复方健胃颗粒质量标准的研究

高会芹 马力军

（神威药业集团有限公司，河北 石家庄 051430）

复方健胃颗粒质量标准的研究

高会芹 马力军

（神威药业集团有限公司，河北 石家庄 051430）

目的 建立复方健胃颗粒的质量标准。方法 采用薄层色谱法对制剂中的厚朴、黄柏、陈皮进行定性鉴别，采用高效液相色谱法测定制剂中的盐酸小檗碱。结果 薄层图谱清晰，阴性对照无干扰，盐酸小檗碱进样量在0.4284～2.1420 μg范围内线性关系良好（r=0.999 8）。结论 本方法简便、重现性好，可有效控制制剂的质量。

复方健胃颗粒；质量标准，盐酸小檗碱

复方健胃颗粒是由黄柏、厚朴、陈皮、苍术等经现代制剂技术制备的中药新制剂，其处方为临床验方，具有健胃消食、清热利湿的功效，主要用于治疗消化不良、腹泻，为有效控制该制剂的质量，满足临床应用的要求，笔者对其质量控制方法进行了研究，黄柏为方中君药，主要含盐酸小檗碱等成分，其含量测定文献[1-2]报道较多，因此测定制剂中盐酸小檗碱的含量。

1 仪器与试药

LC-2010A型高效液相色谱仪（日本岛津CLASS-VP工作站）；AB135-S电子天平（瑞士梅特勒-托利多公司）；UV1100 型紫外分光光度计（上海天美科学仪器有限公司）；KQ-250型超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）；盐酸小檗碱对照品（批号：110713-200911）、厚朴酚对照品（批号110729-200412）、和厚朴酚对照品（批号：110730-200609）、橙皮苷对照品（批号：110721-2010142）均购自中国药品生物制品鉴定所，复方健胃颗粒（自制，批号：20120601、20120602、20120603），乙腈、磷酸均为色谱纯，水为双蒸水，其余试剂均为分析纯。

2 鉴 别

2.1 厚朴的鉴别

取本品5 g（批号：20120601），研细，加乙醚30 mL，超声处理15 min，滤过，滤渣备用，滤液用2%氢氧化钠溶液振摇提取2次，每次20 mL，合并氢氧化钠溶液，加盐酸调pH 1～2，酸水液加三氯甲烷振摇提取2次，每次20 mL，合并三氯甲烷液，水浴蒸干，残渣加乙酸乙酯1 mL使溶解，作为供试品溶液。另取厚朴酚、和厚朴酚对照品适量，加甲醇分别制成每1 mL各含1.0 mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法试验，吸取上述3种溶液各5 μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚（60～90 ℃）-乙酸乙酯-甲酸（17∶3∶0.5）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以香草醛硫酸试液，在105 ℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

2.2 陈皮的鉴别

取【厚朴的鉴别】项下的滤渣，挥干残余乙醚，加2%氢氧化钠溶液30 mL，超声处理30 min，离心，上清液加盐酸调pH 1～2，酸水液加乙酸乙酯振摇提取2次，每次20 mL，合并乙酸乙酯液，置水浴上浓缩至约1 mL，作为供试品溶液。另取橙皮苷对照品适量，加甲醇制成每1 mL含1.0 mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各1 μL，分别点于同一聚酰胺薄膜上，以三氯甲烷-丙酮-甲醇（5∶1∶1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以三氯化铝试液，热风吹干，置紫外光灯（365 nm）下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。

2.3 黄柏的鉴别

取本品5 g（批号：20120601），研细，加甲醇30 mL，超声处理30 min，滤过，滤液水浴蒸干，残渣加水10 mL使溶解，加盐酸1 mL，酸水液加三氯甲烷振摇提取2次，每次20 mL，合并三氯甲烷液，置水浴上浓缩至约1 mL，作为供试品溶液。另取盐酸小檗碱对照品适量，加甲醇制成每1 mL含1.0 mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法，吸取上述两种溶液各5 μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-丁酮-甲酸-水（10∶6 ∶1∶1）为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（365 nm）下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。

3 含量测定

3.1 色谱条件与系统适用性试验

色谱柱：Kromasil ODS- C18（4.6 mm×150 mm，5 μm）；流动相：乙腈-0.1%磷酸溶液（24∶76）；柱温：30 ℃，检测波长：265 nm。理论板数按盐酸小檗碱峰计算应不低于5000。

3.2 溶液的制备及干扰性试验

对照品溶液的制备：取盐酸小檗碱对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1 mL含90.5 μg的溶液，即得。

供试品溶液的制备：取本品，研细，取约2 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50 mL，密塞，称定重量，超声处理（功率250 W，频率50 kHz）30 min，放冷，再称定重量，以甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

