环维黄杨星D舌下片的处方组成研究

张冬梅，章雪辉，姜小丽，陈洋，钟玲

（成都医学院药学院，成都 610083）

环维黄杨星 D（CVB－D）是《中国药典》2010年版一部收载的中药原料品种，系从黄杨科植物小叶黄杨（Buxus microphylla Sieb.et Zucc.Var.Sinica Rehd.et Wils）及其同属植物中提取的生物碱，具有行气活血、通络止痛功能，主要用于治疗气滞血瘀所致的胸痹心痛、脉结代、冠心病和心律失常者［1，2］。目前环维黄杨星D制剂上市品种主要为口服普通黄杨宁片。在临床治疗冠心病和心率失常时，常规剂量的黄杨宁片的疗效强度可接近或超过硝酸甘油，但起效时间显著晚于后者［3］；与黄杨宁片比较，静脉注射环维黄杨星D起效快，峰值时间约为3 min，且抗心肌缺血作用比同剂量黄杨宁片强，作用维持时间长［4］，故普通黄杨宁片存在起效缓慢和口服生物利用度较低的弊端，不利于冠心病等疾病的临床治疗。舌下黏膜给药属于非侵入式给药，无胃肠及肝脏首过效应，吸收起效快，生物利用度高，已成为小剂量药物注射给药的理想替代途径之一［5，6］。环维黄杨星D使用剂量小，将其制成舌下片可使药物吸收迅速，避免胃肠和肝脏的首过效应，提高药物生物利用度，适合临床心血管疾病的治疗需要。本实验对环维黄杨星D舌下片的处方组成进行了研究，为后续制备工艺研究奠定基础。

1 仪器与试药

DP－120单冲压片机（江苏泰州市明扬制药机械有限公司）；HH－2数显恒温水浴锅（上海常思工贸有限公司）；YSEI药物稳定性试验箱（重庆市永生实验仪器厂）；CS－2B脆碎度测试仪（天津创业电子设备制造有限公司）；BJ－3崩解时限测试仪（天津市国铭医药设备有限公司）；YD－IB智能片剂硬度仪（天津创兴电子设备制造有限公司）；RC－6溶出度测试仪（天津市国铭医药设备有限公司）；XB－1小溶出杯浆法装置（天津市天大天发电子设备制造有限公司）；Alpha－1900s紫外可见分光光度计（上海谱元仪器有限公司）。

环维黄杨星D原料药（东台市康宁植物素有限公司，批号：090805，纯度99.2%）；环维黄杨星 D对照品（成都曼思特生物科技有限公司）；乳糖（成都市科龙化工试剂厂）；羧甲基淀粉钠（成都市科龙化工试剂厂）；可溶性淀粉（（成都市科龙化工试剂厂）；甘露醇 （成都市科龙化工试剂厂）；预胶化淀粉 （成都市科龙化工试剂厂）；低取代羟丙基纤维素（上海源聚生物科技有限公司）；微晶纤维素 （成都市科龙化工试剂厂）；羟丙基甲基纤维素（泰安瑞泰纤维素有限公司）；硬脂酸镁 （成都市科龙化工试剂厂）；溴百里酚蓝（成都市科龙化工试剂厂）；无水硫酸钠、磷酸二氢钠、氯仿、甲醇均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 环维黄杨星D体外含量测量方法

2.1.1 对照品溶液的制备 精密称取干燥至恒重的CVB－D对照品5mg，置50mL容量瓶中，加甲醇14mL超声溶解，用0.05mol／L的磷酸二氢钠缓冲溶液稀释至刻度，摇匀。精密量取10mL，置100 mL量瓶中，用0.05mol／L的磷酸二氢钠缓冲溶液稀释至刻度，摇匀，即得（相当于 CVB－D 10μg／mL）。

2.1.2 供试品溶液的制备 取本品20片，研细，取适量（相当于CVB－D 0.5mg），精密称定，置50mL量瓶中，加0.05mol／L的磷酸二氢钠缓冲溶液至刻度，置80℃水浴1.5h取出，加0.05mol／L的磷酸二氢钠缓冲溶液至刻度，超声2min，过滤，取滤液，即得。

