血竭酊的药理作用研究

赵永旗 程洪兵 张同领 鲁丽红

·论著·

血竭酊的药理作用研究

赵永旗 程洪兵 张同领 鲁丽红

目的研究血竭酊的药理作用。方法采用小鼠耳郭肿胀法、大鼠脚趾肿胀法、热板法和自由落体组织损伤模型分别观察其抗炎、消肿、镇痛和抗急性软组织损伤作用。将动物分为模型、阳性药物和血竭酊高、 低浓度组。结果与模型组比较, 血竭酊高、 低浓度组小鼠耳肿胀度显著降低(P＜0.01), 大鼠蛋清所致脚趾肿胀度6 h显著消除(P＜0.01), 小鼠痛阈显著提高 (P＜0.01), 明显降低损伤大鼠的表观损伤积分 (P＜0.01)。结论血竭酊具有显著的抗炎、消肿、止痛及抗急性软组织损伤的作用。

血竭酊；抗炎；消肿；镇痛；急性软组织损伤

急性软组织损伤是外科常见的疾病之一, 是由于外力使关节过度伸屈, 使肌腱、韧带和关节囊等发生撕裂, 或钝物打击所致的肌组织、皮下组织等损伤所引起。血竭酊是本院开发的外用中药制剂(制剂批准文号：豫药制字Z04090080,现已获得专利, 专利号：ZL 2005 1 0088055.3), 具有活血化瘀,消肿止痛作用。多年来用于治疗急性软组织损伤, 取得了满意的疗效。为探明血竭酊药理作用, 本研究选用高、 低浓度进行药理学实验, 为其临床应用提供理论依据。

1 仪器与材料

1.1仪器 IN-100B型托盘扭力天平(上海第二天平仪器厂), 打孔器, 自制圆筒冲击器。

1.2试药 血竭酊(河南省濮阳市人民医院制剂室自制, 批号110901)； 吲哚美辛搽剂(黑龙江省佳木斯晨星制药厂,批号： 20110530)；阿司匹林(南京白敬宇制药有限公司, 批号： 110908)；正红花油(福建太平洋制药有限公司, 批号：110601)；60%乙醇, 二甲苯。

1.3动物 昆明种小鼠120只, ♀♂兼用, 体重18~22 g；Wistar大鼠40只, ♀♂兼用, 体重200~250 g；均由河南医科大学实验动物中心提供, 合格证号：医动字第410117号。

2 方法

2.1血竭酊的制备 按处方中的药物比例, 取适量血竭、丹参、没药、红花、苏木、川芎、茜草、羌活等11味中药置于适宜容器中, 加60%乙醇, 常温下密闭浸渍7 d以上,缓缓渗漉, 收集渗漉液适量(约800 ml), 将药渣压榨, 所得压榨液滤过后并入渗漉液中；添加60%乙醇至1000 ml, 加入冰片使溶, 搅拌均匀, 分装, 即得血竭酊。该制剂仅供局部敷患处使用, 严禁口服。作者分别制备了高、 低浓度血竭酊,每1 ml约含原药材分别为0.4 g (40%)、0.2 g (20%)。

2.2抗炎试验(小鼠耳肿胀法) 参考文献［1, 2］, 取小鼠40只, 雄性, 体重(20±2)g, 随机分为4组, 每组10只, 即模型组(生理盐水), 对照组(1.5%吲哚美辛搽剂), 血竭酊高、低浓度(40%、20%)组。将二甲苯0.05 ml涂于各组小鼠左耳前后两面, 右耳不涂药作为对照。致炎后30 min按10.0 ml/ kg在致炎耳处连续2次分别涂相应药物, 每次间隔30 min。于4 h后将小鼠颈椎脱臼处死, 剪下左右耳, 用8 mm直径打孔器取双耳同等部位耳片, 称重。左右耳质量之差为肿胀度, 按下列公式计算受试药肿胀抑制率：肿胀抑制率＝(模型组平均肿胀度－给药组平均肿胀度)/模型组平均肿胀度×100%。

