麸煨肉豆蔻不同提取物对大鼠离体肠平滑肌的影响

袁子民，刘 欢，胡 娜，王 静

(辽宁中医药大学，辽宁 大连 116600)

麸煨肉豆蔻收载于《中国药典》2010年版，为肉豆蔻科植物肉豆蔻Myristica fragrans Houtt.的炮制品，具有温中行气，涩肠止泻功效。其炮制麸煨后具有减毒增效作用[1]。主要含有挥发油、脂肪油、木脂素和苯丙素等化学成分。以往对肉豆蔻止泻作用的物质基础研究，主要以挥发油、水溶性成分、脂肪油研究为主，认为挥发油为肉豆蔻止泻作用的物质基础[2]，但对提油后药渣中的非挥发性、非水溶性成分还缺乏相关的药理作用研究；另外肉豆蔻炮制后挥发油含量降低，但止泻作用却增强，这与以往研究认为挥发油是主药止泻成分相矛盾，预示肉豆蔻中除挥发油以外，其他化学成分还有可能具有止泻作用。因此本文拟通过研究麸煨肉豆蔻的不同提取物对大鼠离体平滑肌自发活动的影响，为研究肉豆蔻、麸煨肉豆蔻止泻作用的物质基础及炮制机理提供科学依据。

1 材料

SPF级SD雄性大鼠，体质量(200±20) g，由辽宁长生生物技术有限公司提供。RM6240B多道生理信号采集处理系统(四川成都仪器厂)，HSS-1(B)恒温浴槽(四川成都仪器厂)；SG3300H超声波清洗器(上海冠特超声仪器有限公司)；JY92-2D超声波细胞破碎机(宁波新芝生物科技有限公司)；AR2140型电子分析天平(上海奥豪斯公司)；麸煨肉豆蔻(浙江中医药大学饮片厂提供，产地：印度尼西亚，批号：090414)；聚山梨酯-80等为分析纯，台式液自制。

2 方法

2.1 提取物的制备 取麸煨肉豆蔻粗粉200 g提取挥发油(A)，备用；蒸馏后的水煎液另器收集，药渣再加水煎煮1次，滤过，合并水煎液，浓缩至稠膏减压干燥至恒重(B)，备用；剩余的药渣干燥至恒重，加90%乙醇提取2次，滤过，合并醇提液，静置24 h，滤过，滤液真空浓缩回收乙醇至无醇味，浓缩成稠膏,减压干燥至恒重，得醇提物(C)。取醇提物适量加适量水超声分散，得混悬液；将混悬液依次用石油醚(D)、乙酸乙酯(E)、正丁醇(F)提取,各提取液及提取后的水层(G)分别减压回收溶剂，浓缩成稠膏，减压干燥至恒重,得麸煨肉豆蔻不同部位提取物。实验前取各提取物适量，加2.0%聚山梨酯-80,用超声波细胞破碎机超声溶解或混悬，配制一定浓度。

2.2 麸煨肉豆蔻不同提取物对大鼠离体十二指肠平滑肌自发活动的影响 取禁食不禁水24 h大鼠，脱颈处死，迅速剖腹取近幽门端十二指肠约10 cm，置冷台氏液中，剪去肠系膜及脂肪组织，将肠内容物冲洗干净,将肠管剪成约1.5 cm小段备用。调节恒温浴槽，控制水温在(37±0.5) ℃。将RM6240B微机生物信号采集处理系统与张力换能器相连。将肠管两端对角穿线结扎，一端固定于L型通气管上，将肠管完全浸入到30 mL台氏液的浴漕内固定，缓慢通入95% O2和5% CO2的混合气体。另一端与张力换能器相连，加3 g负荷，打开RM6240B生物信号采集处理系统，待肠管收缩稳定后，记录给药前3 min收缩曲线，采用累积给药的方式滴加药液，先加0.1 mL 2%吐温-80观察对正常离体肠收缩无影响后，依次加入一定浓度的麸煨肉豆蔻不同提取物。每次记录后用台氏液冲洗3次，给药间隔时间为30 min，记录各给药量下肠管3 min的收缩曲线。据生物信号处理系统，采集各组给药前后离体肠肌的收缩频率与振幅，用软件提供的相对移动测量计算给药前3 min和给药第6 min内的平均张力，并根据平均张力值计算出抑制率。抑制率=(加药前3 min平均张力-加药后3 min平均张力)÷加药前3 min平均张力[3-5]。

3 结果

与给药前相比，麸煨肉豆蔻挥发油、醇提物、醇提物的石油醚及乙酸乙酯提取物对离体大鼠十二指肠自主运动有抑制作用(P<0.01),其中挥发油、醇提物的石油醚、乙酸乙酯提取物抑制率较大。见表1。

表1 麸煨肉豆蔻不同提取物对大鼠离体肠平滑肌自发活动的影响

注：终质量浓度为加药后每1L台式液中相当于生药材的量; “-”无抑制作用；与加药前平均张力比较，#P<0.01。

4 讨论

本实验通过对麸煨肉豆蔻不同提取物对大鼠离体肠平滑肌自发活动的影响的研究，发现挥发油及醇提物抑制肠管平滑肌作用较强，主要是脂溶性成分，其中醇提物中主要含有脂肪油及木脂素类成分，而水溶性成分无作用，这与以往研究认为挥发油为主要有效成分不同[2]，另有研究报道表明，肉豆蔻的水煎液抗蓖麻油所致的大鼠腹泻及抗炎作用很弱，而石油醚提物作用较强[6]，石油醚提取物中主要含有挥发油、脂肪油、木脂素等脂溶性成分。因此，除挥发油外，木脂素类成分及脂肪油是否也是麸煨肉豆蔻止泻的有效成分，还需通过体内止泻实验进一步深入研究确定。

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