ACL100全自动凝血分析仪PT、APTT实验室参考区间的确立

薛 萍 ，江韵琴，方 丽

ACL100全自动凝血分析仪PT、APTT实验室参考区间的确立

薛 萍 ，江韵琴，方 丽

目的 确立ACL100全自动凝血分析仪凝血酶原时间(PT)和活化部分凝血活酶时间(APTT)本实验室的正常参考区间。方法 筛选50例年龄在18～60岁、经问卷调查无相关疾病的正常人，空腹采集抗凝血，采用美国实验仪器(IL)公司ACL100全自动血凝仪进行PT和APTT分析，确立本实验室的PT、APTT正常参考区间。结果 PT参考区间与厂家提供的参考区间有一定差异，APTT的参考区间与厂家提供的正常参考区间一致。结论 对于新引进的检测设备，各实验室应确立自己的正常参考区间，不宜盲目采用厂家提供的正常参考区间。

ACL100全自动血凝仪；凝血酶原时间；活化部分凝血活酶时间；正常参考值

检测系统是指完成一个检验项目所涉及的仪器、试剂、校准品、标准操作程序、质量控制程序、保养等的组合，是实现检验结果准确性和可比性的重要手段。临床实验室在建立了检测系统的同时，需要验证厂家的参考区间是否适合本实验室患者的群体。ACL100全自动血凝仪是美国实验仪器(IL)公司产品，试剂说明书提供的参考区间是建立在美国人群基础上。鉴于各地区人群、种族的生理差别及各实验室质量控制和规范管理的差异，本研究对该设备厂家建议PT和APTT参考值进行了验证，并确立了在本实验室的正常参考区间。

1 材料

1.1 仪器与试剂 美国IL公司ACL100型全自动凝血分析仪；美国IL公司配套试剂：PT超敏检测试剂盒(PT-FIB HS PLUS，批号：N0415612，有效期2014-02)；部分凝血活酶时间试剂盒(APTT 测定试剂：批号：N0716816，有效期2014-04)；美国IL公司商业定值质控：正常水平质控物[Control(Normal)，批号：N0903582，有效期2014-03]，高水平异常质控物[Control(High)，批号：N0415683，有效期2014-02]。

1.2 标本来源 2013年11月12日，筛选合格的正常健康体检者(年龄18～60岁，男性28人，女性22人，肝功能正常，无血液系统疾病及出凝血机能障碍)50人，早晨空腹静坐0.5 h，使用109 mmol/L柠檬酸钠1∶9抗凝的BD真空采血管规范采血3 ml，立即混匀，3000 r/min离心15 min，取上层乏血小板血浆进行检测。

2 实验方法及结果

按照《全国临床检验操作规程(第3版)》对检测系统性能的核实(验证)要求，对ACL100全自动凝血分析仪进行性能验证，包括不精密度和准确度实验，合格后按照ACL100全自动凝血分析仪操作规程进行受检血浆样本分析。

2.1 不精密度分析 根据NCCLS EP15-A文件要求，取2个水平的商业定值质控品，重复检测至少20次，计算CV%和SD值。判断标准：将美国国会1988年通过的临床实验室修正案(CLIA'88)中规定的PT、APTT允许误差(分别为靶值±15%、靶值±15%)的1/4作为临床不精密度可接受标准，即2个水平的商业定值质控品PT、APTT不精密度CV≤3.75%(1/4 CLIA'88)为临床可接受标准。检测结果见表1，不精密度符合判断标准。

表1 不精密度检测结果(n=20)

2.2 正确度验证 由于PT、APTT没有国际参考方法或参考物质，本实验通过参加四川省临检中心2013年第一次凝血实验室间质量评比，如果实验室的检验结果与其他实验室，特别是与权威实验室或参比实验室的结果具有可比性，那么检验结果的可信度就可得到证实。结果本实验室PT、APTT检测结果在省临检中心凝血室间质量评比的可接受范围，通过正确度验证。

