Y染色体微缺失对卵胞浆内单精子注射胚胎发育和妊娠结局的影响

郭 丽

上海解放军455医院生殖医学中心（上海 200052）

Y染色体微缺失对卵胞浆内单精子注射胚胎发育和妊娠结局的影响

郭 丽

上海解放军455医院生殖医学中心（上海 200052）

目的探讨 Y 染色体微缺失对卵胞质内单精子注射（ICSI）胚胎发育和妊娠结局的影响。方法回顾19 例Y 染色体微缺失患者（研究组）进行的23 个治疗周期的胚胎和临床结局资料, 与同期无Y 染色体微缺失（对照组）的少弱精子症或无精子症的86个治疗周期的相应资料进行比较，分析两组患者在受精率、卵裂率、优质胚胎率、生化妊娠率、临床妊娠率、胚胎种植率、早期流产率的差异。结果研究组和对照组相比，受精率（85.0% vs 89.2%）、卵裂率（96.0% vs 95.3%）、优质胚胎率（68.3% vs 66.7%）、生化妊娠率（47.8% vs 50.0%）、临床妊娠率（43.5% vs 41.6%）、胚胎种植率（22.9% vs 20.8%）、早期流产率（10.0% vs 7.5%）差异比较无统计学意义（P＞0.05）。结论 Y染色体微缺失对胚胎质量和妊娠结局无显著性影响。

Y染色体微缺失; 精子注射, 细胞质内; 胚胎发育; 妊娠结局

人类Y染色体长臂上存在着无精子基因（azoospermia factor, AZF），它由AZFa、AZFb 和AZFc 3个区域构成，这些区域中的任何一个出现缺失都可引起少弱精子症或无精子症，在无精子症或严重

少弱精子症患者中发病率在7%～15%[1]。Y染色体微缺失患者可通过卵胞浆内单精子注射（intracytoplasmi sperminjection, ICSI）-胚胎移植（embryo transfer ET）技术获得下一代，但在ICSI -ET中AZF基因微缺失是否影响体外受精患者的胚胎质量和治疗结局的报道不多，故本研究回顾性分析了19 例Y染色体微缺失患者在我院生殖中心进行的23个ICSI周期，分析Y染色体微缺失对胚胎质量及妊娠结局的影响。

材料与方法

一、研究对象

收集2012年1月至2014年7月间在本中心进行ICSI -ET助孕患者夫妇中男方检测显示为Y 染色体微缺失且排除女方不孕的19例23个周期病例资料为研究组，并收集同期以男方严重少精子症或无精子症为不孕因素的无Y 染色体微缺失的96个周期为对照组。所有患者均进行常规的染色体核型分析和Y 染色体微缺失的检测。

二、IVF-ET治疗

均采用常规长方案超促排卵，在黄体中期使用促性腺激素释放激素激动剂（GnRHa，商品名：达菲林，3.75 mg/支，瑞士雪兰诺公司）1.25 mg进行降调节，到下次月经第3～5日开始使用促性腺激素（商品名：果纳芬，75 IU/支，瑞士雪兰诺公司）150～225 IU启动促排卵, 当主导卵泡直径达18mm时注射人绒毛膜促性腺激素（hCG，丽珠医药）4 000～10 000 U，36h后阴道B超介导下穿刺取卵。患者采用ICSI受精，在取卵后第3天移植胚胎，移植14d后验尿hCG,阳性者为生化妊娠。4周后阴道B超检查, 检测到孕囊者确诊为临床妊娠。

三、分析指标

受精率、卵裂率、优质胚胎率、生化妊娠率、临床妊娠率、胚胎种植率、早期流产率。

四、统计学分析

结果以均数±标准差或率表示，应用SPSS 17.软件进行统计学分析, 两组参数采用t检验，两组率的比较采用x2检验。P＜0.05 为差异有统计学意义。

结 果

一、缺失类型

19例Y染色全微缺失患者缺失类型分为4类：（1）AZFa部分缺失 （1例） ；（2）AZFb部分或全部缺失（3例）；（4）AZFc部分或全部缺失（1例）；（4）AZFb区缺失伴c区缺失 （2例）。

二、研究组和对照组的基本情况比较

两组患者基本情况比较见表1。两组男、女方在年龄、不孕年限、基础卵泡刺激素（FSH）、促性腺激素（Gn）用量相近，差异无统计学意义（P＞0.05）。

三、两组治疗结局比较

两组患者ICSI 治疗结局比较见表2。两组患者的平均获卵数和移植周期数差异比较无统计学意义。两组的受精率、卵裂率、优质胚胎率、生化妊娠率、临床妊娠率、胚胎种植率差异比较也均无统计学意义（P＞0.05），研究组的流产率稍高于对照组，但差异比较无统计学意义（P＞0.05）。

表1 两组患者一般情况的比较（±s）

表1 两组患者一般情况的比较（±s）

年龄(岁) 周期数 不孕年限 自然流产史 基础FSH Gn用量男 女 (个) (年) n(%) (mIU/mL) (IU)研究组 33.2±4.1 33.2±4.1 23 4.1±2.3 8.7(2) 8.3±2.3 1881.6±204对照组 33.2±4.1 30.5±4.0 96 3.8±2.1 10.5(10) 7.5±3.3 1806.6±214

