高效液相色谱法测定参松养心胶囊中马钱苷的含量

2014-07-18王岳刘敏彦苏平菊

中国现代药物应用 2014年6期

王岳刘敏彦苏平菊

王岳刘敏彦苏平菊

目的建立采用高效液相色谱法测定参松养心胶囊中马钱苷含量的方法。方法采用C18色谱柱, 甲醇-乙腈-0.05%磷酸(5:9:86)为流动相, 检测波长238 nm。结果马钱苷在37.824～756.48 ng浓度范围内呈良好的线性关系。马钱苷平均回收率为100.7%(n=9), RSD=1.47%。结论该法操作简便准确、专属性强, 可作为参松养心胶囊的质量控制方法。

高效液相色谱法；参松养心胶囊；马钱苷；含量测定

参松养心胶囊由人参、麦冬、山茱萸、丹参等12味药组成。益气养阴, 活血通络, 清心安神。本品种收载于中国药典2010年版第二增补本, 马钱苷为处方中山茱萸的主要成分之一, 因此采用高效液相色谱法对本品马钱苷的含量测定进行了研究。

1 仪器与试药

1.1仪器高效液相色谱仪(Waters 2695)。

1.2试药马钱苷对照品(购自中国药品生物制品检定所,批号：111640-200503), 乙腈为色谱纯, 其它试验所用试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1色谱条件色谱柱：用十八烷基硅烷键合硅胶为填料；流动相甲醇-乙腈-0.05%磷酸(5:9:86)；流速1 ml/min；检测波长238 nm；理论塔板数按马钱苷峰计算应不低于3000。

2.2供试品溶液制备取供试品(批号100301), 倾出内容物, 研细, 约1 g, 精密称定, 精密加入甲醇25 ml, 称定重量,超声提取30 min, 放冷, 再称定重量, 用甲醇补足减失的重量, 摇匀, 滤过, 精密吸取续滤液10 ml, 加在中性氧化铝柱(100～200目, 7 g, 内径1.5 cm, 干法装柱)上, 用50%甲醇60 ml洗脱, 收集流出液和洗脱液, 蒸干, 残渣加50%甲醇溶解,并定容至25 ml, 摇匀, 即得。

2.3对照品溶液的制备精密称取马钱苷对照品11.82 mg,置50 ml量瓶中, 加甲醇溶解, 并定容至刻度, 摇匀, 即得。再精密吸取上述对照品溶液2 ml, 置25 ml量瓶中, 加50%甲醇稀释至刻度, 摇匀, 即得。浓度：18.912 μg/ml。

2.4阴性试验按处方比例称取除山茱萸外的其它方中药材, 按制备工艺制得阴性样品, 按供试品溶液的方法进行处理, 得阴性供试品溶液。分别吸取阴性供试品溶液、对照品溶液及供试品溶液, 按照选定测定条件进行检测, 结果表明：在马钱苷相应的保留时间, 阴性样品无相应波峰出现, 阴性样品不干扰测定。

2.5线性范围考察精密吸取浓度为18.912 μg/ml的对照品溶液2 μl、5 μl、10 μl、20 μl、40 μl, 注入液相色谱仪, 测定峰面积见表1。以峰面积积分值为纵坐标, 进样量为横坐标, 绘制标准曲线。结果表明：马钱苷浓度在37.824～756.48 ng范围内呈良好线性关系, 回归方程为：y=1627.7326x=5711.6561, r=1.0000。

2.6进样精密度考察吸取对照品溶液, 连续进样5次, 马钱苷对照品5次测定的RSD为0.28%, 说明仪器性能良好。

2.7供试品溶液稳定性考察精密吸取供试品溶液, 每隔一定时间进样, 考察了16 h内的稳定性, 结果见表2。

从以上结果可见, 供试品峰面积 RSD值2.11%,表明在测定的16 h内, 供试品稳定。

2.8重复性试验取同一批供试品(批号100301), 按高、中、低剂量取样, 每个剂量取3份, 按供试品含量测定项下方法,进行提取, 制备, 测定结果, 马钱苷的平均含量1.01 mg/g, RSD为1.37%。表明方法重现性良好。

2.9回收率试验采用加样回收试验, 取同一批供试品(批号100301)9份, 分别加入低、中、高3个浓度的马钱苷对照品溶液, 按供试品含量测定项下方法, 进行提取, 制备, 测定,计算回收率。马钱苷的平均回收率为100.70%(n=9), RSD为1.47%, 结果见表3。

2.10样品含量测定按上述方法测定3批样品含量, 结果见表4。