头孢氨苄片溶出度的光纤过程分析

李 欣， 朱 瑾， 耿 晶， 杨淑梅， 李新霞

(新疆医科大学1药学院， 2第五附属医院药剂科， 乌鲁木齐 830011)

药物从固体剂型中释放可涉及3个主要步骤：崩解、溶解并最终溶解[1]。以上3个过程同时发生，且对剂型有很强的依赖性，使溶解速度最终决定了药物的释放和它的吸收[2-3]。因此，体外溶出研究是确保固体形式制剂的质量控制和工艺优化的重要手段。头孢氨苄为第一代口服头孢类抗生素，对革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌均有抗菌作用，具有抗菌谱广、抗菌作用强、耐青霉素酶、临床疗效高、毒性低、过敏反应少等优点，临床应用广泛[4-5]。《中国药典》2010年版[6]收载了头孢氨苄的干混悬剂、片剂、胶囊和颗粒7个剂型，其中对片剂和胶囊的体外溶出度检查进行了规定：照溶出度测定法第一法，限度为标示量的80%，应符合规定。头孢氨苄片的国内生产厂家众多，但临床反映效果不一，影响其临床疗效的主要原因在于头孢氨苄片溶出行为的差异。

溶出曲线的测试已成为评价固体制剂内在品质的一种科学手段与方法[7]。光纤化学传感器(fiber optic chemical sensors，FOCS)用于体外溶出曲线的检测是光纤、光谱和计算机技术结合形成的新技术，现已被广泛应用[8-10]。本研究旨在建立应用该仪器基础上研发的FOCS-601型光纤药物溶出度实时测定仪原位监测头孢氨苄片溶出过程的方法。

1 仪器与试剂

FODT-601型光纤药物溶出度实时测定仪(新疆医科大学-新疆富科思生物技术公司联合研制)，真空脱气仪(ZKT-18，天大天发科技有限公司)，紫外可见分光光度计(UV-2550，日本岛津公司)，头孢氨苄对照品(中国药品生物制品检定所，批号：130408-200710，纯度94.4%)。试药：头孢氨苄片(厂家：北京京丰制药有限公司，规格：250 mg，批号：120310)。

2 方法与结果

2.1检测波长及光程的选择根据2010年版《中国药典》，采用脱气蒸馏水作为溶出介质，以脱气蒸馏水为空白，扫描约25 μg/mL的对照品及完全释放的待测头孢氨苄片供试品的紫外吸收光谱(图1)。对照品溶液在262 nm处有最大吸收，且在550 nm处无吸收；供试品溶液同样在262 nm处有最大吸收，在300～600 nm处没有特征吸收，为1条与X轴平行的直线。溶出度测试条件符合2010年版《中国药典》二部规定，因此选择262 nm作为测定波长，选择550 nm作为参比波长，参比波长可以消除溶液中不溶赋形剂颗粒的干扰。选择1 mm探头，使溶液的吸光度在0.8～1.2范围内。

2.2线性与范围精密称取头孢氨苄对照品194.4 mg于25 mL容量瓶中，加水溶解，定容至刻度，摇匀即得浓度为7 776 μg/mL的头孢氨苄储备液。分别精密量取0.7、1.4、2.1、2.9、3.6、4.3 mL储备液于100 mL容量瓶中，加水稀释定容至刻度，摇匀，得系列浓度分别为55.6、111.1、166.8、222.2、277.8、333.4 μg/mL的对照品溶液(相对百分溶出率分别为20%、40%、60%、80%、100%、120%)。

将该系列标准溶液分别加入1～6 号10 mL测量管中，于37℃预热后将6个光纤探头同时浸入标准溶液中，扫描系列标准溶液得到紫外吸收光谱。选择测定波长为262 nm， 参比波长为550 nm；探头间距1.0 mm。仪器采集得到在各通道测定各组溶液的吸光度，以吸光度(A)为横坐标，相对百分溶出率(C %)为纵坐标进行线性回归，得到6条标准曲线，由表1可知，头孢氨苄在百分溶出度为20%～120%范围内呈良好的线性关系。

表1 各通道探头回归方程

2.3日内、日间精密度试验分别取相对溶出率为40%、80%和120%的标准溶液在光纤药物溶出仪的6个通道进行精密度考察，结果显示其日内精密度与日间精密度RSD分别为1.87%和0.85%，见表2。

