微量白蛋白联合β2-微球蛋白和血清光抑素在糖尿病肾病早期诊断中的应用

王卫

（眉山市人民医院检验科，四川眉山 620010）

微量白蛋白联合β2-微球蛋白和血清光抑素在糖尿病肾病早期诊断中的应用

王卫

（眉山市人民医院检验科，四川眉山 620010）

目的探讨尿微量白蛋白(mAlb)联合血清β2-微球蛋白(β2-MG)和血清胱抑素(Cys-C)在糖尿病肾病(DN)早期诊断中的应用。方法根据尿蛋白排出率随机选择35例微量尿蛋白排出糖尿病患者(A组)和35例大量尿蛋白排出糖尿病患者(B组)以及36例健康者作为对照组。比较各组间患者mAlb、β2-MG及Cys-C水平的差异，分析mAlb、β2-MG和Cys-C与DN发病风险的关联性以及三者联合检测DN的准确性。结果A组和B组mAlb、β2-MG、Cys-C水平均显著高于对照组(P＜0.05)；B组mAlb、β2-MG、Cys-C水平均显著高于A组(P＜0.05)；mAlb、β2-MG、Cys-C与DN发病风险的关联系数分别为2.92、2.75、2.60，三者与DN发病的危险性均存在显著正相关(P＜0.05)；mAlb、β2-MG、Cys-C三者联合检测灵敏度、特异性和诊断符合率分别达到94.45%、94.64%和93.17%，显著高于三者单独检测和三者两两结合的值(P＜0.05)；而假阳性率和假阴性率仅为5.36%和5.55%，均显著低于三者单独和三者两两结合检测的值(P＜0.05)。结论mAlb、β2-MG和Cys-C与糖尿病患者肾功能损失存在显著相关性，三者联合检测对DN患者早期诊断具有较高的准确性，可作为DN早期预测的重要指标之一。

糖尿病肾病；早期诊断；微量白蛋白；β2-微球蛋白；血清胱抑素

糖尿病肾病(Diabetic nephmpathy，DN)是糖尿病的一种严重并发症，是糖尿病的重要致死、致残原因之一[1]。DN起病较为隐匿，在早期糖尿病阶段就可出现肾脏病理改变，当出现临床蛋白尿时肾损害已进入不可逆阶段，因此，早期诊断对于稳定和改善DN患者临床症状具有重大的意义[2]。以往临床上常采用尿素氮、肌酐等对DN进行早期诊断，但这均难以判断糖尿病患者早期肾损伤[3]。本文采用尿微量白蛋白(mAlb)、β2-微球蛋白(β2-MG)和血清胱抑素(Cys-C)三者联合对DN患者进行早期诊断，分析三者单独检测和联合检测间的检测灵敏度、特异性和吻合度，探讨三者联合检测在DN早期诊断中的意义，现报道如下：

1 资料与方法

1.1 一般资料选取我院2012年1月至2013年5月收治的70例糖尿病患者，其中男性37例，女性33例，年龄42～79岁，中位年龄（54.82±7.16）岁，病程3～11年，平均（6.41±1.39）年。诊断标准：所有病例均空腹血糖≥7.8 m mol/L，或(和)饭后2 h血糖≥11.1m mol/L，符合WHO糖尿病诊断及分型标准确诊。排除标准：各种原发性肾小球肾炎及各种继发性肾小球肾炎如狼疮性肾炎；高血压肾病，肾淀粉样变，肾盂肾炎，肿瘤，服用过肾毒性药物史的病例等。根据尿蛋白排出率(UAER)将病例分为微量尿蛋白排出组(A组，UAER 20～200 μg/min)和大量尿蛋白排出组(B组，UAER＞200 μg/min)，两组各35例。另设立健康对照组36例。各组在例数、年龄、性别构成、病程等各方面差异无统计学意义，具有可比性(P＞0.05)，见表1。

表1 各组患者间一般资料比较(±s)

表1 各组患者间一般资料比较(±s)

组别例数(例)男/女(例)年龄(岁)病程(年) A组B组对照组P值35 35 36＞0.05 18/17 19/16 19/17＞0.05 55.29±8.24 55.31±7.95 55.27±8.12＞0.05 6.25±1.33 6.28±1.41 6.31±1.25＞0.05

1.2 研究方法采集所有病例和正常对照组晨尿8 ml，离心分离取上清液，采用免疫比浊法，应用日立7600全自动生化分析仪测定尿中mAlb水平。采集患者和正常对照组早晨空腹血4 ml，离心分离血清，采用免疫比浊法，利用日立7600全自动生化分析仪检测血清β2-MG和Cys-C水平。采用本地区正常对照组值做为阳性判定标准：mAlb浓度为9.52 mg/L，β2-MG浓度为1.46 mg/L，Cys C浓度为1.05 mg/L[4]。

