原发性胆汁性肝硬化患者免疫学指标特征分析

张文忠，杨跃杰，崔二平

·短篇论著·

原发性胆汁性肝硬化患者免疫学指标特征分析

张文忠，杨跃杰，崔二平

目的探讨原发性胆汁性肝硬化（PBC）患者外周血T细胞亚群、免疫球蛋白及自身抗体变化情况。方法采用免疫荧光法检测抗线粒体抗体（AMA）、抗核抗体（ANA）和抗平滑肌抗体（SMA）；采用免疫印迹法检测AMA-M2；采用BD FACSCalibur流式细胞仪检测T细胞亚群；采用免疫比浊法测定免疫球蛋白。结果37例PBC患者NK细胞计数比正常人明显减少[（9.57±4.85）%对（21.5±28.60）%，P＜0.05]；PBC患者血IgM水平明显高于正常人[（228.55±49.17）mg/dL对（108.06±64.66）mg/dL，P＜0.05]；在37例PBC患者中，AMA、AMA-M2、ANA、SMA阳性分别为37例（100%）、20例（54.05%）、29例（78.37%）和10例（27.02%）结论PBC患者免疫学指标异常表现在自然杀伤细胞减少，免疫球蛋白M升高。

原发性胆汁性肝硬化；T细胞亚群；免疫球蛋白

原发性胆汁性肝硬化(primary biliary cirrhosis，PBC）病因未明，以肝内中小胆管进行性、非化脓性炎症为特征的慢性胆汁淤积性疾病。多见于中年女性，男：女=1:9。本病的家族聚集倾向明显，尤其是女性亲属更易受累[1]，遗传易感性、免疫系统以及环境因素与PBC的发病有关。该病血清抗线粒体抗体（antimitochondrial antibody，AMA）阳性，尤其是M2亚型（AMA-M2）阳性的特异性高，为本病最突出的免疫学诊断指标。抗核抗体（ANA）和抗平滑肌抗体（SMA）也可以阳性[2]，其特异性的病理学过程是进行性胆管破坏[3]。血清碱性磷酸酶（ALP）和γ-谷氨酰转肽酶（γ-GT）升高为本病突出的生化异常，早期PBC患者血清胆红素水平无明显改变。随着病程进展，胆红素（主要是直接胆红素）水平逐步升高。血清胆汁酸水平反映胆汁淤积的敏感性高于血清胆红素。70%～80%患者血清IgM升高，IgG和IgA正常或轻度升高，补体水平一般正常[4]。熊去氧胆酸（UDCA）治疗可以延缓早期PBC的进展，终末期PBC患者行肝移植治疗可延缓生命。近年来，我国PBC的总体发病率呈上升趋势。现对我院近4年来诊断的37例PBC患者进行回顾性分析，为临床诊治提供有价值的信息。

1 资料与方法

1.1 研究对象选取2010年1月至2012年12月我院住院的PBC患者37例，男性9例，女性28例；年龄36～75岁，平均年龄（53.6±12.6）岁。病程1月～9年，平均19.6月。诊断标准参照美国肝病学会（AASLD）2000年版PBC诊断指导建议：（1）碱性磷酸酶（ALP）等反映胆汁淤积的生化指标升高；（2）影像学检查示胆管正常；（3）血清AMA或AMA-M2亚型阳性；（4）对AMA及AMA-M2阴性者，肝组织病理学检查符合PBC改变。所有病例发病前无静脉药瘾、酗酒、应用肝损害药物及输血史。排除甲型肝炎、乙型肝炎、丙型肝炎，丁型肝炎、戊型肝炎。排除EB病毒、巨细胞病毒感染。另选我院健康体检者37例作为对照，男性10例，女性27例；年龄25～60岁，平均年龄（50.3±9.97）岁。

1.2 检测使用HITACHI7600全自动生化分析仪检测血生化指标；采用免疫荧光法检测AMA、ANA和SMA[欧蒙（北京）医学诊断技术有限公司]；采用免疫印迹法检测AMA-M2亚型[欧蒙（北京）医学诊断技术有限公司]；采用BD FACSCalibur流式细胞仪检测T细胞亚群（北京东迅天地医疗仪器有限公司）；采用免疫比浊法测定免疫球蛋白（山东潍坊三维生物工程团体有限公司）。

1.3 肝活检常规行肝组织病理学检查。病理学诊断为累及肝内细小胆管的慢性非化脓性的胆管炎，病理学表现分为4期：I期，汇管区小叶间胆管炎；Ⅱ期，汇管区小叶问胆管消失，汇管区周边细小胆管增生，同时伴有炎症细胞浸润；Ⅲ期，肝组织纤维化变形；IV期：存在再生结节的肝硬化。

1.4 统计学处理应用SPSS17.0统计软件包进行数据分析，计量资料以（±s）表示，采用t检验，计数资料以率表示，采用x2检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 PBC患者免疫细胞计数的变化与正常人比，PBC患者NK细胞明显减低（P＜0.05，表1）。

