miR—126在冠脉病变中的表达及与血脂相关性的临床研究

郑炜华　吴学周　张爱鹏

[摘要] 目的 观察冠心病患者血液中miR-126表达的变化，探讨其与冠脉病变、血脂相关的临床意义。方法 收集2011年3月～2013年6月我院心内科诊治的冠心病患者98例，另取本院同期健康体检者40例作为对照组。miR-126表达使用荧光定量PCR检测。结果 对照组miR-126和HDL-C显著高于冠心病组 （P <0.05），对照组TC 和LDL-C显著低于冠心病组 （P <0.05）。miR-126、TC 、LDL-C和HDL-C表达在单支病变组、双支病变组和多支病变组之间存在显著性差异 （P <0.05）。miR-126与TC表达呈显著负相关（r=-0.324， P <0.05），与LDL-C表达亦呈显著负相关（r=-0.381， P <0.05），而与HDL-C表达呈显著正相关（r=0.416，P <0.05）。 结论 冠心病患者中miR-126与TC和LDL-C表达呈显著负相关，与HDL-C表达呈显著正相关，miR-126表达随着冠脉病变分支的增加而逐渐下调，miR-126的检测可用于冠心病患者冠脉病变程度的评估。

[关键词] 冠心病；miR-126；血脂

[中图分类号] R587.2 [文献标识码] B [文章编号] 1673-9701（2014）12-0088-02

[Abstract] Objective To detect the expression of plasma circulating miR-126 and explore its clinical significance in patients with coronary atherosclerotic heart diease （CHD）. Methods A total of 98 patients with CHD were enrolled in this study. Another 40 healthy person were collected as control. The expression of miR-126 was detected with Real time-PCR assay. Results The expression of miR-126 and HDL-C in control group was higher than that in CHD group（P <0.05）. The expression of miR-126， TC， LDL-C and HDL-C were significant difference among single-vessel group， double-vessel group， and many-vessel group（P <0.05）. The expression of miR-126 was significantly negative correlation with TC （r = -0.324， P <0.05） and LDL-C（r = -0.381， P <0.05）. The expression of miR-126 was significantly positive correlation with HDL-C（r = 0.416， P <0.05）. Conclusion The low-level expression of miR-126 is found in CHD patients. The expression of miR-126 is gradually reduced according to increased coronary artery branch lesion. Detection of miR-126 may be used for early diagnosis and evaluation of CHD.

[Key words] Coronary atherosclerotic heart diease（CHD）； The miR-126； Lipid

microRNA（miRNA）是一类长约18～24 个核苷酸的小分子非编码单链RNA，其通过与靶基因互补配对，在翻译水平调控基因的表达[1]。miRNA广泛表达于各种组织和器官，在细胞的增殖和凋亡、器官形成、血液形成、发育进程等生命过程中发挥着重要的作用[2]。miR-126是与血管内皮细胞以及血管功能密切相关的一种miRNA，定位于表皮生长因子样结构域7基因7号内含子区[3，4]。以动脉粥样硬化病变为基础的冠心病（coronary heart disease，CHD）是严重威胁人类健康的常见心血管疾病，本研究观察了CHD患者血液循环中miR-126表达的变化，并探讨其相关临床意义。

1 材料与方法

1.1 临床资料

收集2011年3月～2013年6月我院心内科诊治的冠心病患者98例，其中男52例，女46例，年龄51～75岁，平均（61.4±11.3）岁，所有冠心病患者均经冠状动脉造影检查确诊。根据冠脉病变范围分为：30例单支病变组、36例双支病变组、32例多支病变组。另取本院同期健康体检者40例作为对照组，四组受试者在性别、年龄等一般临床资料方面差异无统计学意义，具有可比性（P>0.05）。

