种鸡脾转移因子配合禽流感H5亚型灭活疫苗免疫最佳应用时机探索

张 恒 王海兵 宣大蔚 （山东信得科技股份有限公司 山东 诸城 262200）

种鸡脾转移因子配合禽流感H5亚型灭活疫苗免疫最佳应用时机探索

张 恒 王海兵 宣大蔚 （山东信得科技股份有限公司 山东 诸城 262200）

本研究通过种鸡脾转移因子配合H5油苗免疫试验，验证了种鸡脾脏转移因子提高体液免疫活性，同时比较了免疫H5油苗不同时间段应用种鸡转移因子产生的体液免疫效果，其中在油苗免疫后3d应用转移因子作用效果最好。

转移因子 种鸡 信必妥 H5

转移因子(TF)是机体内具有免疫活性的 T 淋巴细胞所释放的一种能够转移免疫致敏信息的因子，它能够特异地将供体某一细胞免疫的功能转移给受体，非特异性地增强受体免疫功能，是一种新型免疫激发剂[1]。它能将

供体细胞免疫功能转移给受体,增强受体免疫功能,而且可以通过T细胞来调节B细胞，改善其体液免疫功能,从而增强机体的抗病能力[2]。近年来动物转移因子的研究与应用引起了人们的重视，取得了明显成就。

本研究验证种鸡脾转移因子对禽流感H5亚型二价灭火免疫的免疫增强作用，同时比较了种鸡脾转移因子在疫苗免疫不同时间段应用对疫苗的免疫增强作用，为转移因子在临床更好的应用提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 试验动物 30日龄蛋雏鸡购自诸城某养殖场，饲养于干净卫生的环境中，自由采食；SPF公鸡购自济南斯派福禽业科技有限公司，饲养于负压隔离器中，自由采食。

1.1.2 主要试剂 种禽信必妥口服液(主要成分是鸡脾脏转移因子)产自山东信得科技有限公司。重组禽流感病毒H5亚型二价灭活疫苗(H5N1，Re-6株+Re-4株)购自青岛易邦生物股份有限公司。H5N1 Re-4检测抗原购买于青岛易邦生物股份有限公司，H5N1 Re-6检测抗原购买于哈尔滨维科生物技术开发公司，饲料若干购买于山东亚太中慧集团。

1.2 方法

1.2.1 试验动物处理及分组 30日龄80只蛋鸡饲养至60日龄后平均分成8组，每组10只，具体处理方法见表1。

1.2.2 采样时间及处理方式 在进行试验开始前一周抽取10只鸡进行翅静脉采血分离血清，检测H5N1的Re-4、Re-6母源抗体效价；在免疫H5N1油苗后，7、14、21、28d，进行翅静脉采血分离血清，采用HI/HA试验测H5N1的Re-4、Re-6血清型抗体效价。

表1 试验动物分组及处理情况

1.2.3 数据处理 采用SPSS18.0软件对试验数据进行统计学分析。

2 试验结果

2.1 母源抗体效价检测结果

通过血凝抑制试验HI测定10只抽样鸡只的抗体效价为：血清学Re-4株抗体效价为0；血清学Re-6株抗体效价为0；可以用于后续疫苗免疫试验，并设立空白对照，随时监测空白鸡群血清学Re-4株和Re-6株抗体效价。

2.2 H5N1 Re-4血清学抗体效价

通过血凝抑制试验HI测定每只鸡的抗体效价，使用以下方法计算每组平均抗体效价，平均抗体效价各组血清学Re-4株平均抗体效价见表2、图1。

由表2可以看出，免疫重组禽流感病毒H5亚型二价灭活疫苗后3d，应用种鸡脾转移因子，在免疫疫苗后14、21、28d血清学Re-4株抗体效价最高。在免疫后14d，免疫后3d组(3组)与只免疫苗组(6组)和免疫前3d组(1组)比较差异显著(P＜0.05)；在免疫后21d，与1组和5组比较差异极显著(P＜0.01)，与6组比较差异显著(P＜0.05)；在免疫后28d，与6组和1组比较差异显著(P＜0.05)。

表2 Re-4血清型抗体效价检测结果 (log2)

图1 Re-4血清型抗体滴度变化曲线

2.3 H5N1 Re-4血清学抗体效价

各组血清学Re-6株平均抗体效价见表3、图2。由表1可以看出，免疫重组禽流感病毒H5亚型二价灭活疫苗后3d，应用种鸡脾转移因子，在免疫疫苗后14、21、28d血清学Re-6株抗体效价最高。在免疫后14d，免疫后3d组(3组)与只免疫苗组(6组)、免疫后9d组(5组)和免疫前3d组(1组)比较差异显著；在免疫后21d，与1组、4组、5组和6组比较差异显著；在免疫后28d，与1组比较差异显著。

表3 Re-6血清型抗体效价检测结果 (log2)

图2 Re-6血清型抗体滴度变化曲线

3 讨论

近几年来鸡脾转移因子在临床上应用越来越广泛，其配合疫苗免疫可以显著提高免疫后的抗体效价。张恒，李文鹏等(2012年)研究发现给SPF雏鸡口服后可以显著提高免疫疫苗的抗体滴度，说明转移因子可以增强体液免疫反应，增强疫苗的保护效果[3]。赵支国，李相安等

(2004年)研究发现TF具有良好的生物活性,可促进机体产生良好的免疫效果,增强机体的免疫功能[4]。笔者针对鸡脾转移因子配合疫苗免疫应用时机进行了试验，为鸡脾转移因子进一步更好的应用于临床提供依据。研究发现鸡脾转移因子在二价灭火疫苗免疫后3d应用，疫苗免疫产生的抗体效价最好；禽流感H5亚型的两个血清型Re-4和Re-6的抗体效价均是免疫后3d应用种鸡脾转移因子组最好。并且进行了重复试验，得出一致的结论，这更好的验证了本试验结果。

鸡脾转移因子同时因其效果明显，无毒性，来源广泛，无抗原性，因此笔者认为鸡脾转移因子具有很好的应用前景和较大的发展潜力，本研究发现进一步促进了鸡脾转移因子临床上的应用。

[1] 乔彦良. 动物转移因子研究与在畜禽疫病防治中的应用[J]. 中国禽业导刊, 2002, 19 (23): 45-47.

[2] 江青艳, 戴远威. 脾脏转移因子对粤黄鸡免疫功能的影响[J]. 畜牧兽医杂志, 1996, 7(15): 6-8.

[3] 张恒, 李文鹏, 吴庆海等. 鸡转移因子(信必妥)活性检测[J]. 山东畜牧兽医, 2012, 6(10): 8-9.

[4] 赵支国, 赵洪娟, 李相安等. TF对鸡体液免疫效果的影响试验[J].山东畜牧兽医, 2004, 4(5): 4.

S851.33

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1007-1733(2014)01-0010-02

2013–10–31）