几种中草药提取物对念珠菌体外抑菌作用研究

倪 萍，牛婷婷

(1.新疆医科大学 基础医学院 形态中心，新疆 乌鲁木齐 830011；2.新疆伊宁县中医院 检验科，新疆 伊宁 835100)



几种中草药提取物对念珠菌体外抑菌作用研究

倪 萍1，牛婷婷2

(1.新疆医科大学 基础医学院 形态中心，新疆 乌鲁木齐 830011；2.新疆伊宁县中医院 检验科，新疆 伊宁 835100)

目的：探讨黄芩、薄荷、薰衣草等中草药提取物对念珠菌体外抑菌作用。方法：采用水提醇沉法提出黄芩、薄荷、薰衣草的提取液，利用微量稀释法体外测定不同草药中提取物对念珠菌最低抑菌浓度(MIC)。结果：黄芩、薰衣草提取物对临床念珠菌菌株均有一定的抑菌效果，其中薰衣草的抑菌效果最好，黄芩其次，薄荷不具备抑制念珠菌作用。结论：黄芩、薰衣草提取物具有一定的抑制白色念珠菌作用。

中草药；白色念珠菌；抑菌作用

白色念珠菌是条件致病性真菌，存在于肠道、上呼吸道以及口腔中，一般情况下不会引起疾病，但当人体免疫力下降时就会侵入细胞引发疾病。近年来因皮质类固醇药物、抗生素的滥用导致念珠菌感染的概率增加。鉴于此研究黄芩、薄荷、薰衣草3种中草药提取液对念珠菌的体外抑菌作用，现将具体情况报道如下。

1 材料与方法

1.1 材料

黄芩、薄荷、薰衣草中草药各500g(乌鲁木齐中药房)；白色念珠菌标准菌株(新疆医科大学基础医学院形态中心微生物实验室，经培养获得2代典型菌落)。从新疆医科大学第一附属医院临床白带、脓汁中分离出4株念珠菌菌株分别编号临床1～4号。从微生物试剂公司购买沙氏培养基，培养基经高压蒸汽灭菌后待其温度降至50℃左右时根据无菌操作要求注入内径为8cm的平皿中，轻轻摇晃使其在平皿底部均匀平铺以备用；将2个制作好的沙氏平板放置于37℃孵箱中培养48h，未发现细菌表明合格。

1.2 方法

(1)配置中药提取液。

分别取50g黄芩、薄荷、薰衣草进行粉碎处理，添加8倍蒸馏水浸泡30min，强火煮沸，改文火保持微沸状态1h，同时进行搅拌操作趁热进行过滤。向药渣中添加适量蒸馏水煎煮30min，过滤后合并滤液。将水煎液浓缩至100mL后添加200mL的95%乙醇，添加过程中不断地搅拌将含醇量控制在67%，进而析出杂质。静置24h过滤，水浴蒸发至无醇味。向其中添加蒸馏水定容50mL，在55.6kPa条件下灭菌处理后备用[1]。

(2)测定抑菌效果。

待测菌株接种于沙氏培养基，35℃培养 24～48h，选取直径2～3mm 的2～3个独立菌落混悬于0.9% 盐水中，用散射光细菌浊度仪，使其浓度为 0.5麦氏浓度，然后用沙氏液体培养基将菌悬液分别稀释50倍、20倍使试验细菌密度为(1×103～5×103)CFU/mL,每个测试孔的菌液量为100μL。

(3)药敏测试标准。

标准酵母菌菌株对黄芩、薄荷、薰衣草单味中药煎剂药物敏感性测定( MIC测定) 均采用微量稀释法，参照NCCLS(美国临床实验室标准化委员会)1997版M27-A方案[2]。

(4)MIC终点的判定。

培养48h后观察结果，在不搅动的情况下与对照孔按下列标准比较，0: 肉眼观察清晰; 1: 略模糊; 2: 浊度显著减低；3:浊度轻度减低; 4 : 浊度未减低。取1 略模糊为判定终点。

2 结果

通过中药煎剂药敏试验提示，黄芩、薰衣草等中草药提取物均起到了抑制念珠菌的作用，薄荷提取物未见明显抑菌作用，其中薰衣草的MIC值最低，抑菌效果最好。

标准株中，不同念珠菌对以上3种中药的MIC值见表1。

3 讨论

近年来临床上免疫抑制剂、激素、抗生素等药物的广泛应用，导致致病真菌的耐药性增强，一定程度上提高了念珠菌等真菌感染疾病的发病率。因此，研究副作用小、对真菌有较好治疗作用且适宜免疫力低下患者的药物显得尤为重要。

表1 黄芩、薄荷、薰衣草提取物对念珠菌体外抑制MIC值比较 (μg/mL)

通过研究黄芩、薄荷、薰衣草提取物对念珠菌的抑菌作用，发现黄岑、薰衣草单味中草药提取物对念珠菌均有一定的抑制作用，其中薰衣草提取物对念珠菌的抑菌作用稍好于黄芩。而其他文献资料曾报道[3],甘草、知母等也能起到抑制念珠菌的作用，要想探究其和本文中不同中药提取物念珠菌抑菌效果需做进一步的试验。另外，王文花等[4]通过研究不同中草药配伍情况发现。有些中草药配伍后和单味药对念珠菌的抑制作用有所差别，因此要想对比黄芩、薄荷、薰衣草等不同中草药配伍和单味药对念珠菌的抑制作用，仍需进一步研究。不过通过本研究明确了黄芩、薰衣草等中草药提取物对念珠菌具有一定的抑制作用，而薄荷提取物无抑制念珠菌作用，此结论是否与中草药产地或提取工艺有关，有待于进一步证实。

[1] 王柱华.10种中草药乙醇提取物抗真菌作用研究[J].辽宁师范大学学报：自然科学版,2013(1):120-123.

[2] WANGER A,MILLS K,NELSON P W,et al.Comparison of Etest and National Committee for Clinical Laboratory Standards broth macrodilution method for antifungal susceptibility testing: enhanced ability to detect amphotericin B-resistant Candida isolates[J].Antimicrobial Agents and Chemotherapy, 1995, 39(11): 2520-2522.

[3] 马廉兰,张文平,曾祥凤,等.116种中草药对白念珠菌的抑菌实验[J].赣南医学院学报,1998(3):4-7.

[4] 王文花,李劲松,肖晴晴,等.5种中药体外抗白色念珠菌的实验研究[J].广西中医学院学报,2010,13(3):54-55.

(责任编辑：李岚春)

2014-01-22

倪萍(1978-)，新疆医科大学讲师，研究方向为微生物药物药理。

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1673-2197(2014)08-0026-01