气相色谱法测定复方甲地孕酮注射液中二甲基甲酰胺的含量*

周健鹏，王 卫

(天津市药品检验所，天津 300070)

气相色谱法测定复方甲地孕酮注射液中二甲基甲酰胺的含量*

周健鹏，王 卫

(天津市药品检验所，天津 300070)

目的：建立气相色谱法对5批复方甲地孕酮注射液中二甲基甲酰胺(DMF)的含量进行了考查。方法：采用气相色谱法，HP-5毛细管柱(30 m×0.53 mm，5 μm)，载气为氮气，氢火焰离子化检测器(FID)，柱温90 ℃，保持9 min，以40 ℃/min速度升温至200 ℃，保持5 min。结果：对5批复方甲地孕酮注射液中的DMF含量进行了考查，在所考查的浓度范围内线性关系良好，r为0.999 9，平均回收率为99.0%(n=9)。结论：本方法灵敏，结果准确。

气相色谱法，复方甲地孕酮注射液，二甲基甲酰胺

药品中残留溶剂系指在原料药或辅料的生产中，以及在制剂制备过程中使用的，但在工艺过程中未能完全去除的有机溶剂。复方甲地孕酮注射液为混悬液，主要成分为醋酸甲地孕酮和雌二醇，在微粒结晶制备过程中，用到了大量的DMF，参考《中国药典》2010年版附录Ⅷ P[1]，DMF为第二类溶剂，应该限制使用，残留的限度为0.088%。因此，为严格控制产品的安全性，此次评价性抽验增加了复方甲地孕酮注射液中残留溶剂DMF的检查，采用气相色谱法测定，并比较某公司提供的不同批号样品的DMF残留量[2]。

1 仪器与试药

1.1仪器 Agilent 7890气相色谱仪， FID检测器。

1.2试药 复方甲地孕酮注射液(某公司，批号090305、100201、100601、100307、100307)，甲醇、N,N-二甲基甲酰胺(DMF)为色谱纯。

2 方法与结果

2.1色谱条件及系统适用性 色谱柱为HP-5毛细管柱(30 m×0.53 mm，5 μm)，载气为氮气，柱温90 ℃，保持9 min，以40 ℃/min速度升温至200 ℃，保持5 min，进样口温度200 ℃，检测器温度240 ℃，分流比5∶1，进样品量1 μl。

2.2溶液的制备

2.2.1对照溶液 精密称取N,N-二甲基甲酰胺88 mg，置100 ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀；精密量取5 ml，置100 ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，作为对照贮备液；精密量取5 ml，置50 ml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液。

2.2.2供试品溶液 复方甲地孕酮注射液。

2.2.3空白溶液 甲醇。

分别精密量取对照溶液、空白溶液和供试品溶液1 μl进样，记录色谱图，见图1。

2.3线性试验 分别精密量取对照贮备液1.0、2.0、5.0、10.0、15.0和20.0 ml，分置50 ml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，获得一系列溶液，精密量取2 μl依次进样，以各溶液浓度X(μg/ml)为横坐标，峰面积Y为纵坐标进行线性回归，Y=1.885 961X-0.313 536(r=0.999 9)，DMF在0.88～17.6 μg/ml范围内，线性关系良好。

2.4精密度试验 取对照溶液连续进样6次，计算峰面积RSD为1.7%。

1．N，N-二甲基甲酰胺

2.5最低检出限、定量限试验 取对照储备溶液，用甲醇稀释至信噪比约为3时，测定N,N-二甲基甲酰胺最低检出浓度为0.44 μg/ml(0.44 ng)；信噪比约为10时，N,N-二甲基甲酰胺定量限为1.32 μg/ml(1.32 ng)。

2.6回收率试验 精取已知溶剂含量的2号样品1.0 ml，共9份，分置5 ml量瓶中，分别加入下述溶液2、2.5和3.0 ml各3份(精密量取“2.2”项下对照贮备液10 ml，置50 ml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，即得),加甲醇定容、摇匀、离心、取上清液进样分析，按外标法计算N,N-二甲基甲酰胺平均回收率为99.0%(n=9)，RSD为1.4%，见表1。

表1 回收率测定结果

2.7稳定性试验 取对照溶液于0和22 h分别进样测定，N,N-二甲基甲酰胺峰面积分别为7.61和7.72，表明对照溶液22 h内稳定。

2.8样品测定 精密量取样品约1 ml，置5 ml量瓶中，加甲醇定容、摇匀、离心、取上清液进样分析，按上述色谱条件测定，结果5批样品中N,N-二甲基甲酰胺分别为0.145%、0.123%、0.163%、0.190%和0.199%。

3 样品测定结果

采用气相色谱法测定复方甲地孕酮注射液中DMF残留量，结果5批样品中DMF残留量分别为0.145%、0.123%、0.163%、0.190%和0.199%，均超出《中国药典》规定限度0.088%。

4 讨论

4.1为排除基质效应，采用了标准加入法和外标法分别进行了样品测定，经SPSS统计学显著性检验分析，结果显示两者无显著性差异(P>0.05)。

4.2本品为复方甲地孕酮注射液，在生产过程中是将醋酸甲地孕酮原料微粉化后加注射用水溶解的混悬液。在微粉化的过程中带入了二甲基甲酰胺，从而影响了产品的残留溶剂的量。提示制剂生产企业为保证产品质量的安全性及稳定性，应慎重筛选原料供应商，在控制原料质量的同时，还应对原料微粉化后残留的二甲基甲酰胺加以控制。

1 中国药典[S].二部.2010：附录61

2 王卫.气相色谱法测定格列本脲胶囊中二甲基甲酰胺的含量[J].天津药学，2001，36(2):120-122

DeterminationofDMFincompoundmegestrolinjectionbyGC

Zhou Jianpeng，Wang Wei

(Tianjin Institute for Drug Control, Tianjin 300070)

Objective: To establish an GC method for determination the DMF in compound megestrol injection.Method: The chromatographic separation was achived on a HP-5 capillary column(30 m×0.53 mm，5 μm) ,with FID detector, nitrogen as the carry gas.The programmed column temperature was set as follows: maintained at 90 ℃ for 9 min and then raised to 200 ℃at the rate of 40 ℃/min follow by holding for 5 min.Results: The contentof DMF in compound megestrol injection were investigated, There were good linearies (r=0.9999), the average recovery rate was 99.0%(n=9).Conclusion: The method is accurate and sensitive.

GC，compound megestrol injection，DMF

2014-03-29

R927.2

A

1006-5687(2014)04-0011-02