1.2 血脂的检测

总胆固醇（TC）、低密度脂蛋白 （LDL-C）、高密度脂蛋白（HDL-C）生化指标的检测由检验科完成。

1.3 miR-126表达的荧光定量PCR（Real time-PCR）检测

参照郑志伟等[5]的方法，采集受试者静脉血2 mL，3000 r/min 15min分离上清，加入Trizol（大连宝生物科技有限公司），按照试剂说明提取细胞总RNA，逆转录茎环引物和M-MLV逆转录酶（北京天根生物科技技术有限公司）反转录，TaqDNA聚合酶、Has-miR-126茎环引物和SYBR Green荧光染料（上海吉玛生物科技技术有限公司）定量检测miR-126的表达量。Has-miR-126茎环引物序列为5'-TATCCAGTGATTCCGACCGCCGCATGGAGTCTG-3'（sence）和5'- TCCGCTCTTGGTGTGGTGTGAGTCGC-3'（antisence），miR-126的表达量使用2-△Ct评估。endprint

1.4 统计学分析

应用SPSS12.0统计软件处理数据，计量资料以均数±标准差表示，两样本均数比较采用t检验，多组均数间的比较采用方差分析，Pearson相关性分析检测各检测指标的相关关系，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 冠心病患者miR-126表达及其与血脂的关系

从表1可见，对照组miR-126和HDL-C显著高于冠心病组（P < 0.05），对照组TC 和LDL-C显著低于冠心病组（P < 0.05）。

3 讨论

冠心病的发病机制目前尚未完全明了，因此临床上也缺乏有效的防治手段，探寻冠心病的发病机制一直是学者们努力研究的方向[6]。血液循环中miRNA的变化与心血管疾病发病中的作用近年来逐渐受到关注，并已有研究使用循环 miRNA作为心血管疾病诊断及药物疗效评价的生物标志物[7]。本研究采用茎环逆转录-荧光定量的方法检测了98份冠心病患者血浆循环中miR-126的表达，与40份健康对照的血浆样本比较，发现冠心病组miR-126表达显著低于对照组，提示了miR-126表达的下调可能参与了冠心病的发生、发展过程。血脂的升高导致局部血管壁的脂质沉积是冠心病动脉粥样硬化病变的主要成因[8]， TC和LDL-C是致动脉粥样硬化病变的主要血液因子，HDL-C是致动脉粥样硬化病变保护因子，相关性分析显示，miR-126与TC和LDL-C表达呈显著负相关，与HDL-C表达呈显著正相关，提示了miR-126可能调控着某些脂质代谢相关的基因，冠心病患者中miR-126表达的下调可能导致了患者脂质代谢的紊乱，其具体的作用机制还有待进一步的研究[9]。

本研究显示了冠心病患者外周血液循环中miR-126表达有随着冠脉病变分支的增加而逐渐减低的趋势，提示了miR-126检测可用于冠心病病变程度的评估。有研究显示，miR-126可以调控血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）的表达[10]，大量的研究已证实VEGF在动脉粥样硬化斑块的增殖和活化中起着重要作用[11]，例如可以促进动脉粥样硬化斑块增殖过程中滋养血管的生长，以及巨噬细胞和单核细胞迁移到动脉粥样硬化斑，参与到血管壁的慢性炎症中[12]，这可能也是miR-126表达的下调致血管粥样病变发展的一个机制。endprint

1.4 统计学分析

应用SPSS12.0统计软件处理数据，计量资料以均数±标准差表示，两样本均数比较采用t检验，多组均数间的比较采用方差分析，Pearson相关性分析检测各检测指标的相关关系，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 冠心病患者miR-126表达及其与血脂的关系

