近红外光谱法快速测定盐酸维拉帕米片的含量

多凯等

摘要：目的：利用近红外漫反射光谱技术快速测定盐酸维拉帕米片的含量。方法：采集盐酸维拉帕米片NIR光谱，采用偏最小二乘法（（PLS）进行回归，通過建立NIR光谱与理论测定值之间的多元校正模型，测定定盐酸维拉帕米片的含量。结果：定量分析模型浓度范围为32.8-48.0%（mg/mg）；内部交叉验证均方差（RMSECV）为0.668，决定系数（R2）为0.9860；外部验证均方差（RMSEP）为0.553，决定系数（R2）为0.9902。结论：该方法准确可靠、快速简便，可以满足快速检测的需要。

关键词：近红外光谱 盐酸维拉帕米片 定量分析

中图分类号：R927 文献标识码：A 文章编号：1672-5336（2014）06-0036-02

Abstract：Objective：To rapidly determine verapamil hydrochloride in verapamil hydrochloride tablets.Methods： NIR spectra of verapamil hydrochloride tablets were collected.On the basis of partial least squares（PLS） regression，the multivariant corrected model between the NIR spectra and theoretial values was established to evaluate the content of verapamil hydrochloride tablets.Results ：The concentration range of the quantitative analysis model was between 32.8-48.0%（mg/mg）.The mean square error of cross validation （RMSECV） was 0.668.the coefficient of determination （R2）was 0.9860.The mean square error of cross prediction （RMSEP） was 0.553.The average absolute deviation was 0.9902.Conclusion ：The method determining verapamil hydrochloride by NIR is accurate，rapid and simple.

Key Words：NIR （Near Infrared Spectrum Verapamil Hydrochloride Teblets quantitative analysis

维拉帕米（Verapamil）又名异搏定，是德国Knoll公司1963年研制成功的一种钙通道阻滞剂，在1962年被当作冠脉扩张剂。现今仍是治疗高血压的基础药品被国家基本药物目录收录。还有抑制心肌及房室传导、减慢心率、降低心肌耗氧量和逆转肿瘤对某些药物的抗药性等药理作用[1]。国内生产企业盐酸维拉帕米片的含量测定方法常为高效液相色谱法，该方法前处理繁琐，时间长，不适用于现场快速检测，而近红外光谱分析技术具有无破坏、分析快、用量少等特点，在药物现场检查领域的得到广泛的应用[2-3]。本文利用近红外漫反射技术结合化学计量法建立盐酸维拉帕米片的定量分析模型，大大提高了分析效率，节约了分析成本，为盐酸维拉帕米片的质量控制提供了简便、快速、可靠的分析方法。

1 实验部分

1.1 仪器和试剂

安捷伦公司Agilent1100液相色谱仪（配有4元梯度泵、紫外、自动进样）；Dikama Diamonsil C18色谱柱（4.6mm×250mm，5μm）；紫外检测器。Matrix—F型傅立叶变换近红外分光光度计（布鲁克公司）。分析软件为OPUS 5.0。所用试剂均为分析纯。

1.2 样品制备

取三个厂家生产的盐酸维拉帕米片（天津中央药业有限公司；上海信谊制药有效公司；广东华南制药有限公司；该三个厂家生产的片剂为薄膜衣片）100批次（每批的含量使用HPLC方法测得），将上述100批样品随机分成两组，一组为校正集75批，另一组为验证集25批。样品的质量百分比浓度在32.8%～48.0%之间。

1.3 盐酸维拉帕米片的NIR法测定

用光纤探头直接抵住样品，扫描范围在4000～12000cm-1，测其近红外光谱。采用仪器内置背景做为参比，扫描次数32，次默认分辨率为8cm-1。每批样品选取6片进行扫描，并通过软件计算平均光谱后用来建模。

2 结果与讨论

2.1 光谱预处理的方法选择[4]

使用OPUS 5.0自带的自动优化功能，对校正集的75批样品进行外部验证法，以校正样品集的交互验证均方根误差（RMSECV）选择最佳主成分数，考察主成分数对RMSECV值的影响，当RMSECV值最小时，所选主成分数为最佳。每个模型有最小的RMSECV值，当主成分数继续增加时，该值呈现上升趋势，之后减小，由此选出的最佳维数为4。

2.2 定量分析模型的建立

样品通过使用HPLC法测定含量，再采用偏最小二乘回归法建立质量百分比浓度与吸收强度之间的线性关系，使用仪器软件进行内部交叉验证均方差（RMSECV）和验证集样品的预测均方差（RMSEP）及其相关系数（R2）值之间的比较，优化扫描区间，比较处理后，选择最佳的扫描区间和光谱预处理方法为“一阶导数+矢量归一化”，相关数据见表1。

2.3 近红外定量分析模型的验证

为评价建立的定量模型的适用性，对收集的数据分别进行内部交叉验证和外部交叉验证，并对验证集样品用优化后的模型进行测定，结果见表2。25批验证集样品的平均预测偏差值为0.19，最大值为1.23（折算为真实值的百分率为2.26%），验证结果表明本模型的具有良好的准确度。

3 结语

由于不同厂家之间辅料纯在较大的差异，最初设定的全波长范围扫描所制定的模型无法得到较好的线性关系，故此，确定扫描范围在12000～8000 cm-1盐酸维拉帕米吸收较强的区间，通过使用仪器在进行验证优化确定最终的样品扫描区间范围。

本模型的建立，显著提高了盐酸维拉帕片含量的检测速度，也为药品的近红外快速检验工作提供了一个方便快捷的分析模型，该模型的内部验证和外部验证都得到了较好的实验结果，可满足对盐酸维拉帕米片进行快速定量分析的目的。

参考文献

[1]Pepine CJ，et al. Verapamil use in patients with cardiovascular disease： an overview of randomized trials. Clin Cardiol 1988，21（9）：663.

[2]邓芳.HPLC法测定盐酸维拉帕米片的溶出度[J].临床合理用药杂志，2013，20.

[3]张振杰，王晓宇.高效液相色谱法测定注射用盐酸维拉帕米的含量[J].中国药业，2007，16（9）：18-19.

[4]黄海，武洋.近红外光谱法快速测定卡托普利片的含量[J].中国药事，2011，25（7）：695-697.