桑葚中白藜芦醇的提取及抗氧化活性研究

林玲

摘要：目的：超声波法提取漯河本地桑葚中的白藜芦醇并测定其抗氧化能力。方法：抗氧化能力是测定提取物对DPPH·，·OH，O2·-三种自由基的清除能力。结果：桑葚白藜芦醇对三种自由基都有很好的清除作用，并和浓度有依赖关系，但并非都是线性相关。结论：桑葚白藜芦醇有很好的清除自由基能力，这为桑葚提取的进一步研究提供了一定的理论依据。

关键词：桑葚 白藜芦醇 自由基 抗氧化

中图分类号：R284 文献标识码：A 文章编号：1672-5336（2014）06-0017-02

桑葚是桑科桑属植物，别名桑果。我国桑树资源非常丰富，而果实桑葚含有人体所需要的多种营养物质。在历代中医本草中都被认为有黑发，补肝，延年，祛斑等作用。桑椹中含有人体必需的氨基酸，并含多种微量元素，营养价值很高。王欣研究利用Sephadex LH-20等方法在桑葚乙醇提取物中分离得到15个化合物[1]。对桑葚多糖和黄酮的研究也都证明其有抗氧化活性[2]。还有研究表明，桑葚提取物花色苷对乳腺癌细胞株有一定抑制作用[3]。白藜芦醇（resveratrol）是芪类结构非黄酮类多酚化合物，是一种植物抗毒素，经过深入动物或细胞研究，目前认为白藜芦醇具有抗氧化，抗炎，抗癌，心血管保护，预防动脉粥样硬化等各种作用[4]。本研究旨在对漯河本地桑葚进行提取，并分析其抗氧化能力，为桑葚的进一步开发利用提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 材料及试剂

桑葚（购自漯河市丹尼斯超市）；无水乙醇，乙酸乙酯，甲醇等试剂均为分析纯，水为双蒸水；DPPH（1，1- 二苯-2-苦肼基）、TPTZ（三吡啶三吖嗪）（Sigma公司）；各试剂盒均购自南京建成生物有限公司。

1.2 仪器

752型紫外分光光度计（上海第三分析仪器厂）；旋转蒸发仪（上海申生科技有限公司）；超声波提取仪（宿州欧倍科学仪器有限公司）；BT25S型电子天平（德国赛得利斯集团）。

1.3 实验方法

（1）白藜芦醇超声波提取方法，具体参照葛亮方法进行[5]。提取后将粗体物配置5个相同梯度的浓度，考察白藜芦醇浓度对自由基清除能力的影响。

（2）清除DPPH·自由基的能力。利用分光光度法测定DPPH·自由基的清除能力。量取5个梯度的桑葚白藜芦醇提取物稀释液100ul，加入0.2mmol/L DPPH·自由基乙醇溶液2ml，使其充分混勻并反应30min。以磷酸缓冲液作为空白对照，在520nm测定吸光度，以A520表示。

DPPH·自由基清除率=[1-A520样品/A520空白]×100%

（3）清除羟自由基·OH的能力 具体参照余立梅方法[6]。

（4）清除超氧自由基O2·-能力 具体方法参照Xican Li方法进行[7]。

1.4 数据处理

以上数据均采用excel进行处理分析。

2 结果

（1）桑椹白藜芦醇超声波提取结果。测得白藜芦醇含量为68.54ug/g。

（2）桑葚白藜芦醇对DPPH·自由基，羟自由基·OH，超氧自由基O2·-的清除能力。具体见表1。

从表1可以看出，桑葚白藜芦醇对DPPH·，·OH，O2·-三种自由基都有一定的清除作用，且随着浓度的增加，清除能力逐渐增加，但并非都呈线性增加。可以看出，对·OH的清除能力对白藜芦醇的浓度有剂量依赖性，而对DPPH·，O2·-两种自由基的清除能力则随着浓度增加增加比较缓慢。

3 结语

超声波法提取桑葚中的白藜芦醇其含量为68.54ug/g。而对其抗氧化能力的试验表明，桑葚中白藜芦醇对DPPH·，·OH，O2·-三种自由基都有一定的清除能力，这说明桑葚有很好的抗氧化能力。罗妲研究了桑葚提取液对D-半乳糖引起的衰老小鼠生化指标表明，桑葚有很好的保护肾脏和抗氧化功能[8]。引起这种作用的原因可能是多方面的。一般认为和桑葚中Vc，黄酮有关，本研究表明桑葚中的白藜芦醇也具有一定的抗氧化能力。本研究结果和相关桑葚中的白藜芦醇的研究结果不是很相同，这和提取方法有一定的关系，和桑葚的产地也有一定关系。机体代谢过程中因为生物氧化作用，不可避免会产生自由基，而其中大多数为活性氧自由基，当机体自由基增多后会对机体的正常细胞和组织产生破坏作用，并会导致衰老，癌症，死亡。所以自由基的清除非常重要，本研究表明，桑葚白藜芦醇对自由基有很好的清除作用。而研究表明桑葚黄酮，多糖同样也有很好的清除自由基的作用。这也为以后的研究提供了一定的方向，应该继续深入研究三者之间的协同作用，为桑葚的更好开发提供理论依据。

参考文献

[1]王欣，王洪庆，康洁，刘超，陈若芸.桑葚的化学成分研究[J].药学学报，2014，49（4）：504-506.

[2]韩伟，张玲玲，黄兮，等.桑葚多糖的絮凝春花及其抗氧化性[J].南京工业大学学报（自然科学版），2014，36（1）：97-99.

[3]王湛，付钰洁，等.桑葚花色苷的提取及对人乳腺癌细胞株MDA-MB-453生长的抑制[J].第三军医大学学报，2011，33（10）：988-990.

[4]付元庆，李铎.白藜芦醇[J].营养学报，2014，36（1）：13-15.

[5]葛亮，杨清香，张志强.超声波提取桑葚中白藜芦醇的工艺[J].食品研究与开发，2010，31（7）：69-71.

[6]于立梅，赵谋明，崔春，等.山竹壳中原花青素提取分级及抗氧化活性的研究[J].食品与机械，2007，7（4）：60-63.

[7]Xican Li.Improved Pyrogallol Autoxidation Method：A Reliable and Cheap Superoxide-scavenging Assay Suitable for All Antioxidants.Journal of Agricultural and Food Chemistry，2012，60：6418-6424.

[8]罗妲，邓秀婷，李彦斌，等.桑葚提取液对D-半乳糖致衰老小鼠血液生化指标影响的实验研究[J].右江民族学院学报，2013，6：789-790.