1.3 观察指标与评价方法比较各组间mAlb、β2-MG和Cys-C浓度差异；以mAlb、β2-MG和Cys-C水平为应变量，以UAER为自变量，分析三者与DN发病风险的关联性；比较mAlb、Cys-C，β2-MG单独检测和两两结合以及三者联合诊断的灵敏度、特异性、诊断符合率、假阳性率和假阴性率。以灵敏度代表检测的阳性率，灵敏度(%)=真阳性/(真阳性+假阴性)× 100%；以特异性表示无病患者的阴性百分率，特异性(%)=真阴性/(真阴性+假阳性)×100%；以诊断符合率表示诊断情况和现实情况相同的百分率，诊断符合率(%)=(真阳性+真阴性)/(真阳性+假阳性+真阴性+假阴性)×100%；以假阳性表示无病被判有病的百分率，假阳性率(%)=假阳性/(假阳性+真阴性)×100%；以假阴性率代表有病被误判无病的百分率，假阴性率(%)=假阴性/(真阳性+假阴性)×100%。灵敏度、特异性、诊断符合率越高表面诊断准确率越高，假阳性率和假阴性率越低表示诊断越准确[5]。

2 结果

2.1 各组间mAlb、β2-MG和Cys-C水平比较A组和B组mAlb、β2-MG、Cys-C水平均显著高于对照组(P＜0.05)；B组mAlb、β2-MG、Cys-C水平均显著高于A组(P＜0.05)，差异均有统计学意义，见表2。

表2 各组患者间mAlb、β2-MG和Cys-C水平比较(±s，mg/L)

表2 各组患者间mAlb、β2-MG和Cys-C水平比较(±s，mg/L)

注：与对照组比较，aP＜0.05；与A组比较，bP＜0.05。

组别例数(例)mAlb β2-MG Cys-C A组B组对照组35 35 36 35.17±7.21a96.68±14.75ab9.52±1.93 3.11±0.72a6.58±1.02ab1.46±0.57 7.3±2.52a16.22±3.48ab1.05±0.39

2.2 mAlb、β2-MG、Cys-C与DN发病风险的关联性mAlb、β2-MG和Cys-C与DN发病风险的关联系数分别为2.92、2.75和2.60，三者与DN发病的危险性均存在显著正相关(P＜0.05)，见表3。

2.3 mAlb、Cys-C、β2-MG及三者联合预测效果比较mAlb、β2-MG、Cys-C三者联合灵敏度、特异性和诊断符合率分别达到94.45%、94.64%和93.17%，显著高于三者单独检测和三者两两结合的值(P＜0.05)；而假阳性率和假阴性率仅为5.36%和5.55%，均显著低于三者单独和三者两两结合检测的值(P＜0.05)。mAlb、β2-MG和Cys-C三者两两结合检测灵敏度、特异性和诊断符合率，显著高于三者单独检测的值(P＜0.05)；而假阳性率和假阴性率显著低于三者单独检测的值(P＜0.05)，见表4。

表4 两组患者mAlb、Cys-C、β2-MG及三者联合预测效果比较(%)

3 讨论

糖尿病肾病(DN)是肾脏的一种慢性的损害，呈进行性，机体一旦出现蛋白尿则病情往往进行性发展至终末期肾脏病，需要肾脏替代治疗[6]。DN的发病机制较为复杂，长期血糖控制欠佳是导致糖尿病肾损害的重要因素，2型糖尿病患者中有20.5%会演变成DN。研究证实糖尿病的早期肾损伤是可逆的，及时对糖尿病患者肾损害进行早期诊断和治疗，可延长患者生存时间及提高生活质量。因此，糖尿病患者肾损伤的早期诊断具有重要的意义。目前，临床上主要以UAER作为DN分期的依据，但UAER易受血压、运动、月经期、尿路感染及酮体状态等因素影响，且DN患者在早期肾活检发现时组织学已改变，而临床上却无症状，尿常规和普通的肾功能检查仍可正常。因此，需要更为灵敏的检测指标来诊断糖尿病患者肾脏早期的改变[7]。

DN早期主要以尿微量白蛋白(mAlb)为主要特征，mAlb是一种带负电荷的小分子蛋白，正常情况下mAlb很难通过肾小球基底膜，95%的mAlb被重吸收，当肾小球滤过屏障受损时，尿中mAlb率过量超过肾小管的重吸收能力，尿中mAlb含量升高，因此，尿mAlb可作为DN早期预测的重要标志物之一[8]。熊永瑞[8]研究认为检测mAlb水平可作为DN早期损害的一个敏感指标。本文中A组和B组mAlb水平均显著高于对照组，这表明DN患者肾脏损伤程度越高，其mAlb水平越高，mAlb可作为DN早期损害的一个敏感指标，这与熊永瑞[8]研究结果一致。

β2-MG是体内有核细胞包括血小板、淋巴细胞、多形核白细胞产生的一种小分子球蛋白。正常人β2-MG的合成率及从细胞膜上的释放量相当恒定，降解部位在肾脏，易被肾小球滤过而被近端肾小管重吸收，并在肾小管上皮细胞中分解破坏成氨基酸，故而正常情况下β2-MG的排出是微量的。血清β2-MG的升高可反映肾小球滤过功能受损，而尿液中排出β2-MG增高，则提示肾小管损害或滤过负荷增加。其含量的测定不受外界因素的影响，对肾脏损伤的评估更为准确敏感[9]。唐明照等[9]研究认为β2-MG是一个DN早期诊断的准确、敏感、可靠的指标。本文中A组和B组β2-MG水平均显著高于对照组，这表明DN患者肾脏损伤程度越高，其β2-MG水平越高，这表明β2-MG可作为DN早期肾损害的一个敏感指标，这与唐明照等[1]研究结果一致。