从表1可见，对照组miR-126和HDL-C显著高于冠心病组（P < 0.05），对照组TC 和LDL-C显著低于冠心病组（P < 0.05）。

3 讨论

冠心病的发病机制目前尚未完全明了，因此临床上也缺乏有效的防治手段，探寻冠心病的发病机制一直是学者们努力研究的方向[6]。血液循环中miRNA的变化与心血管疾病发病中的作用近年来逐渐受到关注，并已有研究使用循环 miRNA作为心血管疾病诊断及药物疗效评价的生物标志物[7]。本研究采用茎环逆转录-荧光定量的方法检测了98份冠心病患者血浆循环中miR-126的表达，与40份健康对照的血浆样本比较，发现冠心病组miR-126表达显著低于对照组，提示了miR-126表达的下调可能参与了冠心病的发生、发展过程。血脂的升高导致局部血管壁的脂质沉积是冠心病动脉粥样硬化病变的主要成因[8]， TC和LDL-C是致动脉粥样硬化病变的主要血液因子，HDL-C是致动脉粥样硬化病变保护因子，相关性分析显示，miR-126与TC和LDL-C表达呈显著负相关，与HDL-C表达呈显著正相关，提示了miR-126可能调控着某些脂质代谢相关的基因，冠心病患者中miR-126表达的下调可能导致了患者脂质代谢的紊乱，其具体的作用机制还有待进一步的研究[9]。

本研究显示了冠心病患者外周血液循环中miR-126表达有随着冠脉病变分支的增加而逐渐减低的趋势，提示了miR-126检测可用于冠心病病变程度的评估。有研究显示，miR-126可以调控血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）的表达[10]，大量的研究已证实VEGF在动脉粥样硬化斑块的增殖和活化中起着重要作用[11]，例如可以促进动脉粥样硬化斑块增殖过程中滋养血管的生长，以及巨噬细胞和单核细胞迁移到动脉粥样硬化斑，参与到血管壁的慢性炎症中[12]，这可能也是miR-126表达的下调致血管粥样病变发展的一个机制。endprint

1.4 统计学分析

应用SPSS12.0统计软件处理数据，计量资料以均数±标准差表示，两样本均数比较采用t检验，多组均数间的比较采用方差分析，Pearson相关性分析检测各检测指标的相关关系，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 冠心病患者miR-126表达及其与血脂的关系

从表1可见，对照组miR-126和HDL-C显著高于冠心病组（P < 0.05），对照组TC 和LDL-C显著低于冠心病组（P < 0.05）。

3 讨论

冠心病的发病机制目前尚未完全明了，因此临床上也缺乏有效的防治手段，探寻冠心病的发病机制一直是学者们努力研究的方向[6]。血液循环中miRNA的变化与心血管疾病发病中的作用近年来逐渐受到关注，并已有研究使用循环 miRNA作为心血管疾病诊断及药物疗效评价的生物标志物[7]。本研究采用茎环逆转录-荧光定量的方法检测了98份冠心病患者血浆循环中miR-126的表达，与40份健康对照的血浆样本比较，发现冠心病组miR-126表达显著低于对照组，提示了miR-126表达的下调可能参与了冠心病的发生、发展过程。血脂的升高导致局部血管壁的脂质沉积是冠心病动脉粥样硬化病变的主要成因[8]， TC和LDL-C是致动脉粥样硬化病变的主要血液因子，HDL-C是致动脉粥样硬化病变保护因子，相关性分析显示，miR-126与TC和LDL-C表达呈显著负相关，与HDL-C表达呈显著正相关，提示了miR-126可能调控着某些脂质代谢相关的基因，冠心病患者中miR-126表达的下调可能导致了患者脂质代谢的紊乱，其具体的作用机制还有待进一步的研究[9]。

本研究显示了冠心病患者外周血液循环中miR-126表达有随着冠脉病变分支的增加而逐渐减低的趋势，提示了miR-126检测可用于冠心病病变程度的评估。有研究显示，miR-126可以调控血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）的表达[10]，大量的研究已证实VEGF在动脉粥样硬化斑块的增殖和活化中起着重要作用[11]，例如可以促进动脉粥样硬化斑块增殖过程中滋养血管的生长，以及巨噬细胞和单核细胞迁移到动脉粥样硬化斑，参与到血管壁的慢性炎症中[12]，这可能也是miR-126表达的下调致血管粥样病变发展的一个机制。endprint