2.2 PBC患者免疫球蛋白水平的变化与正常人比，PBC患者IgM水平明显升高（P＜0.05，表2）。

2.3 PBC患者自身抗体阳性情况在本组37例PBC患者中，AMA、AMA-M2、ANA、SMA阳性分别为37例（100%）、20例（54.05%）、29例（78.37%）和10例（27.02%）。

表1 PBC患者与正常人外周血T细胞计数（%，±s）比较

表1 PBC患者与正常人外周血T细胞计数（%，±s）比较

①P＜0.05

PBC例数37 CD4+CD8+CD4+/CD8+NK细胞43.14±10.5430.77±4.721.40±2.239.57±4.85①对照组37 t 39.43±9.8131.08±4.281.26±2.2921.5±28.60 1.5670.2960.2662.502 P＞0.05＞0.05＞0.05＜0.05

表2 PBC患者与正常人免疫球蛋白水平（mg/dL，±s）的比较

表2 PBC患者与正常人免疫球蛋白水平（mg/dL，±s）的比较

①P＜0.05

IgMIgGIgA PBC228.55±49.17①297.98±48.18127.43±60.16对照组108.06±64.66289.44±34.79112.23±59.10 t 9.0230.8741.096 P＜0.05＞0.05＞0.05

3 讨论

PBC多见于中年女性，是一种慢性进行性、有一定遗传易感性的疾病，病理学特征为累及肝内细小胆管的慢性非化脓性胆管炎，胆管上皮细胞凋亡。

自然杀伤细胞（NK细胞）从骨髓中衍生，其发育成熟依赖于骨髓的微环境。实验表明，胸腺细胞可诱导出NK细胞。脾脏可促进NK细胞的分化。NK细胞主要分布于外周血中，淋巴结和骨髓中也有NK活性。NK细胞是机体重要的免疫细胞，与抗肿瘤、抗病毒感染和免疫调节有关，但在某些情况下参与超敏反应和自身免疫性疾病的发生。NK细胞在PBC患者中的作用，目前无相关文献说明，需进一步观察。本文资料显示PBC患者NK细胞较对照组减少，差异有统计学意义，考虑NK细胞水平下降，导致细菌、病毒特异性感染，参与PBC的发生[5～7]。

IgM是初次体液免疫应答中最早出现的抗体，参与机体早期抗感染免疫。血清某种特异性IgM型抗体阳性提示新近发生感染，可用于感染的早期诊断。在感染过程中，IgM首先出现，但持续时间不长。因此，可以认为IgM升高提示患者持续存在感染。免疫球蛋白IgM升高是PBC的一个特点。王兆彬[8]报道86例PBC患者血清IgA和IgG正常，但48%患者IgM水平明显升高，平均为（3.6±2.4）g/L。张嫣[9]认为PBC患者存在先天性免疫系统紊乱，在肝脏损害的发生和发展上起着重要的作用,特征性表现包括对细菌抗原应答的血清IgM水平升高、上皮性肉芽肿的形成、细胞因子应答水平的升高、NK细胞及单核细胞对病原体相关分子应答提高等。本资料显示PBC患者IgM水平升高，与相关报道一致，提示PBC患者体液免疫功能异常。

血清AMA阳性为诊断PBC的基本条件，具有高度的特异性，是最重要的诊断手段，其中M2、M4、M8、M9亚型与PBC密切相关，且M2抗原只在肝脏的胆管上皮表达，在肝细胞不表达，故M2对PBC的诊断最具特异性，AMA-M2诊断PBC的敏感性为98%，特异性为96%[10]。王仲霞[11]报道61例PBC患者中73.8%AMA和（或）AMA-M2亚型阳性，而57.4%患者ANA阳性。查翔远[12]报道23例PBC患者中19例（82.6%）血清AMA及其M2亚型阳性，14例（60.9%）ANA阳性。本资料显示在37例PBC患者中，AMA阳性患者37例（100%），AMA-M2阳性20例（50.05%），ANA阳性29例（78.37%）。PBC患者免疫学指标异常表现为自然杀伤细胞减少，免疫球蛋白M升高、及AMA、AMA-M2、ANA阳性，其自然杀伤细胞减少的原因需进一步探讨。

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（收稿：2014-04-08）

（校对：陈宗炳）

Peripheral T lymphocyte subsets and serum IgM levels in patients with primary biliary cirrhosis

Zhang Wenzhong，Yang Yuejie，Cui Erping.ICU，Sixth People’s Hospital，Zhengzhou 450000，China

Primary biliary cirrhosis；T lymphocyte subsets；IgM

10.3969/j.issn.1672-5069.2014.05.024

450000郑州市第六人民医院重症医学科

张文忠，男，48岁，医学硕士，主治医师。研究方向：重症肝病的诊治研究。E-mail：hnzwz@163.com