环境污染[12]。本文报道采用水溶助长剂从酸藤果中提取摁贝素的方法。

1 材料与仪器

酸藤果[Embelialaeta(Linn.)Mez]，采自广西玉林市容县四良镇的成熟果实，阴干。保存于阴凉干燥处。摁贝素对照品：含量≥98%(HPLC),批号：090M4731V，美国Sigma-Aldrich公司产品。NaCS：含量45%的水溶液，批号：1210-1260-40SC，美国NEASE公司产品。临用时，通过浓缩或稀释配制成不同浓度的溶液。高速万能粉碎机：型号DFY-400，温岭市林大机械有限公司产品；磁力加热搅拌器：78-1型，上海南汇电讯器材厂产品；熔点仪：MP470全自动熔点仪，济南海能仪器股份有限公司产品；薄层色谱扫描仪：TLC SCANNER 3型，瑞士卡玛公司产品。

2 方法

参照笔者专利方法[13]进行，将成熟果实干燥，粉碎，过筛。取能过100目的粉末，按照10%(W/V)浓度装入烧杯，并加入NaCS溶液(0.05、0.1、0.5、1.0、2.0、3.0、4.0 mol/L)，每个浓度重复试验3次。在温度28～30 ℃下，搅拌速度1 440 r/min，搅拌提取60 min，240目滤布滤过。药渣加入等量的水溶助长剂溶液，搅拌提取60 min，同法过滤。合并滤液，滤液加20倍体积的 pH 4.0盐酸溶液稀释，搅拌均匀，放置60 min使结晶物析出沉淀，倾出上清液，分离沉淀物，布氏漏斗过滤，用水洗涤，得到富含摁贝素提取物。此提取物用石油醚溶解，过滤。滤液浓缩，滤过，用乙醇洗涤，得到橙黄色摁贝素结晶。

摁贝素结晶经薄层色谱分析(展开剂为乙酸乙酯∶乙醇∶乙酸=7∶5∶0.1，扫描波长280 nm)采用TLC SCANNER 3型薄层色谱扫描仪进行含量测定。

3 结果

本试验所用的酸藤果干品含有摁贝素在2.5%～3.0%。

3.1 NaCS浓度对摁贝素提取率的影响 摁贝素的溶解性随水溶助长剂浓度的增加而增加。NaCS的最小助溶浓度(MHC)为0.1 mol/L。水溶助长剂浓度在1.0 mol/L时，提取率显著增高，2 mol/L时提取率接近坪值，3 mol/L时达到坪值，4 mol/L时，提取率不再提高。从提取成本考虑，以2 mol/L为最好浓度。见表1。

3.2 温度对提取率的影响 分别观察了25、30、40、50 ℃等温度对摁贝素提取率的影响。结果发现，在25～50 ℃范围内温度对提取率影响不显著。见表2。但温度升高可能导致提取物的杂质增加。从能耗角度考虑，认为提取温度以25～30 ℃为宜。

3.3 提取时间对提取率的影响 分别观察了连续搅拌提取30、40、60、90、120 min对摁贝素提取率的影响。结果发现，提取60 min的提取率已经达到最高，再延长提取时间将不能显著提高提取率。见表3。从能耗角度考虑，认为提取时间以60 min为宜。

表1 NaCS浓度对摁贝素提取率的影响

表2 温度对提取率的影响

表3 提取时间对提取率的影响

3.4 药材粉末粒径对提取率的影响 我们分别制备60、80、100、120目等不同粒径的药材粉末，观察其对提取率的影响。结果，60和80目粒径的提取率较低，100和120目粒径药材粉末的提取率显著提高。见表4。

表4 药材粉末粒径对提取率的影响

4 讨论

NaCS具有良好的穿透能力，能提高很多非水溶性化合物的水溶性，促进摁贝素从酸藤果组织细胞中溶出，但高浓度时(3～4 mol/L)产生跨细胞壁高渗透压，进入细胞的速度缓慢，从而影响提取效率。提升提取温度可能造成植物细胞的其他成分水解，增加提取物杂质，因此，温度不宜过高，以30 ℃为宜。水溶助长剂需要渗透到植物细胞内，才能产生提取效果。提取时间越长，提取物收率越高。但是，只要达到平衡时间，提取效率就可以达到最大。本研究发现，提取时间以60 min为宜。药材粉末粒径越大，助长剂分子越难渗透，提取率越低。本试验采用100目细粉作为投料，基本达到提取率要求。

本文采用NaCS作为摁贝素的水溶助长剂，从酸藤果中提取摁贝素，方法简单，提取率高，过程中NaCS没有发生化学反应，可重复使用，无“三废”产生，具有良好推广前景。

参考文献：

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