乙虫腈中间体5-氨基-3-氰基-4-乙硫基-1-(2,6-二氯-4-三氟甲基苯基)吡唑的液相色谱分析

刁艳萍，王崇磊

（连云港死海溴化物有限公司，江苏 连云港 222002）

乙虫腈中间体5-氨基-3-氰基-4-乙硫基-1-(2,6-二氯-4-三氟甲基苯基)吡唑的液相色谱分析

刁艳萍，王崇磊

（连云港死海溴化物有限公司，江苏 连云港 222002）

5-氨基-3-氰基-4-乙硫基-1-（2,6-二氯-4-三氟甲基苯基）吡唑是杀虫剂乙虫腈的重要中间体。采用液相色谱法对其含量分析方法进行了研究。采用甲醇和水为流动相，选用Hypersil C18色谱柱，紫外检测器进行分析。结果显示标准偏差为0.38，变异系数0.40%，回收率为99.5%，线性相关系数为0.999。在建立的分析条件下，测定5-氨基-3-氰基-4-乙硫基-1-（2,6-二氯-4-三氟甲基苯基）吡唑的有效成分的方法具有较好的线性、精密度和准确度，是较理想的分析方法，完全能够满足工业化对5-氨基-3-氰基-4-乙硫基-1-（2,6-二氯-4-三氟甲基苯基）吡唑的质量控制。

5-氨基-3-氰基-4-乙硫基-1-（2,6-二氯-4-三氟甲基苯基）吡唑；液相色谱；分析

前言

5-氨基-3-氰基-4-乙硫基-1-（2,6-二氯-4-三氟甲基苯基） 吡唑，英文名称：5-amino-3-cyano-4-ethylthio-1-（2,6-dichloro-4-trifluoromethylphenyl）-pyrazole，结构式：

5-氨基-3-氰基-4-乙硫基-1-（2,6-二氯-4-三氟甲基苯基）吡唑是杀虫剂乙虫腈合成的重要中间体。乙虫腈（Ethiprole）是由罗纳普朗克发现、拜耳公司开发的杀虫、杀螨剂，属于第二代作用于GABA的杀虫剂，低用量下对多种咀嚼式和刺吸式害虫有效，可用于种子处理和叶面喷雾，持效期长达21～28d。有关5-氨基-3-氰基-4-乙硫基-1-（2,6-二氯-4-三氟甲基苯基）吡唑的分析，目前尚未见公开的报道，本文采用液相色谱法，对其分析方法进行了研究。

1 实验部分

1.1 主要原料与试剂

甲醇，色谱纯，上海化学试剂总厂；5-氨基-3-氰基-4-乙硫基-1-（2,6-二氯-4-三氟甲基苯基）吡唑标准品（纯度99%），以色列进口；5-氨基-3-氰基-4-乙硫基-1-（2,6-二氯-4-三氟甲基苯基）吡唑（湖南化工院）；2次蒸馏水，自制。

1.2 仪器与设备

液相色谱仪 Agilent 1100,安捷伦公司；泵0491-0131；2487检测器；电子天平，上海天平仪器厂；NZ010双通道色谱工作站；浙江化工研究院赛智科技有限公司；超声波振动仪。

1.3 色谱操作条件

色谱柱：200mm×4.6mm（i.d）5.0μm不锈钢柱；柱填充物：C18Hypersil；流动相：甲醇+水=70+30（V/V）；滤膜孔径约0.45μm，经过滤器过滤，超声脱气；流动相流速：1.0mL/min；柱温：室温（变化应在2℃以内）；检测器波长：254nm；进样体积20μL；保留时间：5-氨基-3-氰基-4-乙硫基-1-（2,6-二氯-4-三氟甲基苯基）吡唑约7.0min。

1.4 溶液的配制

1.4.1 标样溶液的配制

称取5-氨基-3-氰基-4-乙硫基-1-（2,6-二氯-4-三氟甲基苯基）吡唑标样0.1g（精确至0.0002g），置于50mL容量瓶中，加甲醇30mL,超声波震荡1min，用甲醇定容至刻度，摇匀后用移液管吸取1.0mL于25mL容量瓶中，用流动相定容至刻度，摇匀备用。

1.4.2 试样溶液的配制

称取含5-氨基-3-氰基-4-乙硫基-1-（2,6-二氯-4-三氟甲基苯基）吡唑0.1g试样（精确至0.0002g），置于50mL容量瓶中，加甲醇30mL,超声波震荡1min，用甲醇定容至刻度，摇匀后用同一移液管吸取1.0mL于25mL容量瓶中，用流动相定容至刻度，摇匀备用。

1.5 测定

在上述操作条件下，待仪器基线稳定后连续注入数针标样溶液，计算各针相对响应值，待相邻2针的相对响应值变化小于1.5%，按照标样溶液、试样溶液、试样溶液、标样溶液的顺序进行测定。5-氨基-3-氰基-4-乙硫基-1-（2,6-二氯-4-三氟甲基苯基）吡唑的色谱图见图1。

1.6 计算

将测得的2针试样溶液及试样前后2针标样溶液中2-氯-6-巯基苯甲酸峰面积分别进行平均。试样中5-氨基-3-氰基-4-乙硫基-1-（2,6-二氯-4-三氟甲基苯基）吡唑质量分数X%。

