非水滴定法测定盐酸替罗非班的含量

王晓玲，聂忠莉，杨彩霞，唐雪枫，陈 果，刘 玮

(1.峨眉山通惠制药有限公司，四川 峨眉山 614200;2.成都大学 生物产业学院，四川 成都 610106;3.绵阳市 食品药品检验所，四川 绵阳 621000)

0 引 言

盐酸替罗非班(Tirofiban Hydrochloride)，化学名为N-正丁基磺酰基-O-［4-(4-哌啶基)丁基］-L-酪氨酸盐酸盐—水合物，是一种非肽类血小板表面糖蛋白GPⅡb/Ⅲa 受体拮抗剂［1］，临床上主要用于不稳定性心绞痛与非Q 波心肌梗死等病症的冶疗［2］.盐酸替罗非班试行标准(YBH05622009)采用的溶剂中含有醋酸汞［3］.醋酸汞为有机汞盐，毒性大，比金属汞和无机汞化合物更易导致中毒事件发生，对环境和生态的影响巨大.本研究以割除汞盐为目的，建立用于盐酸替罗非班含量的测定方法.

1 仪器、试药与试剂

1.1 仪 器

实验所用仪器包括:WDDY－2008 型微机自动电位滴定仪(苏州江东精密仪器有限公司);JB－06型磁力搅拌器(上海雷磁仪器厂).

1.2 试药与试剂

实验所用试药与试剂包括:盐酸替罗非班工作对照品(批号，120601)、盐酸替罗非班(批号，130101、130201、130301)，由成都新恒创药业有限公司生产;冰醋酸、醋酐、结晶紫均为分析纯;高氯酸滴定液(0.10 mol/L，25 ℃).

2 方法与结果

2.1 滴定方法

取本品约0.3 g，精密称定，加冰醋酸10 mL、醋酸酐30 mL 使其溶解，加结晶紫指示剂1 滴，用高氯酸滴定液(0.1 mol/L)滴定，至溶液显蓝绿色，并将滴定结果用空白试验校正［4－5］.每1 mL 高氯酸滴定液(0.1 mol/L)相当于47.71 mg 的C22H36N2O5S·HCl.

2.2 溶剂选择

因本品含有结晶水，单用冰醋酸作溶剂，可能会因为少量水的存在严重影响滴定突跃，需要加入醋酸酐中和.为此，本实验对醋酸酐与冰醋酸的比例进行了筛选，根据滴定情况拟定了3 个筛选条件:条件A，用冰醋酸20 mL 与醋酸酐20 mL;条件B，用冰醋酸15 mL 与醋酸酐25 mL;条件C，用冰醋酸10 mL 与醋酸酐30 mL.采用电位指示判断终点，结果如图1 所示.

如图1 所示，条件A 测定含量偏高，滴定突跃不明显，而条件B 与条件C 的测定结果与高效液相色谱法测定数据一致，但条件C 的滴定突跃更加明显，其空白无干扰滴定曲线如图2 所示.因此，拟将条件C 作为盐酸替罗非班含量测定的溶剂，并进行方法验证.

图2 条件C 空白滴定曲线图

2.3 方法验证

2.3.1 回收率.

取盐酸替罗非班工作对照品适量(相当于测定量的80%、100%、120%)，每个浓度样品各3 份，按照“2.1”项下方法测定，计算9 份样品的回收率和RSD(见表1).结果显示，9 份样品的平均回收率为100.18%，平均RSD 为0.2%.

表1 回收率实验结果

2.3.2 重复性.

取盐酸替罗非班工作对照品0.3 g，共6 份，精密称定，按照“2.1”项下方法滴定，计算6 份样品的含量和RSD(见表1).结果显示，6 份样品的平均含量为100.66%，RSD 为0.2%，表明该法重复性良好.

2.3.3 中间精密度.

在实验中由另一分析人员，按重复性项下实验内容同法操作.结果显示，6 份样品的平均含量为100.23%，RSD 为0.19%，表明该法中间精密度良好.

2.3.4 耐用性.

在实验中，适当调整溶剂比例(±3 mL)及实验室温度(±5 ℃)，结果显示，所测样品含量无明显变化，表明该法具有较好耐用性.

2.4 含量测定

取3 批盐酸替罗非班原料药(批号:130101、130201、130301)分别采用非水滴定法与高效液相色谱法测定其含量，结果如表2 所示.结果显示，2 种方法对盐酸替罗非班含量测定无明显差别，此表明，本法完全可用于盐酸替罗非班含量的测定.

表2 盐酸替罗非班含量测定结果

3 讨 论

醋酸汞的使用原理是，在高氯酸非水滴定中，用醋酸溶液使化合物碱性增强.而盐酸在醋酸中酸性太强，对高氯酸滴定产生干扰，故生物碱的氢卤酸盐不可直接滴定，需加入适量醋酸汞后，使其生成在醋酸溶剂中难解离的卤化汞，再进行滴定.选择醋酸酐取代醋酸汞主要是因为在pKb 较大时，采用醋酸酐取代醋酸作为溶剂可增强化合物的碱性，利于高氯酸滴定.此外，加入醋酸酐可中和醋酸以及盐酸替罗非班中的水分.

［1］张煜，羊镇宇.GPⅡb/Ⅲa 受体拮抗剂—替罗非班在急性冠脉综合征中的应用与进展［J］.临床医学工程，2009，16(10):107－108.

［2］杨晓燕，龚培力，王琳，等.替罗非班治疗急性冠状动脉综合征的疗效和安全性评价［J］.中国医院药学杂志，2006，26(3):275－278.

［3］国家药典委员会.中华人民共和国药典(二部)［M］.北京:化学工业出版社，2010.

［4］中国药品生物制品检定所.中国药品检验标准操作规范［M］.北京:中国医药科技出版社，2010.

［5］马广慈.药物分析方法与应用［M］.北京:科学出版社，2000.