阴性供试品溶液的制备：按处方比例，不加黄柏药材，制得阴性样品，再按上述供试品处理方式制备阴性样品溶液，测定，结果在相应峰位处无吸收，说明无阴性干扰。见图1。

3.3 线性关系考察

精密称取盐酸小檗碱对照品适量，加甲醇制成每1 mL含214.2 μg的溶液，分别精密量取1、2、3、4、5 mL，分别置5 mL量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，进样10 μL，测定，以对照品的量（μg）为横坐标（x），峰面积积分值为纵坐标（y），绘制标准曲线，得回归方程：y=321 0477x-15427（r=0.9998），盐酸小檗碱进样量在0.4284～2.1420 μg范围内与峰面积积分值线性关系良好。

图1 复方健胃颗粒HPLC

3.4 精密度试验

吸取盐酸小檗碱对照品溶液（90.5 μg/mL）10 μL，注入液相色谱仪，连续测定6次，结果盐酸小檗碱RSD=0.75%，表明仪器精密度良好。

3.5 稳定性试验

取本品（批号20120601），研细，取约2 g，精密称定，按供试品液的制备方法制备供试品溶液，分别于0、2、4、6、8、10 h测定样品的峰面积积分值，结果RSD=0.70%，表明本品供试品溶液在10 h内具有良好的稳定性。

3.6 重复性试验

取本品（批号20120601），研细，取约2 g，精密称定，各取6份，按供试品溶液的制备方法制备供试品溶液，进液相色谱仪，测定，结果盐酸小檗碱含量平均值为2.4547 mg/g，RSD=1.00%，表明本含量测定方法重复性较好。

3.7 加样回收试验

取本品（批号20120601）6份（盐酸小檗碱含量为2.4547 mg/g），研细，每份各取约1 g，精密称定，分别精密加入盐酸小檗碱对照品甲醇液（盐酸小檗碱含量为0.05126 mg/mL）各50 mL，按供试品溶液的制备方法制备供试品溶液，测定，计算回收率，结果见表1。结果表明，平均回收率为98.48%，RSD=0.81%，说明本测定方法可行。见表1。

表1 加样回收试验结果表

3.8 含量测定

取本品3批样品按供试品溶液制备法制得供试品溶液，进液相色谱仪，测定，每批样品测定3份，结果见表2。

表2 样品含量测定结果（n=3）

4 讨 论

4.1 在厚朴的薄层鉴别试验时，曾尝试用乙醚超声样品制备供试品溶液，结果色带较深，阳性结果不明显，尝试以甲苯-甲醇（17∶1）、甲苯-乙酸乙酯（9∶1.5）为展开剂，结果供试品色谱中斑点分离度差，阳性结果不明显。

4.2 在黄柏的薄层鉴别试验时，因小檗碱为季铵碱，其盐酸盐难溶于水，而其他大部分生物碱在酸性环境下可以成盐溶于水，利用小檗碱和其他生物碱在酸性溶液中的溶解度不同可以将其分离。

4.3 在陈皮的薄层鉴别试验时，曾考察药典药材项下系统[3]，以乙酸乙酯-甲醇-水（100∶17∶13）为展开剂，展至约3 cm，取出，晾干，再以甲苯-乙酸乙酯-甲酸-水（20∶10∶1∶1）的上层溶液为展开剂，展至约8 cm，结果斑点不圆整且操作繁琐。

4.4 在制剂含量测定时，曾考察以甲醇-水不同比例（78∶22）、（75∶25）、（70∶30）为流动相，结果盐酸小檗碱的分离度及峰型较差；曾考察以乙腈-水不同比例（30∶70）、（25∶75）为流动相，结果盐酸小檗碱峰型较差；最后以乙腈-0.1%磷酸（24∶76）为流动相，结果保留时间适宜，分离度及峰型好。

[1] 孙毅坤,翟颖,陈旭,等.高效液相色谱法测定妇炎平胶囊中盐酸小檗碱含量[J].中华中医药杂志,2008,23(11):1028-1029.

[2] 蔡俊安.高效液相色谱法测定二妙丸中盐酸小檗碱的含量[J].中国中医药信息杂志,2011,18(1):55-56.

[3] 国家药典委员会.中国药典.一部[S].北京:中国医药科技出版社,2010:214.

Study on Quality Standard of Fufang Jianwei Particles

GAO Hui-qin1, MA Li-jun1
(Shineway Pharmaceutical Group Limited, Shijiazhuang 051430, China)

Objective To establish the quality standards of the Fufang Jianwei particles. Method using thin layer chromatography to identify magnolia, amur corktree bark, dried tangerine peel of the preparation, using high-performance liquid chromatography method for simultaneous determination of berberine preparations. Result The thin layer map is clear, negative control without interference, and the injection volume of berberine in the range of 0.4282～ 2.1400 μg has a good linear relationship(r=0.999 8). Conclusion The method is simple, reproducible, and can effectively control the quality of the preparation.

Fufang Jianwei particles; Quality standard; Berberine

R283

：B

：1671-8194（2014）06-0048-03