芪苈强心胶囊对阿霉素所致心力衰竭大鼠氧化损伤的影响

钱玉红，李争，王敏，范志媛，张淋淋，史俊玲

芪苈强心胶囊对阿霉素所致心力衰竭大鼠氧化损伤的影响

钱玉红，李争，王敏，范志媛，张淋淋，史俊玲

目的观察芪苈强心胶囊对慢性心力衰竭(CHF)模型大鼠血清超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)水平的影响。方法Wistar大鼠40只，随机抽取8只作为健康对照组，其余大鼠用多次间断腹腔注射阿霉素(ADR)的方法来建立大鼠CHF模型。造模成功后，随机分为模型组和芪苈强心胶囊组(0.6 g·kg-1·d-1)，每组15只，健康对照组和模型组灌胃等容积的蒸馏水。4周后，各组大鼠称质量，取心脏称质量，计算心脏指数，腹主动脉取血测MDA、SOD水平及血清脑钠肽(BNP)水平。结果与健康对照组比较，模型组大鼠心脏指数[(3.76±0.22)g/kg vs. (2.69±0.25)g/kg]、BNP[(657±59)pg/ml vs. (203±31) pg/ml]水平均明显升高(P<0.05)，而芪苈强心胶囊组分别为(3.18±0.15)g/kg 和(554±43)pg/ml，均明显低于模型组，差异有统计学意义(P<0.05)。与健康对照组比较，模型组血清SOD水平明显下降[(113.33±10.78)U/ml vs. (197.67±12.93) U/ml]，MDA水平明显升高[(18.72±1.79 ) nmol/ml vs. (7.73±1.53) nmol/ml],差异有统计学意义(P<0.05)，而芪苈强心胶囊组SOD水平(151.17±12.19)U/ml明显高于模型组，MDA水平(14.61±1.27)nmol/ml明显低于模型组，差异均有统计学意义(P<0.05)。结论芪苈强心胶囊对慢性心力衰竭大鼠氧化损伤有治疗作用，其作用机制可能与清除氧自由基，抗脂质过氧化有关。

芪苈强心胶囊；心力衰竭，慢性；阿霉素；大鼠

慢性心力衰竭(chronic heart failure, CHF)是各种心脏疾病导致心功能不全的一种综合征，是临床上心血管系统的常见病，是许多心脏疾病患者最终归宿，患者的预后一般比较差[1]。近年来，CHF的发病率在显著持续增加，严重威胁着人类的健康。芪苈强心胶囊是临床上常用的治疗CHF的中成药，临床疗效显著[2，3]。其可有效改善冠心病舒张性心力衰竭患者的临床症状，提高患者生活质量，还可以降低CHF患者体内TNF-α、IL-6、hs-CRP水平。本实验用大鼠腹腔注射阿霉素(ADR)的方法，建立大鼠CHF模型，观察芪苈强心胶囊对大鼠CHF模型血清中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA) 血清脑钠肽(BNP)水平的影响。1材料与方法

1.1 材料 实验动物： 健康Wistar大鼠40只(北京华阜康生物技术有限公司，合格证号SCXK2011 0004)，体质量(200±20)g，均在河北联合大学实验动物中心SPF级动物实验室内进行饲养。室温20～26℃，相对湿度40%～60%，通风良好，昼夜明暗交替时间12 h。自由摄食、饮水，每2天更换垫料。实验药物：ADR由浙江海正药业提供；芪苈强心胶囊由石家庄以岭药业股份有限公司提供。仪器：高压灭菌器(上海博迅实业有限公司医疗设备厂生产)； DK-600B型电热恒温水槽(上海森信实验仪器有限公司生产)；半自动生化分析仪(RT-9000, Rayto)等。试剂：MDA试剂盒、SOD试剂盒、BNP试剂盒(南京建成科技有限公司)。

1.2 方法

1.2.1 大鼠模型建立与分组： Wistar大鼠40只适应性喂养7 d，随机抽取8只作为健康对照组，其余大鼠腹腔注射ADR，ADR用生理盐水配制成2 mg/ml液体，4 mg/kg腹腔注射，每周1次，连续6周，累积总量达24 mg/kg，复制心力衰竭模型[4]。健康对照组注射等容积的生理盐水。以大鼠出现CHF临床表现如精神不振，活动减少，食欲减退，气喘痰鸣，唇舌青紫，四肢皮下水肿等为造模成功。2只大鼠造模不成功，已剔除。将造模成功的30只大鼠随机分为2组：模型组和芪苈强心胶囊组，每组15只。

