附子提取物的大鼠生殖毒性研究

高凯 黄春林

·短篇论著·

附子提取物的大鼠生殖毒性研究

高凯 黄春林

目的 探讨附子提取物对雌性大鼠生殖毒性的影响。方法 附子提取物给大鼠连续灌胃30 d, 考察脏器指数、动情期观察、生殖激素含量变化。结果 附子提取物造成雌性大鼠动情周期紊乱 ,脏器指数明显下降 , 性激素 ：卵泡刺激素 (FSH)、黄体生成素 (LH)、雌二醇 (E2)、孕酮 (P)含量较阴性对照组均显著下降。结论 附子提取物的生殖毒性作用可能与 FSH、LH、E2、P 含量下降有关 , 提示提高性激素水平 , 可有助于降低附子提取物的生殖毒性。

附子；生殖毒性 ；动情周期；性激素

附子是传统的有毒性的中药 , 本研究拟通过连续 30 d 给予附子提取物后大鼠产生的生殖毒性的反应 , 探讨其可能的生殖系统毒性的作用机制 , 为附子临床应用提供实验数据。

1 材料与方法

1. 1 材料与试剂 附子提取物 , 药粉 , 规格 ：16 g 药材 /g ；促性腺激素释放激素 (GnRH)试剂盒、卵泡刺激素 (FSH)试剂盒、黄体生成素 (LH)试剂盒、雌二醇 (E2)试剂盒、孕酮 (P)试剂盒 , 均购自大连泛邦试剂公司。SD 大鼠购自广东省医学实验动物中心。

1. 2 实验方法 动物购进后适应性观察 7 d, 雌性大鼠按体重随机分为四组 , 每组 24 只 ；分别是阴性对照组、附子提取物低剂量组 (3.0 g/kg)、附子提取物中剂量组 (6.0 g/kg)、附子提取物高剂量 (18.0 g/kg)。观察时间点分别设置在给药 15、30 d 及停药 60 d(即实验第 75 天 ), 剖解各剂量组动物 8 只 ,检测各项指标。

1. 3 统计学方法 采用 SPSS18.0 统计学软件进行统计分析。计量资料以均数 ± 标准差 ( x-±s)表示 , 采用 t检验 ；计数资料采用χ2检验。P<0.05 为差异具有统计学意义。

2 实验结果

2. 1 附子提取物对雌性大鼠脏器指数的影响 雌性大鼠给药 15 d 附子提取物高剂量组的卵巢和给药 60 d 附子提取物低剂量组的子宫的脏器指数明显低于阴性对照组 (P＜0.05)。见表1。

2. 2 附子提取物对雌性大鼠动情周期的影响 试验期间发现给药组大鼠动情周期紊乱 , 具体表现为各期不连续、不规律、发情后期缺失。与阴性对照组比较 , 附子提取物高剂量组雌性大鼠的发情期明显延长 (P＜0.05), 发情后期明显缩短(P＜0.05)。见表2。

2. 3 附子提取物对生殖激素的影响 在雌性大鼠中 , 附子提取物各剂量组 FSH、LH、E2、P 含量与阴性对照组比较均明显下降 (P＜0.05 或 P＜0.01), 而 GnRH 含量无显著性变化。见表3。

表1 附子提取物对大鼠脏器系数的影响

表1 附子提取物对大鼠脏器系数的影响

注 ：与阴性对照组比较 ,aP＜0.05

实验时间 ( d ) 组别 阴性对照组 附子提取物低剂量 附子提取物中剂量 附子提取物高剂量1 5 卵巢 0 . 0 5 4 ± 0 . 0 1 2 0 . 0 5 0 ± 0 . 0 1 4 0 . 0 5 1 ± 0 . 0 1 7 0 . 0 4 1 ± 0 . 0 2 1a子宫 0 . 3 2 1 ± 0 . 0 5 0 0 . 3 0 6 ± 0 . 1 1 1 0 . 3 1 5 ± 0 . 0 8 6 0 . 3 2 4 ± 0 . 0 4 3 3 0 卵巢 0 . 0 5 1 ± 0 . 0 1 8 0 . 0 5 0 ± 0 . 0 1 2 0 . 0 4 9 ± 0 . 0 1 0 0 . 0 4 2 ± 0 . 0 1 1子宫 0 . 3 1 4 ± 0 . 1 2 7 0 . 3 6 4 ± 0 . 0 7 8 0 . 3 7 1 ± 0 . 0 8 8 0 . 2 5 8 ± 0 . 1 0 0 6 0 卵巢 0 . 0 5 5 ± 0 . 0 1 3 0 . 0 5 1 ± 0 . 0 1 1 0 . 0 5 3 ± 0 . 0 2 2 0 . 0 5 0 ± 0 . 0 1 2子宫 0 . 3 6 2 ± 0 . 1 0 6 0 . 3 3 6 ± 0 . 0 7 2a 0 . 3 8 7 ± 0 . 0 6 8 0 . 3 6 6 ± 0 . 0 9 2