2.3消肿作用(大鼠脚趾肿胀法) 参考文献［3］, 取大鼠40只, 分组与药物浓度同“2.2”项。各组大鼠于实验前按毛细血管放大测量法测定大鼠左后脚趾正常体积(cm3)。实验当天, 各组大鼠分别于左后脚两面涂相应药物0.1 ml/只脚, 涂药2次, 间隔1 h；末次给药后往左后脚注射蛋清0.1 ml/只脚。各组大鼠分别于注射蛋清后1、2、4、6 h测定左后脚体积,以各大鼠注射蛋清前后脚趾体积差值为肿胀度。

2.4镇痛作用(热板法) 参考文献［1］, 取♀小鼠置于金属热板(55℃), 以舔后脚为疼痛反应指标, 共测2次, 每次不超过30 s舔脚者为入选实验动物, 小鼠舔脚平均时间为给药前痛阈值。选取合格小鼠40只, 随机分为4组, 即模型组(生理盐水)、阿司匹林组(1.1%, 30 ml/kg)和血竭酊高、低浓度(40%、20%)组。其中阿司匹林为阳性药物对照, 按人体动物等效剂量推算, 应为1.1%浓度, 30 ml/kg。阿司匹林灌胃给药,而血竭酊组仍按后脚涂药, 共给药3次, 每次给药间隔1 h,末次给药0.5 h后开始测定痛阈值, 与给药前痛阈值比较。

2.5小鼠软组织损伤修复试验(自由落体组织损伤模型)参阅文献［4］, 选用昆明种小鼠40只, 雌雄各半, 体重(24±2) g, 用厚纸制成内径略大于200 g砝码的圆筒, 长30 cm。将小鼠后右足置于桌面, 足掌向上, 圆筒置于足掌面, 然后用砝码从圆筒顶端直落击下, 造成足部软组织损伤模型。然后将小鼠按性别、体重、损伤程度随机分为4组, 每组10只, 即阴性对照组［(即模型组(生理盐水)］、阴性对照组(正红花油)和血竭酊高、低浓度 (40%、20%)组。分别用皮尺测量各组损伤前及损伤后1 d的踝关节周长作为损伤测量值, 之后给予相应的药物治疗, 血竭酊高、低浓度组均给予血竭酊外搽；阳性对照组外搽正红花油, 阴性对照组仅给予生理盐水外搽,各组均每天搽药2次, 连续给药5 d, 末次给药后1 h分别用皮尺测量各组每天搽药后的周长, 比较各组药物的消肿作用。

2.6统计学方法 采用SPSS13.0统计软件进行数据分析。计量资料采用均数±标准差( x-±s)表示, 采用t检验, P<0.05为差异具有统计学意义。

3 结果

3.1血竭酊的抗炎作用 “抗炎试验(小鼠期中胀法)”,与模型组比较, 血竭酊高、 低浓度组肿胀抑制率显著增高(P＜0.01), 且呈剂量依赖性。结果表明, 血竭酊能显降低小鼠耳廓肿胀度。见表1。

3.2血竭酊的消肿作用 “消肿作用(大鼠脚趾肿胀法)”, 与模型组比较, 血竭酊高、 低浓度组肿胀度显著减少 (P＜0.01)。结果表明, 血竭酊有明显的消肿作用。见表2。

3.3血竭酊的镇痛作用 “镇痛作用(热板法)”, 与模型组比较, 血竭酊高、低浓度组给药前后痛阈值差显著增加(P＜0.01)。结果表明, 血竭酊有明显的镇痛作用。见表3。

3.4血竭酊对小鼠软组织损伤的影响 “小鼠软组织损伤修复实验(自由落体组织损伤模型)”, 抗软组织损伤试验结果表明, 血竭酊高浓度组在搽药后2 d即表现出明显的抗软组织损伤的作用, 其疗效延续至药后5 d。血竭酊低浓度组仅药后2 d显示出明显的作用, 药后4、5 d血竭酊高浓度组疗效均明显优于血竭酊低浓度组和阳性对照组, 结果表明血竭酊具有保护软组织损伤的作, 且呈现一定的量效关系。见表4。

表1 血竭酊的抗炎作用( x-±s)

表2 血竭酊的消肿作用( x-±s)

表3 血竭酊的镇痛作用( x-±s)

表4 血竭酊对小鼠软组织损伤的影响( x-±s, cm)