2.3 样本检测 采用该设备及配套试剂检测上述采集的50份血浆样本，PT结果分布为10.4～14.6(12.6±1.2)s；APTT结果分布为25.26～35.06(30.16±2.45)s。各数据符合正态分布，求95%参考区间的上下限。

PT下限值：平均值-1.96=12.6-1.96×1.2=10.24；上限值：平均值+1.96=12.6+1.96×1.2=14.95≈15；确定本实验室PT正常参考区间为10.24～15.00 s。

APTT下限值：平均值-1.96 s=30.16-1.96×2.45=25.35,上限值：平均值+1.96 s=30.16+1.96×2.45=34.96≈35 s；确定本实验室APTT正常参考区间为25.35～35.00 s。

2.4 本实验室正常参考区间与厂家建议参考区间比较 从表2可见，本实验室 PT参考区间下限10.24 s比厂家提供的11.80 s低1.56 s，APTT参考区间上限35.0 s比厂家提供的38.4 s低3.4 s，其他与厂家提供的一致。确立本实验室正常参考区间为PT 10.24～15.00 s，APTT 25.35～35.00 s，并定期验证。

表2 本实验室正常参考区间与厂家建议参考区间比较

2.5 结果 通过本实验室对50例正常健康体检人群血浆标本的测试数据统计分析，PT本实验室参考区间下限比厂家建议参考区间低1.56 s，上限基本一致，是否与人群、种族差异有关还待考证。由于PT缩短见于先天性因子Ⅴ增多症、口服避孕药、高凝状态和血栓病等，建议本实验室使用新确立的PT正常参考区间10.24～15.00 s，并定期验证。

APTT实验室正常参考区间上限比厂家建议参考区间低3.4 s，下限基本一致。由于APTT待测者的测定值较正常对照值(30.16 s)延长超过10 s(即40.16 s)以上才有临床意义，厂家建议APTT上限为38.4 s，故可使用厂家建议正常参考区间25.4～38.4 s，并定期验证。

3 讨论

在临床检验中，PT和APTT是指导临床溶栓、抗凝治疗及保证手术安全的必要检查项目，对凝血机制相关疾病的诊断和治疗有重要的临床意义[1]。参考区间是临床判别患者凝血功能是否正常的重要依据，《全国临床检验操作规程(第3版)》以及美国临床实验室修正案(CLIA'88)均明确：“实验室应验证厂家的参考区间是否适合实验室患者的群体。”

通过本实验发现，本实验室确立的正常参考区间与厂家建议参考区间略有差异，分析可能与受检健康人群区域生理差别有关。同时，在查询到的其他文献中[2-5]，报道的PT、APTT参考区间均有差别，这源于不同地区受检健康人群、不同的检测系统。

由此可见，在引进国外先进的检测系统同时，实验室确立当地人群的参考区间，并验证厂家的参考区间是否适合本实验室患者的群体是必要，而且是重要的质量管理措施之一；是为临床提供有诊断参考价值检测报告的重要保证。

[1] 吕纯莉，张天芬，潘娟,等.临床实验室凝血四项检查正常参考区间的建立[J].国际检验医学杂志，2013,34(15):1978-1979.

[2] 温奕欣,洪晓鹏.252例健康人凝血参数参考区间调查分析[J].临床医药实践,2005,14(5)：379-380.

[3] 付廷芳.重庆市涪陵区625例健康成人PT、APTT、FIB参考区间调查[J].现代医药卫生,2006，22(20)：3166.

[4] 张德文,陈芳.自动血凝仪测定200例健康人PT、APTT、TT、FIB结果分析[J].四川省卫生管理干部学院学报,2001，20(3)：181-182.

[5] 纪宏文,马丽.中国北京地区健康人群血栓弹力图参考区间的建立[J].中华医学杂志,2011，91(14)：980-983.

610083 成都，成都军区总医院健康体检中心检验科(薛 萍)，胸外科(江韵琴)；成都军区疾病预防控制中心(方 丽)

方 丽，电话：028-86598526

R 446.11

A

1004-0188(2014)04-0423-02

10.3969/j.issn.1004-0188.2014.04.030

2014-02-14)