表2 附子提取物对雌性大鼠动情周期的影响

表2 附子提取物对雌性大鼠动情周期的影响

注 ：与阴性对照组比较 ,aP＜0.05

组别 发情前期 发情期 发情后期 发情间期阴性对照组 1 6 . 4 ± 2 . 1 1 3 . 6 ± 1 . 8 1 1 . 1 ± 2 . 9 1 7 . 2 ± 3 . 2附子提取物低剂量 1 3 . 7 ± 2 . 1 1 7 . 4 ± 2 . 5 1 0 . 1 ± 2 . 8 1 8 . 5 ± 3 . 1附子提取物中剂量 1 5 . 8 ± 3 . 2 1 7 . 8 ± 1 . 5 9 . 1 ± 1 . 3 1 7 . 6 ± 2 . 5附子提取物高剂量 1 4 . 9 ± 2 . 0 2 0 . 3 ± 3 . 2a 8 . 8 ± 2 . 1a 1 8 . 2 ± 1 . 8

表3 附子提取物对雌性大鼠生殖激素的影响

表3 附子提取物对雌性大鼠生殖激素的影响

注 ：与阴性对照组比较 ,aP＜0.05,bP＜0.01

实验天数 ( d ) 组别 G n R H ( m I U / m l ) F S H ( I U / L ) L H ( m I U / m l ) E2( p m / m l ) P ( n g / m l )阴性对照组 1 4 . 3 4 ± 2 . 3 5 1 . 5 8 ± 0 . 3 2 9 . 6 8 ± 2 . 1 2 3 1 . 1 4 ± 4 . 1 1 4 . 3 0 ± 0 . 8 2 3 0 附子提取物低剂量 1 2 . 3 3 ± 2 . 6 4 0 . 6 7 ± 0 . 2 8b 7 . 3 2 ± 1 . 7 8a 1 6 . 5 2 ± 6 . 8 7b 1 . 6 1 ± 0 . 6 8b附子提取物中剂量 1 6 . 3 3 ± 1 . 4 7 0 . 7 1 ± 0 . 1 3b 7 . 4 2 ± 0 . 9 1a 1 5 . 9 1 ± 5 . 3 0b 1 . 4 2 ± 0 . 3 8b附子提取物高剂量 1 8 . 5 0 ± 1 . 7 9 0 . 8 2 ± 0 . 4 4b 7 . 9 1 ± 0 . 8 1b 1 1 . 1 9 ± 3 . 0 7b 1 . 1 8 ± 0 . 6 4b

3 讨论

附子提取物对雌性大鼠生殖脏器子宫和卵巢均有一定毒性 , 表现为脏器指数下降 ；其次附子提取物对雌性大鼠动情周期也有一定影响 , 表现为发情期延长 , 发情后期缩短 ；最后附子提取物可降低雌性大鼠血清中 FSH、LH、E2和 P 的含量 , 附子提取物降低 FSH 的含量 , 影响卵泡的发育和分化 ,促进颗粒细胞的凋亡。LH 含量的减少 , 使其阻止 GnRH 启动的颗粒细胞凋亡的效应减弱 ；FSH 和 LH 分泌的减少会直接影响卵巢分泌 E2和 P 的能力 , E2和 P 的减少又进一步影响了卵泡的成熟和加剧颗粒细胞的凋亡 , 这些激素的降低共同促进了卵泡的闭锁［1］。

［1］王根林 .下丘脑 - 垂体 - 性腺轴在动物生殖中的作用 .畜牧与兽医 , 1997, 29(4):182-183.

Research of reproductive toxicity of mice by extractive of monkshood

GAO Kai, HUANG Chun-lin. Hainan Star Pharmaceutical Ltd, Haikou 571400, China

Objective To investigate the influence of extractive of monkshood on the reproductive toxicity of female mice. Methods Gavages to mice was applied continuously for 30 days with extractive of monkshood. The organ index, estrus cycle, and change of reproductive hormone were investigated. Results The extractive of monkshood caused disorders of estrous cycle and obvious decline of visceral index. Contents of sex hormones, such as follicle-stimulating hormone (FSH), luteinizing hormone (LH), estradiol (E2), and progesterone (P) were significantly decreased compared with negative control group. Conclusion The reproductive toxicity of extractive of monkshood may have relation with decreased contents of FSH, LH, E2, and P. Increasing the level of sex hormone can be helpful in decreasing the reproductive toxicity of extractive of monkshood.

Monkshood; Reproductive toxicity; Estrous cycle; Sex hormones

2014-05-12］

571400 海南斯达制药有限公司