4 讨论

急性软组织损伤指人体运动系统、皮肤以下骨骼之外的组织所发生的一系列急性挫伤或(和)裂伤, 其主要表现为损伤局部疼痛、肿胀、有触痛, 皮肤青紫和活动受限。祖国医学认为“, 气伤痛、形伤肿”, 治宜活血化瘀, 消肿止痛之法。其治疗多以局部消炎止痛为主, 一般采用冷热敷、药物、物理等方法。

血竭酊由血竭、冰片、丹参、没药、红花、苏木、鸡血藤、川芎、降香、赤芍、茜草、羌活等药组成, 具有活血化瘀、消肿止痛作用。方中血竭具降低肌肉毛细血管通透性, 明显的抗血小板聚集等作用。丹参、川芎均具改善微循环, 抑制血小板聚集, 保护血管内皮细胞, 抑制毛细血管通透性。鸡血藤, 红花, 苏木也均有抗炎, 抑制血小板聚集作用。冰片、赤芍、红花、羌活有镇痛、抗炎作用。

本实验通过二甲苯引起的小鼠耳肿、蛋清引起的大鼠足肿、热板所致小鼠疼痛及自由落体组织损伤模型实验, 观察血竭酊的抗炎、消肿、镇痛及抗急性软组织损伤作用。结果表明, 血竭酊对二甲苯引起的小鼠耳肿, 有明显的抗炎作用；对蛋清引起的大鼠足肿, 有明显的消肿效果；热板所致小鼠疼痛试验, 能提高模型小鼠给药前后痛阈值差；自由落体组织损伤模型实验, 显示良好的退肿作用。提示血竭酊具有明显的抗炎、消肿及镇痛及促进损伤软组织修复等作用, 为该药临床治疗跌打损伤、软组织损伤等症提供了依据。

在本实验中有的观察指标出现小剂量组具有显著的药效作用, 而大剂量组经统计学处理无显著意义。这可能和中药所含活性成分的复杂性和中药作用机制的复杂性有关, 具体机制有待进一步阐明。本实验只对血竭酊的消肿止痛作用及抗急性软组织损伤作用进行了实验, 而对血竭酊的活血化瘀作用的具体机制还有待于进行进一步研究。

［1］ 徐叔云, 卞如谦, 陈修, 等.药理实验方法学.北京:人民卫生出版社, 2002:885, 916.

［2］ 周远大, 江舟, 何海霞, 等.野马追对大、小鼠实验性高脂血症的防治作用.中国药房, 2007, 18(3):178.

［3］ 赵辨.临床皮肤病学.第2版.南京:江苏科学技术出版社, 1990:479.

［4］ 潘洪平, 陈英, 荆树汉, 等.复方黄毛豆腐柴搽剂抗软组织损伤及抗炎止痛的实验研究.中国医院药学杂志, 2007, 27(7): 861.

Study on pharmacological action of Xuejieding Tinctures

ZHAO Yong-qi, CHENG Hong-bing, ZHANG Tong-ling et al.Puyang People's Hospital, Puyang 457000, China

Objective To investigate pharmacological action of Xuejieding Tinctures.MethodsAntiinflammation, effects swelling relief, analgesic and acute soft tissue injury disease of Xuejieding Tinctures were determined by mice ear swelling method, rat toe swelling method, hot plate method and freely falling mass damages models, respectively.The experiments were divided into 4 groups, i.e.normal saline control group, positive drug group and Xuejieding Tinctures high and low concentration groups.ResultsXuejieding Tinctures containing 40% or 20% crude drug decreased the mice ear swelling (P＜0.01)；Xuejieding Tinctures also relived rat toe swelling induced by egg white at the end of 6 hours(P＜0.01)；the pain threshold value of mice were elevated(P＜0.01).the acute soft tissue injury in rats were resisted(P＜0.01).ConclusionXuejieding Tinctures has significant antiinflammation, effects swelling relief, analgesic and can release soft tissue injury.

Xuejieding Tinctures; Anti-inflammation; Swelling relief; Analgesia; Acute soft tissueinjury

457000 濮阳市人民医院(赵永旗 程洪兵 张同领)；濮阳市红十字医院(鲁丽红)

赵永旗 E-mail： pyzhyq@126.com