2.1.3 测定方法 精密量取对照品溶液与供试品溶液各5mL，分别置分液漏斗中，精密加入溴麝香草酚蓝溶液（取溴麝香草酚蓝18mg，置250mL量瓶中，加甲醇5mL使溶解，加0.05mol／L磷酸二氢钠缓冲液至刻度，摇匀，即得）5mL，摇匀，立即分别精密加入氯仿10mL，充分振摇2min，静置1.5 h，取氯仿层，置含0.5g无水硫酸钠的具塞试管中，振摇，静置，取上清液，按照分光光度法（《中国药典》2010年版二部附录ⅣA），在410nm的波长处测定吸收度，计算，即得［1］。

2.2 环维黄杨星D舌下片的体外溶出度测定方法

按照《中国药典》2010年版二部附录X C溶出度测定法第三法（小杯法），取本品，以100mL水为溶出介质，转速50r／min，温度37℃，依法操作，在5min、10min、15min、30min、45min、60min时分别取样8mL，0.45μm滤膜滤过，及时补加等温溶出介质8mL。按含量测定方法测定溶液中CVB－D的浓度，并按下式计算累计溶出百分数。

累积溶出计算公式：

Xi为第i次实际测得的相对百分溶出度，Xi校为第i次经校正后的相对百分溶出度，V1为溶出介质总体积，V2为每次取样后所补充的体积数［7］。

2.3 辅料吸湿性及相互作用研究

2.3.1 辅料的吸湿性考察 辅料的吸湿性能关系到片剂的制备工艺、质量和保存等，故需要对舌下片的辅料吸湿性能进行考察。称取可溶性淀粉、预胶化淀粉、乳糖、甘露醇、微晶纤维素（MCC）、羧甲基淀粉钠（CMS－Na）、低取代羟丙基纤维素（L－HPC）、羟丙甲纤维素（HPMC）和硬脂酸镁各0.5g，分别置于5mL称量瓶中，平铺成薄层（h≤5mm），在25℃，RH＝92.5%条件下，于第1、5、10天取样称重，按公式：吸湿率＝样品质量／0.5×100%，计算辅料的吸湿率（见表1）。结果表明，CMS－Na和 HPMC吸湿性较强，在处方中用量不宜过大；L－HPC、MCC和硬脂酸镁有较弱的吸湿性；可溶性淀粉、预胶化淀粉、乳糖和甘露醇几乎无吸湿性。

表1 环维黄杨星D候选辅料吸湿率的测定结果（25℃，RH＝92.5%）

2.3.2 辅料对主药含量测定影响的研究 辅料的选择应该对主药的含量测定无干扰。分别称取各辅料5mg置于50mL容量瓶中，精密加入0.1mg／mL的CVB－D溶液5mL，振摇，用0.05mol／L磷酸二氢钠溶液稀释至刻度，按2.1项下含量测定方法测定，计算回收率：回收率＝A样品／A对照品x100%（见表2）。结果表明，CMS－Na的回收率仅为77.96%，对环维黄杨星D的含量测定有干扰，不适合作为该药辅料；其他辅料回收率在95%～105%之间，回收率良好，不干扰主药的含量测定。

表2 辅料对主药含量测定的影响结果

2.4 环维黄杨星D舌下片的处方筛选

2.4.1 剂量 鉴于黄杨宁片中环维黄杨星D的每次用量为1～2mg［1］，本舌下片的剂量拟为每片1mg。

2.4.2 制备工艺 采用湿法制粒压片法制备舌下片：取药物与2／3的崩解剂混匀，用等量递加法加入填充剂混匀，加入适量黏合剂制软材，过20目筛，湿颗粒于60℃下干燥2h，20目筛整粒，加入剩下的1／3崩解剂和适量润滑剂，混匀，用5.5㎜冲压片，即得。