Cys-C是一种碱性非糖化蛋白，属于半胱氨酸蛋白酶抑制剂家族成员之一，Cys-C能自由通过肾小球滤过膜并在近曲小管被重吸收和降解，肾小球滤过的Cys-C也不会返回血流中，肾脏是唯一清除循环中Cys-C的器官。因此，血液Cys-C不但是反映肾小球滤过率较为理想的内源性标准物，也是反映糖尿病患者肾功能损伤的一项灵敏指标，在肾小球改变的早期，就能在血液中检测到Cys-C浓度的变化[10]。刘勇等[10]研究发现DN患者早期Cys-C浓度显著高于健康对照者，认为Cys-C浓度是DN早期诊断的重要指标。本研究发现A组和B组Cys-C水平显著高于对照组，肾损伤程度越高，Cys-C水平越高，这表明Cys-C可做为DN早期诊断的指标之一，与刘勇等[10]研究结果一致。

虽然mAlb、β2-MG和Cys-C可作为DN早期诊断的有效指标，但三者单独检测的准确性均不甚理想，本研究结果显示三者单独检测的灵敏度和特异性均未超过90%，而假阳性和假阴性率均超过了10%。近年来，有研究者逐渐采用不同检验指标联合检验的方式对DN患者进行早期诊断，并取得了理想的检测效果。李海新等[11]采用同型半胱氨酸联合Cys-C对DN进行早期诊断，唐明照等联合联合Cys-C、HCY、Hs-CRP、β2-MG以及Cr对DN进行检测，结果检测特异性和灵敏度显著提高。本研究显示mAlb、β2-MG和Cys-C三者联合灵敏度、特异性和诊断符合率分别达到94.45%、94.64%、93.17%，显著高于mAlb、Cys-C、β2-MG三者单独检测和两两联合检测的值；而假阳性率和假阴性率仅为5.36%和5.55%，均显著低于mAlb、β2-MG、Cys-C三者单独检测的值，这表明联合检测有利于提高DN患者早期检测的准确率，这与李福萍等[12]研究结果一致。

综合上述，我们认为mAlb、β2-MG、Cys-C与糖尿病患者肾功能损失存在显著相关性，三者联合检测对DN患者早期诊断具有较高的准确性，可作为DN早期预测的重要指标之一。

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[12]李福萍.尿微量白蛋白、血清β2微球蛋白与胱抑素C在早期糖尿病肾病诊断中的意义[J].中国医师杂志,2013,15(5):702-703.

Application of albumin combined with β2-microglobulin and cysteineproteinase in the early diagnosis of diabetic nephmpathy.

WANG Wei.Department of Clinical Laboratory,People's Hospital of Meishan City,Meishan 620010,Sichuan,CHINA

ObjectiveTo investigate the application of albumin(mAlb)combined with β2-microglobulin (β2-MG)and cysteineproteinase(Cys-C)in the early diagnosis of diabetic nephmpathy(DN).MethodsThe DN patients were divided into the microalbuminuria urinary protein group(group A,n=35),the macroalbuminuria group (group B,n=35)and healthy control group(the control group,n=36),according to the removal rate of urinary protein (UAER).The levels of mAlb,β2-MG and Cys-C between the three groups were compared.The correlation between the levels of mAlb,β2-MG,Cys-C and the risk of DN as well as the detection accuracy of mAlb associated β2-MG and Cys-C were analyzed.ResultsThe levels of mAlb,β2-MG and Cys-C in group A and group B were all significantly higher than those in the control group(P＜0.05).The levels of mAlb,β2-MG and Cys-C in group B were significantly higher than that in group A(P＜0.05).The correlation coefficient between mAlb,β2-MG,Cys-C levels and the DN risk danger were 2.92,2.75 and 2.60,all showing significantly positive correlation(P＜0.05).The detection sensitivity,specificity and diagnostic accordance rate of combined detection of mAlb,β2-MG and Cys-C reached 94.45%, 94.64%and 93.17%,respectively,all significantly higher than the value of separate detection and combined detection of two indexes(P＜0.05).The false positive rate and false negative rate was only 5.36%and 5.55%,significantly lower than the detection value of separate detection and combined detection of two indexes(P＜0.05).ConclusionThere are significantly correlations between mAlb,β2-MG,Cys-C and the renal injury.The combined detection of mAlb, Cys-C and β2-MG has higher accuracy on early diagnosis of diabetic nephropathy and could be used as a method of early clinical diagnosis on DN.

Diabetic nephmpathy;Early diagnosis;Micoralbuminuria;β2-microglobulin;Cysteineproteinase

R587.2

A

1003—6350（2014）05—0685—03

10.3969/j.issn.1003-6350.2014.05.0266

2013-09-16)

王卫。E-mail：15966152@qq.com