1.2.2 给药方法： 芪苈强心胶囊组大鼠予芪苈强心胶囊0.6 g·kg-1·d-1，药物以蒸馏水稀释至所需浓度，给药容积为10 ml/kg，给药途径为灌胃给药。健康对照组和模型组灌胃等容积的生理盐水10 ml/kg，4周后检测指标。在实验期间各组大鼠均常规喂食，自由取食，清洁水喂养。

1.3 检测指标 (1)实验结束时，3组实验大鼠称体质量，用0.5～0.8 ml水合氯醛腹腔内注射麻醉，仰卧于操作台上并固定。取心脏，滤纸吸干水分，称质量，测心脏指数，心脏指数= 心脏质量(mg)/体质量(g)。(2)ELISA法检测BNP水平，操作严格按照试剂盒说明书进行。(3)大鼠腹主动脉取血5 ml，于4℃,3 000 r/min离心10 min，取上清，用黄嘌呤氧化酶法和硫代巴比妥酸法分别测定大鼠血清中MDA、SOD水平。

2 结 果

2.1 心脏指数、BNP变化 有取材不成功的剔除，最终每组取7只大鼠。与健康对照组比较，模型组大鼠心脏指数、BNP均明显升高(P<0.05)，而芪苈强心胶囊组低于模型组(P<0.05)。说明芪苈强心胶囊能降低CHF大鼠心脏指数、BNP。见表1。

表1 各组大鼠心脏指数和BNP比较

注：与健康对照组比较，*P<0.05；与模型组比较，#P<0.05

2.2 血清SOD、MDA变化 与健康对照组比较，模型组大鼠血清中SOD水平明显降低，MDA水平明显升高，芪苈强心胶囊组SOD水平明显高于模型组、MDA水平明显低于模型组(P均<0.05)。见表2。

表2 各组大鼠血清MDA、SOD水平

注：与健康对照组比较，*P<0.05；与模型组比较，#P<0.05

3 讨 论

ADR是一种有效的蒽环类广谱抗肿瘤化疗药物，对白血病、淋巴瘤等多种肿瘤的化疗效果良好，但它具有严重的心脏毒性。长期大剂量使用会引起中毒性心肌炎、心肌病，甚至会出现严重的心力衰竭[5]。腹腔注射一定剂量的ADR可明显损害心脏的功能,可成功建立大鼠慢性心力衰竭模型[6]。

本研究结果显示，模型组大鼠心脏指数明显升高，SOD水平降低，MDA、BNP升高，与健康对照组比较差异显著(P<0.05)，说明成功建立了大鼠CHF模型。芪苈强心胶囊组大鼠心脏指数、MDA及BNP水平低于模型组，而SOD含量高于模型组(P<0.05)，表明芪苈强心胶囊能降低大鼠心脏指数及MDA、BNP含量，提高SOD活性。

MDA 为心肌细胞脂质过氧化过程中产生的醛类物质，通过检测MDA 的含量可以反映脂质过氧化的程度,而脂质过氧化是氧自由基造成组织细胞损伤的主要途径一[7]。SOD是机体主要抗氧化酶，是清除细胞内自由基、保护细胞免受氧化应激损伤的关键酶之一，SOD活性的高低是衡量机体抗氧化能力大小的重要因素[8]，BNP可通过鸟苷酸环化酶促进血管扩张和尿钠排泄，具有反向调节交感神经系统和肾素—血管紧张素—醛固酮系统的作用，在CHF代偿过程中发挥重要作用，且BNP在早期CHF患者血浆中的含量就已增加，因此可将BNP作为诊断CHF的一个敏感指标[9]。

研究表明，芪苈强心胶囊可明显改善心力衰竭患者的临床症状，增加运动耐量，无明显不良反应[10]，还能改善慢性舒张性心力衰竭患者的心脏舒张功能[11]。本研究对大鼠血清中MDA和SOD的检测结果表明芪苈强心胶囊可以提高心肌组织的抗氧化能力。

综上所述，芪苈强心胶囊对ADR诱导的心力衰竭有治疗作用，其作用机制可能与清除氧自由基、抗脂质过氧化有关。

1 张杰.芪苈强心胶囊对慢性心力衰竭患者醛固酮水平和心功能的干预作用[J].中国老年学杂志,2013,33(5):2157-2159.