表2 日内及日间精密度试验结果

2.4回收率试验取浓度约为250 μg/mL(溶出百分率90%)头孢氨苄本底溶液10 mL共12份于50 mL量瓶中，分为4组，分别加入对照品溶液0、10、20、30 mL，用脱气蒸馏水稀释至刻度，进行测定，计算回收率。结果平均回收率为100.03%，RSD为3.91%，见表3。

表3 回收率试验结果

2.5样品测定根据2010年版《中国药典》规定的头孢氨苄片溶出度的测定条件，采用转篮法，100 r/min，以脱气蒸馏水900 mL为溶出介质进行试验，温度 37℃，测定时间为连续45 min。取6片依法测定，由光纤药物溶出仪原位过程监测得到溶出曲线(图 2)，药物于2～3 nim开始释放，在38 min左右达到平台。同时，于45 min按照药典方法取样，以紫外-可见分光光度法(2010年版《中国药典》附录IV A)测定头孢氨苄片的吸光度，计算各溶出杯中头孢氨苄片的累计溶出率，结果与光纤传感过程分析结果无明显差异，见表4。

表4 FODT法与紫外-可见分光光度法结果比较

3 讨论

利用光纤溶出仪测定头孢氨苄片溶出度实验精密度较高，数据可靠，具有重要的实际应用价值，本研究建立的方法可对胶囊、缓释等多种剂型的头孢氨苄药品的溶出行为进行过程分析。

《中国药典》只采用一点法控制药品质量，无法对药物溶出的全过程进行评价。对于前期崩解且溶出较快的片剂，有可能会导致体内的血药浓度突增，超出安全浓度，引起不良反应。此外，迟释程度的不同，决定了药物的起效时间，对于抗生素类药物，如果药物释放迅速，血药浓度很快达到峰值，治疗作用快；若释放缓慢，除起效慢、治疗效果较差外，还容易产生耐药性。因此，对于这些片剂来说，仅仅按照药典规定来判断其质量是否合格显然是不全面的，而应该在确定了参比制剂和实时在线全程测定的基础上对以下3个指标进行分析：(1) 溶出曲线的相似性比较及其与参比制剂的溶出曲线比对；(2) 药物制剂溶出速度的指标；(3) 药物制剂溶出程度的指标。光纤传感溶出仪测定固体制剂的溶出度优势明显，适合制剂工艺和质量标准研究，考察制剂处方溶出曲线的不同，进而优化处方工艺，达到更好地控制药物质量的目的。

参考文献:

[1] Cristina H, Reis S, Sílvia S. Comparação de perfis de dissolução da cefalexina através de estudos decinética e eficiência de dissolução (ED%)[J]. Revista Brasileira de Ciências Farmacêuticas, 2007, 43(1)：79-88.

[2] Gislaine K, Gabriela S, Rauber, MK, et al. Single crystal structure, solid state characterization and dissolution rate of terbinafine hydrochloride[J]. Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis, 2013(78-79)：105-111.

[3] 夏锦辉, 刘昌孝. 固体药物制剂的体外溶出度的统计学评价分析[J]. 中国药学杂志, 2000, 35(2)：130-131.

[4] Ramon MP, Jose LV, Consuelo S, et al. Controlled release of cephalexin from double-layer tablets containing small proportions of acrylic resins[J]. International Journal of Pharmaceutics, 1986, 32(2)：99-102.

[5] Yin LF, Qin C, Chen KS, et al. Gastro-floating tablets of cephalexin：Preparation and in vitro/in vivo evaluation[J]. International Journal of Pharmaceutics, 2013, 45(1-2)：241-248.

[6] 国家药典委员会.中华人民共和国药典(二部)[S]. 北京:中国医药科技出版社, 2010：556.

[7] 谢沐风.溶出曲线相似性的评价方法[J]. 中国医药工业杂志, 2009, 40(4)：308-310.

[8] 赵庆华, 王海龙, 巩伟, 等.光纤药物溶出仪测定氢氯噻嗪片的溶出度[J]. 解放军药学学报, 2012, 28 (1)：91-94.

[9] 耿东升.光纤药物溶出度法测定盐酸环丙沙星片及胶囊的溶出度[J]. 中国药事, 2010, 24(8)：783-788.

[10] 吴军, 杨梅, 李新霞, 等.光纤药物在位溶出度/释放度监测仪实时监测甲硝唑维B6片体外溶出度[J]. 光谱学与光谱分析, 2006, 26(9)：1761-1764.