表2 两组患者治疗结局的比较

讨 论

Y 染色体长臂的AZF 区是微缺失的好发区域，AZF不同区域的基因缺失可导致精子在不同的形成阶段发生障碍，令精子数量减少，主要表现为少弱精子症、严重少弱精子和无精子症。

IVF-ET技术能解决配偶卵子的受精问题，但染色体微缺失是否影响其合子的卵裂、发育、着床、继续妊娠能力，目前的报道不一。本研究结果表明AZF 缺失患者ICSI 周期的受精率、卵裂率及胚胎质量与对照组无统计学差异。与国内学者王丽娟等[2]、吴畏等[1]、及国外学者Patrat等[3]的研究结论相同。而Van Golde 等[4]研究Y 染色体微缺失与无Y 染色体微缺失ICSI 治疗者比较，前者受精率、胚胎质量明显低于后者，提示Y 染色体AZFc 微缺失影响ICSI 治疗者的受精率和胚胎质量。因此关于这个问题仍需要大量的研究来证实。

Y染色体的完整性在维持胚胎妊娠中是否发挥作用，国内外学者得出了不同的结论。Mateu 等[5]认为Y 染色体微缺失患者非整倍体精子比例增高,导致非整倍体胚胎的比例增加，流产的风险增加。Dewan 等[6]研究发现AZFc 区微缺失的流产发生率明显高于男性不育患者及无流产史的正常生育男性；而吴畏等[1]、Karaer等[7]均认为, Y 染色体的微缺失与复发性流产无关联。本研究显示研究组和对照组之间早期流产率并没有显著性差异,提示Y染色体微缺失没有影响配偶的继续妊娠。Dewan 等[6]认为AZF缺失是否会导致妊娠丢失的不同结论可能与选择的序列标签位点（sequencetagged site, STS）或与人种的差异有关。Komori等[8]和McLachlan等[9]研究表明, Y染色体微缺失可以通过ICSI 传递给男性后代并且可能在传递过程中出现扩大。这提示我们需关注AZF 区部分缺失患者配偶的继续妊娠情况。并建议在进行试管婴儿前行遗传学咨询。

1 张雅君, 卢实, 刘琳, 等. 无精子症、重度少弱精子症患者染色体核型与Y染色体微缺失发生率的研究. 中国男科学杂志 2014; (7): 44-48

2 王丽娟, 宋成, 黄菊, 等. Y染色体微缺失对卵胞质内单精子注射胚胎情况和临床结局的影响. 生殖与避孕2012; 32(7): 457-463

3 Patrat C, Bienvenu T, Janny L,et al. Clinical data and parenthood of 63 infertile and Y-microdeleted men.Fertil Steril2010; 93(3) : 822-832

4 Van Golde RJ, Wetzels AM, de Graaf R,et al. Decreased fertilization rate and embryo quality after ICSI in oligozoospermic menwith microdeletions in th azoospermia factor region of the Ychromosome.Hum Reprod2001; 16(2) : 289-292

5 Mateu E, Rodrigo L, Martinez MC,et al. Aneuploidies inembryos and spermatozoa from patients with Y chromosome microdeletions.Fertil Steril2010; 94(7) 2874-2877

6 Dewan S, Puscheck EE, Coulam CB,et al. Y-chromosome microdeletions and recurrent pregnancy loss.Fertil Steril2006; 85(2): 441-445

7 Karaer A, Karaer K, OzaksitG,et al.Ychromosome azoospermia factor region microdeletions and recurren pregnancy loss.Am J Obstet Gynecol2008; 199(6):662. e1-e5

8 Komori S, Kato H, Kobayashi S,et al. Transmission of Y chromosomal microdeletions from father to son through intracytoplasmic sperm injection.J Hum Genet2002; 47(9): 465-468

9 McLachlan RI, O'Bryan MK. Clinical Review #: State of the art for genetic testing of infertile men.J Clin Endocrinol Metab2010; 95(3): 1013-1024

（2014-09-28收稿）

Effects of the Y Chromosome microdeletions on the embryo development and clinical outcome of the ICSI treatment cycle

Guo Li
Center for Reproductive Medicine, 455 Hospital of PLA, Shanghai 200052, China

ObjectiveTo determine the effects of Y chromosome microdeletion on the embryo development and clinical outcome of the ICSI treatment cycle.MethodsThe embryo development and clinical outcome of 19 patients with Y microdeletions who attempted 23 ICSI cycles at our center were retrospectively analyzed in the study. The patients in study group were matched to 86 cycles at the same time who had either severe oligozoospermia or azoospermia with normal Y chromosomes (control group). The differences between the two groups were compared including the average age, duration of infertility, the rate of natural abortion history, number of oocytes retrieved, fertilization rates、good embryo rate, number of embryos transferred, implantation rate, clinical pregnancy rate，early abortion rate.ResultsThere were no signif cant differences between Groups in the rates of fertilization (85.0% vs 89.2%), the cleavage (96.0% vs 95.3%), good embryos (68.3% vs 66.7%), biochemical pregnancy (47.8% vs 50.0%), clinical pregnancy (43.5% vs 41.6%), implantation (22.9% vs 20.8%), and early abortion. (10.0% vs 7.5%) (P>0.05).ConclusionY chromosome microdeletion has no signif cant effect on the embryo development and clinical outcome of the ICSI treatment cycle.

Y-microdeletion; sperm injections, intracytoplasmic; embryonic development; pregnancy outcome

10.3969/j.issn.1008-0848.2014.12.004

R 698.2