A1-2针标样溶液中5-氨基-3-氰基-4-乙硫基-1-（2,6-二氯-4-三氟甲基苯基）吡唑面积的平均值；

A2-2针试样溶液中5-氨基-3-氰基-4-乙硫基-1-（2,6-二氯-4-三氟甲基苯基）吡唑峰面积的平均值；

m1-标样的质量，g；

m2-试样的质量，g；

P-5-氨基-3-氰基-4-乙硫基-1-（2,6-二氯-4-三氟甲基苯基）吡唑标样的质量分数，%。

图1 5-氨基-3-氰基-4-乙硫基-1-（2,6-二氯-4-三氟甲基苯基）吡唑的液相色谱图Fig.1 The liquid chromatogram of 5-amino-3-cyano-4-ethylthio-1-（2,6-dichloro-4-trifluoromethylphenyl）pyrazole

2 结果与讨论

2.1 流动相的选择

使用甲醇、乙腈和水的不同配比的流动相，进行分离，发现使用甲醇+水=70+30（V/V）配比的流动相，5-氨基-3-氰基-4-乙硫基-1-（2,6-二氯-4-三氟甲基苯基）吡唑能很好的分离，且保留时间较合适。

2.2 检测波长的选择

5-氨基-3-氰基-4-乙硫基-1-（2,6-二氯-4-三氟甲基苯基）吡唑在低波长下有较好的吸收。在280、254、230nm三个波长下进样。发现在254nm下试样的灵敏度较好，且试剂干扰小。因此采用254nm为检测波长。

2.3 方法的线性关系

在一定质量范围内，称取数个5-氨基-3-氰基-4-乙硫基-1-（2,6-二氯-4-三氟甲基苯基）吡唑标样，分别于50mL容量瓶内，流动相溶解并定容，摇匀。按标准操作条件进样分析，得到响应值数据，做线性方程为：Y=103.53X+0.0085,相关系数0.9999。5-氨基-3-氰基-4-乙硫基-1-（2,6-二氯-4-三氟甲基苯基）吡唑浓度在0～0.024g/50mL范围内线性良好。

2.4 精密度的测定

按上述处理方法，同样的仪器操作条件，称取同一样品，进行8次平行测定，计算标准偏差和变异系数。标准偏差为0.38，变异系数为0.40%。

表1 方法的精确度试验Table 1 The precision test and results of this method

2.5 准确度试验

2.5.1 回收率计算方法

2.5.2 回收率测定

称取5份不同质量的样品，分别加入一定的5-氨基-3-氰基-4-乙硫基-1-（2,6-二氯-4-三氟甲基苯基）吡唑标准品，按上述处理方法，同样的仪器操作条件，进行回收率的测定，5-氨基-3-氰基-4-乙硫基-1-（2,6-二氯-4-三氟甲基苯基）吡唑的平均回收率为99.5%。

表2 方法的准确度试验Table 2 The accuracy test and results of this method

3 结 论

5-氨基-3-氰基-4-乙硫基-1-（2,6-二氯-4-三氟甲基苯基）吡唑是杀虫剂乙虫腈合成的重要中间体。在本文建立的分析条件下，测定5-氨基-3-氰基-4-乙硫基-1-（2,6-二氯-4-三氟甲基苯基）吡唑的有效成分的方法具有较好的线性。精密度和准确度，是较理想的分析方法。

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［4］森德尔L R，柯克兰 J J，格莱吉克 J L.实用高效液相色谱法的建立［M］.张玉奎等，译.北京：华文出版社，2001.

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［6］周易.关于回收率的计算公式［J］.分析化学,1985,13（10）：82.

Analysis of 5-Amino-3-Cyano-4-Ethylthio-1-（2,6-Dichloro-4-Trifluoromethylphenyl）Pyrazole by HPLC which is an Intermediate for Ethiprole

DIAO Yan-ping and WANG Chong-lei
（Lianyungang Dead Sea Bromine Compounds Co.,Ltd.,Lianyungang 222002,China）

5-amino-3-cyano-4-ethylthio-1-（2,6-dichloro-4-trifluoromethylphenyl）pyrazole is a kind of important intermediate for ethiprole which is used as pesticide.The HPLC method used for analyzing the content of 5-amino-3-cyano-4-ethylthio-1-（2,6-dichloro-4-trifluoromethylphenyl）pyrazole is studied.The methanol and water is used as mobile phase,the Hypersil C18chromatographic column and ultraviolet detector is chosen to carry out the analysis.The standard deviation,variable coefficient,recovery rate and linearly dependent coefficient are 0.38, 0.40%,99.5%and 0.9999 respectively.The linearity,accuracy and the precision of this method is better for analyzing the content of 5-amino-3-cyano-4-ethylthio-1-（2,6-dichloro-4-trifluoromethylphenyl）pyrazole under the certain conditions.It is an ideal analytical method for thoroughly meeting the demand of industrial quality control for 5-amino-3-cyano-4-ethylthio-1-（2,6-dichloro-4-trifluoromethylphenyl）-pyrazole.

5-Amino-3-cyano-4-ethylthio-1-（2,6-dichloro-4-trifluoromethylphenyl）pyrazole;HPLC;analysis.

TQ459

A

1001-0017（2014）03-0194-03

2014-02-17

刁艳萍(1972-),女，陕西三原人，高级工程师，主要从事农药生产和质量管理工作。