2.4.3 填充剂种类及用量的筛选 环维黄杨星D剂量为1mg，需加入填充剂辅助成型。固定主药、崩解剂L－HPC和黏合剂HPMC的用量，分别取可溶性淀粉、预胶化淀粉、乳糖、甘露醇与MCC混匀作为复合填充剂，在固定片重和压力的情况下，制备不同配方的舌下片。以颗粒的流动性、舌下片的压制情况、脆碎度和崩解时间为指标来筛选较优填充剂（见表3）。结果表明，各配方所得干颗粒休止角皆＜30°，流动性良好；以预胶化淀粉＋MCC或乳糖＋MCC为复合填充剂的舌下片压缩成型性好、硬度大且崩解快，适合作为CVB－D舌下片的填充剂；而可溶性淀粉＋MCC制得的片剂成型性不好，有松片、裂片现象，且脆碎度过大，不适合作为CVB－D舌下片的填充剂；以甘露醇＋MCC为复合填充剂的舌下片压片中有黏冲现象，且崩解时限＞5min，不宜作CVB－D舌下片的填充剂。

2.4.4 崩解剂种类及用量的筛选 CMS－Na和LHPC均为性能优良的常用崩解剂。CMS－Na对CVB－D含量测定有干扰（见2.3.2项实验结果），故选择L－HPC为本品崩解剂。固定主药、黏合剂HPMC的用量，固定压片压力和片重，改变崩解剂L－HPC的用量，以乳糖和MCC复合填充剂调节片重，制备不同崩解剂用量的CVB－D舌下片。以颗粒的流动性、舌下片的脆碎度和崩解时间为指标来筛选崩解剂的用量（见表4）。结果表明，L－HPC的用量对颗粒的良好流动性影响不大，对片剂的硬度有一定影响，随着L－HPC用量的增加，片剂强度有所增加；L－HPC的用量对CVB－D舌下片的崩解能力有影响，L－HPC的用量增加至3%时，崩解时间明显缩短，用量进一步增加，崩解时间无明显变化，故L－HPC的用量以3%为佳。

表4 CVB－D舌下片崩解剂用量筛选结果

2.4.5 黏合剂种类的筛选 对常用黏合剂10%淀粉浆和3%HPMC溶液进行了筛选。固定主药、填充剂乳糖＋MCC和崩解剂L－HPC的用量，分别以10%淀粉浆和3%HPMC溶液为黏合剂，固定压片压力和片重，制备CVB－D舌下片。以颗粒的流动性、舌下片的脆碎度和崩解时间为指标来筛选崩解剂的用量（见表5）。结果表明，两种黏合剂对颗粒的流动性影响均不大，所制片子均有快速崩解的能力，但对片剂硬度有影响，10%的淀粉浆所制片剂硬度＞3%HPMC溶液所制片剂。

2.4.6 润滑剂的筛选 2.4.3项各配方所制得的干颗粒休止角皆＜30°，流动性良好，压片过程中无黏冲、片重差异超限等现象，故处方设计中不需额外加入润滑剂。

表5 CVB－D舌下片黏合剂种类筛选结果

2.4.7 较优处方的确定 根据处方组成单因素实验筛选结果，可得到4个较优的CVB－D舌下片处方组成，结果如下：

2.4.8 最优处方的确定 上述4个CVB－D舌下片较优处方组成均具有良好的压缩成型性和快速的崩解性能，所制环维黄杨星D舌下片均具有合格的硬度、脆碎度，均能在45s内迅速崩解。基于环维黄杨星D为孕甾烷类难溶性药物［8］，片剂的迅速崩解并不一定代表药物的溶出迅速，药物的制剂处方组成会影响药物的溶出度好坏［9］，故以药物体外溶出度为指标，在4个较优处方基础上优选CVB－D的最佳处方组成。按以上4个处方组成称取药物和辅料，按2.4.2项下方法制备舌下片，按2.2项下方法进行体外溶出度实验（见表6）。结果表明，2号处方压制的CVB－D舌下片体外溶出度最好，更能使药物从制剂中迅速溶出和吸收而发挥速效的作用，故2号处方为CVB－D舌下片的最佳处方，即CVB－D 0.1g、乳糖5.6g、微晶纤维素4g、L－HPC 0.3g、10%淀粉浆适量，共制100片。

