通痹止痛颗粒中淫羊藿的提取工艺研究

2014-06-07郑莉

中国医药指南 2014年36期

关键词：淫羊聚酰胺藿苷

郑莉

（防城港市中医医院，广西防城港 538021 ）

通痹止痛颗粒中淫羊藿的提取工艺研究

郑莉

（防城港市中医医院，广西防城港 538021 ）

目的研究通痹止痛颗粒中淫羊藿的最佳提取工艺。方法以淫羊藿苷为指标，分别比较醇提与水提、不同浓度乙醇回流提取，并用正交试验法优选通痹止痛颗粒中淫羊藿的提取工艺。结果最佳工艺为70%乙醇15倍量，浸泡1 h，回流提取2次，每次1.5 h。结论该工艺合理可行，含量测定方法稳定可靠。

通痹止痛颗粒；提取工艺；淫羊藿；正交试验

通痹止痛颗粒是由拟黑多刺蚁、独活、威灵仙、延胡、淫羊藿、续断、鸡血藤、甘草等制成的复方中药颗粒，具有强筋壮骨，祛风通络，散寒除湿，通痹止痛的功效，用于风寒湿邪闭阻经络，气血运行不畅所致痹病。淫羊藿的主要成分为黄酮类[1,2]，淫羊藿苷是黄酮类中的主要活性成分，具有显著的药理作用[3,4]。本实验以淫羊藿苷为指标，分别比较醇提与水提、不同浓度乙醇回流提取，并用正交试验法优选通痹止痛颗粒中淫羊藿的提取工艺，试图找出最佳提取方法。

1 仪器与材料

1.1 仪器：高效液相色谱仪：岛津LC-6A、CR-3A数据处理机、SPD-6A紫外可见检测器。TG332A型微量分析天平（上海天平仪器厂）。

1.2 材料：淫羊藿苷对照品（中国药品生物制品检定所，批号773-9412）；乙腈为色谱纯，其他试剂为分析纯，水为注射用水。

2 方法与结果

2.1 醇提与水提的比较：称取淫羊藿粗粉100 g两份，一份用60%乙醇回流提取二次，每次加10倍量60%乙醇，回流1 h，滤过，合并滤液，回收乙醇，浓缩至600 mL；另一份加水浸泡1 h，煎煮二次，每次加水12倍量，煎煮2 h，滤过，合并滤液，浓缩至600 mL。取上述两种溶液各2 mL，加聚酰胺0.2～0.3 g拌匀，水浴加热至近干，加至聚酰胺小柱（玻璃柱内径1.2 cm，聚酰胺高5 cm）上，容器以水适量多次洗涤，移入小柱内，并以水50 mL洗脱，弃去水液，再以醋酸乙酯150 mL洗脱，收集醋酸乙酯洗脱液，蒸干，残留物精密加入70%乙醇10 mL使溶解，作为供试品溶液。按《中国药典》2005年版一部淫羊藿含量测定项下方法[5]测定其淫羊藿苷含量，结果见表1。

表1 淫羊藿乙醇回流提取与水煎煮提取的比较

2.2 不同浓度乙醇回流提取的比较：分别称取淫羊藿粗粉100 g，以50%、60%、70%、80%、90%乙醇回流提取二次，每次1 h，每次加10倍量乙醇，同“2.1”项下方法测定其淫羊藿苷含量，结果见表2。

表2 淫羊藿不同浓度乙醇回流提取的比较

2.3 70%乙醇回流提取工艺优选：根据经验和文献资料[6]，乙醇量（A）、浸泡时间（B）、回流时间（C）、回流次数（D）是影响加热回流提取效果的主要因素，以提取液中淫羊藿苷含量为指标，按4个因素，每因素3水平，用L9（34）正交表进行正交试验，因素水平见表3。每次试验取淫羊藿粗粉100g，试验结果见表4，方差分析见表5。

表3 因素水平表

表4 淫羊藿70%乙醇回流提取工艺条件正交试验表

表5 淫羊藿70%乙醇回流提取工艺条件方差分析表

2.4 结果与分析：从表1可以看出，乙醇回流法优于水煎煮法。从表2可以看出，随乙醇浓度提高，所提得淫羊藿苷总量增加。70%、80%、90%乙醇所提得淫羊藿苷总量相差不大，重复试验3次，结果无显著性差异（P＞0.05）。从节约成本角度考虑，以70%乙醇回流提取较佳。

从试验分析结果可看出，乙醇量（A）、回流时间（C）、回流次数（D）对淫羊藿苷含量均有影响（P＜0.1～0.01），其影响大小顺序为D＞A＞C。浸泡时间（B）离差平方和最小，近似作为误差Sse。经直观比较分析，同时结合生产实际和成本，优选水平最佳方案应为A3B1C3D2，即每次加入70%乙醇15倍量，浸泡1 h，回流提取2次，1.5小时/次。

2.5 工艺验证：为验证优选工艺的可靠性和重复性，按最佳工艺平行制备3份样品，测得淫羊藿苷的平均含量为0.17%，处于较高水平。表明该工艺合理可行，具可操作性和重复性。