单波长测定医院制剂复方替硝唑含漱液中主要成分的含量

潘涛 欧阳波 王秀梅 田霞 黄懿

【摘 要】目的：建立测定复方替硝唑含漱液中替硝唑与醋酸氯己定的含量。方法：用Hpyersil C18（250mm×4.6mm， 5um）色谱柱，流动相为乙腈-0.1M磷酸二氢钠溶液（28：72），流速为1.0ml·min-1， 检测波长为254nm，柱温为30℃；结果：替硝唑与醋酸氯己定線性范围分别为40.09～320.72mg·L-1（r=0.9999），40.29～322.32mg·L-1 （r=0.9999）；平均加样回收率分别为100.44%，99.82% ；RSD分别为0.71%，1.00%（n=9）。结论：该方法简便准确，可用于复方替硝唑含漱液的质量控制。

【关键词】替硝唑；醋酸氯己定；高效液相色谱法；质量控制

【文献标识码】B 【文章编号】1004-7484（2014）02-0724-01

复方替硝唑含漱液中替硝唑是继甲硝唑后研制的硝酸咪唑抗厌氧菌及抗原虫药，具有比甲硝唑疗效高，疗程短的特点1，且毒副作用比甲硝唑低，无致癌性。醋酸氯己定具有显著的消毒、防腐作用，其0.02%溶液是一种常用创面及创口冲洗液2.为满足临床需要，自制复方替硝唑含漱液，用于治疗口腔厌氧菌感染及其他细菌引起的咽喉炎、口腔溃疡、咽炎及牙组织炎。

1仪器与药品

1.1仪器 岛津LC-20A液相色谱仪（日本岛津），；METTLER XS205（瑞典梅特勒公司）

1.2药品 替硝唑（浙江苏泊尔制药有限公司生产，批号：001-130101）醋酸氯己定（锦州九泰药业有限责任公司生产，批号：121207），替硝唑对照品（中国药品生物制品检定所，批号为100336-200703）醋酸氯己定对照品（中国药品生物制品检定所，批号为100183-201003），乙腈（色谱级，TIDEA公司）；水（重蒸馏水）；其他试剂均为分析纯；复方替硝唑含漱液（本院自制）

2方法与结果

2.1色谱条件 色谱柱：Hpyersil C18（250mm×4.6mm， 5um）；流动相：乙腈-0.1M磷酸二氢钠溶液（28：72）流速：1.0ml·min-1， 检测波长：254nm；柱温30℃；进样量：10ul.理论板数按醋酸氯己定峰计算不低于2000.

2.2对照品、供试品溶液的制备

2.2.1对照品溶液的制备 分别精密称取替硝唑对照品0.08018 g和醋酸氯己定对照品0.08058g，置于100ml量瓶中，加甲醇使溶解并稀释至刻度，摇匀，即得含替硝唑0.8018mg/ml和含醋酸氯己定0.8058mg/ml的对照品溶液；

2.2.2供试品溶液的制备 量取本品5ml，摇匀，微孔滤膜（0.45um）滤过，取续滤液即为供试品溶液；

图一 对照品HPLC色谱图（1，替硝唑；2，醋酸氯己定）

2.3线性关系的考察 精密吸取含替硝唑0.8018mg/ml和含醋酸氯己定0.8058mg/ml的对照品溶液0.5、1.0、2.0、3.0、4.0ml，分置5个10ml容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀。各10ul进样，测定其峰面积，以进样浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制标准曲线，试验结果表明，替硝唑浓度在40.09～320.72ug/ml范围内，峰面积与浓度线性关系良好（r=0.9999），醋酸氯己定浓度在40.29～322.32ug/ml范围内，峰面积与浓度线性关系良好（r=0.9999）；

2.4精密度试验 精密吸取同一供试品溶液（批号为131108）10ul，重复进样6次，测得峰面积，结果替硝唑峰面积RSD为0.24%，醋酸氯己定RSD峰面积RSD为0.26%，表明该方法进样精密度良好。

2.5稳定性试验 取同一批样品溶液（批号为131108）10ul，分别于0、2、4、8、12、18及24小时测定峰面积，结果替硝唑峰面积RSD为0.21%（n=6），醋酸氯己定RSD峰面积RSD为0.26%（n=6），表明样品溶液在24小时内稳定。

2.6重复性试验 取同一批样品溶液（批号为131108）6份，分别按“2.2.2”项下制备供试液，按样品含量测定方法测定两种成分的含量结果替硝唑峰面积RSD为0.24%（n=6），醋酸氯己定RSD峰面积RSD为0.89%（n=6），表明该方法重复性良好。

2.7回收率试验 分别精密量取已测定含量的同一批号样品各3份，分别置10ml量瓶中，依次分别精密加入对照品溶液，结果替硝唑的含量总回收率为100.44%（n=9 RSD=0.71%），醋酸氯己定的含量总回收率为99.82%（n=9 RSD=1.00%），表明该方法回收率良好。

2.8样品含量测定结果 取5批样品，依次制备供试品溶液，分别精密吸取对照品和供试品溶液10ul，注入高效液相色谱仪，测定按拟定的含量测定方法测定5批成品的替硝唑与醋酸氯己定的含量，结果见表二

3 讨论

3.1 流动相的选择 比较了许多种流动相体系，其中乙腈-0.1M磷酸二氢钠溶液（28：72）时，色谱峰分离效果良好，柱效高，加入一定量的磷酸调节流动相的ph，使其保持在酸性。

3.2检测波长的选择 从替硝唑、醋酸氯己定的紫外扫描图谱可见，二者的最大吸收波长分别为256，273nm，因在273nm附近是醋酸氯己定的波谷，因此不宜选择，为了兼顾二者的检测灵敏度，实验最终选择254nm 为检测波长。

参考文献：

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[2] 国家药典委员会编 中华人民共和国药典（二部）[S]2010年版 北京 中国医药科技出版社 2010：1131-1132

[3] 郭珉个，董煜，王栋等 高效液相色谱法同时测定复方氯己定溶液中3组分的含量， 中国医院药学杂志 2006，26（6）：751

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[5] 娄月芬 复方替硝唑含漱液的制备与含量测定 医药导报 2003，22（11）809-810

[6] 涂家生，武志昂，赵安虎 替硝唑溶液稳定性的研究 中国药科大学学报 1996，27（9）525-527

作者简介：

潘涛（1979-）男，硕士，主要从事医院药物制剂工作