3 讨论

3.1 CVB－D舌下片中微晶纤维素用量问题

微晶纤维素是一种优良的辅料，具有极好的流动性和压缩成型性，当其用量达到20%以上具有加速崩解的作用，研究［10］表明，微晶纤维素的用量＞45%时，崩解时间呈逐渐增大的趋势，因此用量＜45%较为合适。固定主药、崩解剂L－HPC和黏合剂HPMC的用量，分别加入用量20%、30%、40%、50%的微晶纤维素，与乳糖混合，调节乳糖重量保持片重固定，固定压片压力，制备不同微晶纤维素用量的CVB－D舌下片。以崩解时间为指标来确定微晶纤维素的用量（见表7）。结果表明，随着微晶纤维素用量增加，片子崩解时间缩短，用量为40%时崩解效果最佳，故确定本品微晶纤维素用量宜为40%。

3.2 微晶纤维素与L－HPC具有协同崩解作用

舌下片中崩解剂的选用是舌下片处方设计的关键之一，应采用崩解能力强的崩解剂促使舌下片尽快崩解，为药物的快速溶出打下基础。实验研究发现微晶纤维素与低取代羟丙基纤维素有相互协同作用，二者联合使用，可加快片剂的崩解（见表8）。这种协同作用可能是因为微晶纤维素结构中有大量羟基，压缩时可使粒子间以氢键结合，遇水时由于自身的多孔性能迅速吸收水份，粒子间的氢键在水中断裂，从而加速片剂的崩解。而低取代羟丙基纤维素具有很大的表面积和孔隙度，能快速吸收水分且遇水膨胀度大，二者协同作用，可使舌下片达到快速崩解的效果。

表6 四个较优处方所制CVB－D舌下片体外溶出度结果

表7 微晶纤维素用量和崩解作用的关系

表8 MCC和L－HPC协同崩解作用结果

3.3 CVB－D舌下片的最优处方组成

舌下片为速效制剂，一方面是因为舌下黏膜薄且未角化，其下的毛细血管丰富，药物转运障碍小，吸收迅速，且无肝脏首过效应；另一方面则需要药物能迅速地从制剂中释放溶解出来。环维黄杨星D为难溶物，为保证其从舌下片中能迅速释放，处方设计的关键在于促进片剂尽快崩解，并且崩解后获得细粒子，以得到较大的溶出面积。此外，处方中的辅料与水接触后不能影响药物的溶出。4个较优处方比较可见，以3%HPMC为黏合剂制备的舌下片体外溶出度差于以10%淀粉浆制备的舌下片，可能原因在于HPMC遇水后的黏度强于淀粉，且可能形成凝胶屏障阻碍药物扩散溶出；以预胶化淀粉为填充剂制备的舌下片溶出度差于以乳糖为填充剂制备的舌下片，可能原因在于预胶化淀粉在水中的溶解度有限，未溶解的部分发挥了类似骨架的作用，延长了药物扩散的距离，从而减缓了药物的溶出，而乳糖水溶性较好，与水接触后溶解到水中，对药物的溶出阻碍小。

［1］国家药典编委会.中华人民共和国药典：一部［S］.北京：中国医药科技出版社，2010：1066.

［2］金玉婷，狄斌，高署，等.环维黄杨星D含量测定法改进研究［J］.中国药品标准，2013，14（3）：191.

［3］章蕴毅，王锦平，李佩芬，等.黄杨宁改进片增加动物冠脉流量和抗心律失常作用［J］.中国临床药学杂志，2001，10（5）：310－313.

［4］陈俊.花生四烯酸与环维黄杨星D防治心肌缺血的研究［D］.武汉：武汉大学，2005.

［5］谷福根，高永良，崔福德.前列腺素E1－羟丙基－β－环糊精包合物舌下片的制备及其体外质量评价［J］.中国新药杂志，2011，20（15）：1463.

［6］包强，刘效栓，李喜香，等.中药固体速释制剂及其工艺设计研究进展［J］.中国药房，2013，24（43）：4108.

［7］谢沐风.溶出曲线相似性的评价方法［J］.中国医药工业杂志，2009，40（4）：308－310.

［8］徐立华，马永婷，邢精红，等.聚乙二醇化环维黄杨星 D对大鼠长期给药肝、肾毒性研究［J］.中国中医药信息杂志，2011，18（5）：36.

［9］胡昌勤，潘瑞雪.溶出度试验评价／预测固体口服制剂生物等效性的研究进展［J］.中国新药杂志，2014，23（1）：44－51.

［10］赵弘泰.直接压片法制备预混辅料的研制［D］.石家庄：河北医科大学，2007.