2 甄利波,田祥.芪苈强心胶囊辅治冠心病舒张性心力衰竭效果观察[J].临床合理用药,2013,6(9):82-83.

3 钱玉红,李争,魏国清，等.芪苈强心胶囊辅治对慢性心力衰竭患者血清细胞因子的影响[J].疑难病杂志,2013,12(4):264-266.

4 李玉玲,杨建业,唐俊明,等.阿霉素诱导大鼠心衰模型不同方案的比较[J].中国比较医学杂志,2006,16(2):93-96.

5 滕丽莉,赵荫涛,邵莉，等.鱼油对阿霉素诱导慢性心力衰竭大鼠心肌结构和细胞因子的影响[J].中国老年学杂志,2013,3(5):1083-1085.

6 杨建业,张迎春,唐俊明,等.阿霉素诱导大鼠心衰模型的建立[J].郧阳医学院学报,2005,24(5):269-271.

7 王睿,徐长庆,王伟.丹参注射液对阿霉素所致心肌细胞损伤的保护作用[J].齐齐哈尔医学院学报,2007,28(1):16-18.

8 李俊,廖雪珍,廖惠芳,等.暖心胶囊对阿霉素诱导大鼠心衰模型的实验研究[J].中药新药与临床药理,2009,20(1):24-26.

9 Clerico A, Fontana M, Ripoli A, et al.Clinical relevance of BNP measurement in the follow-up of patients with chronic heart failure[J].Adv Clin Chem,2009,48:163-179.

10 权晓慧,李毓杰.芪苈强心胶囊联合辅酶Q10佐治慢性心力衰竭的临床观察[J].疑难病杂志,2014,13(1):77-79.

11 李彦霞,贾振华,张鑫月.芪苈强心胶囊对慢性舒张性心力衰竭患者心脏舒张功能的影响[J]. 疑难病杂志,2014,12(4):261-263.

ExperimentalstudyofQiliqiangxincapsuleagainstadriamycininducedoxidativedamageinratswithheartfailure

QIANYuhong,LIZheng,WANGMin,FANZhiyuan,ZHANGLinlin,SHIJunling.

DepartmentofCardiology,HebeiUnitedUniversityAffiliatedTangshanHospitalofTraditionalChineseMedicine,Tangshan063000,China

ObjectiveTo observeQiliqiangxincapsule on chronic heart failure rat model serum level of superoxide dismutase (SOD), malondialdehyde (MDA).MethodsForty Wistar rats were randomly selected 8 as healthy control group, the other rats by using several intermittent intraperitoneal injection of adriamycin (ADR) method to establish a rat model of CHF. After the success of modeling, they were randomly divided into model group andQiliqiangxincapsule group (0.6 g·kg-1·d-1) with 15 rats in each group, health control group and model group were administered with iso-volume of distilled water. After 4 weeks, the rats weight and heart mass were recorded, cardiac index, abdominal aortic blood MDA, SOD levels and serum brain natriuretic peptide levels of BNP were measured and recorded.ResultsCompared to the control group, cardiac index of the rats in the model group [(3.76 ± 0.22) g/kg vs. (2.69 ± 0.25) g/kg], BNP [(657±59) pg/ml vs. (203±31) pg/ml] levels were significantly elevated (P<0.05), andQiliqiangxincapsule group were (3.18 ± 0.15) g/kg and (554 ± 43) pg/ml, were significantly lower than those in the model group, the difference was statistically significant (P<0.05). Compared with the healthy control group, levels of serum SOD model group decreased significantly [(113.33 ± 10.78) U/ml vs. (197.67 ± 12.93) U/ml], MDA levels were significantly higher [(18.72 ± 1.79 )nmol/ml vs. (7.73 ± 1.53) nmol/ml], the difference was statistically significant (P<0.05) andQiliqiangxincapsule group SOD (151.17 ± 12.19) U/ml was significantly higher than the model group, the levels of MDA (14.61 ± 1.27) nmol/ml was significantly lower than that in the model group, the differences were statistically significant (P<0.05).ConclusionQiliqiangxincapsule has a therapeutic effect on chronic heart failure rats. The mechanism may be related to scavenging oxygen free radicals and inhibiting lipid per oxidation.

Qiliqiangxincapsule; Heart failure,chronic ; Adriamycin; Rats

2013年度河北省唐山市科技计划项目(No.13130282b)

063000 河北联合大学附属唐山市中医医院心内科

10.3969/j.issn.1671-6450.2014.06.025

2014-03-11)