山茱萸药材中N、P含量的测定

（郑州市儿童医院，河南 郑州 450000）

山茱萸药材中N、P含量的测定

张涛陈海燕

（郑州市儿童医院，河南 郑州 450000）

目的 测定山茱萸药材中 N、P 的含量，为研究山茱萸药材品质提供参考。方法 用消解法处理实验药材，用凯氏定氮法测定山茱萸药材中 N 的含量，用磷钼比色法测定山茱萸药材中 P 的含量。结果 山茱萸药材中 N 的含量在 4.758 ～ 6.712 mg/g；果肉中 P 的含量在1.318 ～ 5.651 μg/g。结论 山茱萸药材 N、P 的含量的测定能为进一步研究山茱萸药材品质提供参考，为山茱萸药材的规范化种植提供依据。

山茱萸；N、P含量；药材品质

山茱萸是山茱萸科多年生灌木山茱萸（Cornus officinalis Sieb.et Zucc）的干燥成熟果肉，具有补益肝肾，涩精固脱的功效，主治眩晕耳鸣，腰膝酸痛，内热消渴阳痿遗精，遗尿频尿，崩漏带下等。山茱萸是六味地黄丸的主要原料之一，在中药生产中用量很大，但到目前为止对山茱萸原药材的质量要求尚没有统一的标准，种植过程不规范，导致市场销售的山茱萸的品质差异极大。近年来对山茱萸药材的研究多集中在化学成分结构分析、化学成分指标含量测定及山茱萸分子生物学特性等方面[1-3]，本实验首次对山茱萸药材中N、P的含量进行测定，以期对山茱萸药材的规范种植，研究山茱萸药材品质，山茱萸药材N、P含量与山茱萸药材中化学成分指标是否存在相关性等方面的研究奠定基础。

1 仪器、材料与试剂

1.1 仪器

KDN-102C型定氮仪、20孔消煮仪（上海纤检仪器有限公司）；TU-1810紫外可见光光度计、UVWin5紫外软件（北京普析通用仪器有限责任公司）；1000 mL容量瓶；100 mL容量瓶；50 mL容量瓶；定量滤纸7 cm；半微量滴定管（5 mL）。

1.2 材料与试剂

实验室实验用山茱萸药材产自河南境内，经河南中医学院陈随清教授鉴定为山茱萸科多年生灌木山茱萸（Cornus officinalis Sieb. et Zucc）的干燥成熟果肉，实验样品为自制干燥成熟果肉粉末（过3号 筛 ） ， 浓 硫 酸 （ ρ=1.84 g/mL， 分 析 纯 ） ， 双 氧 水 （30%） ，NaOH（分析纯），钼酸铵（分析纯），偏钒酸铵（分析纯），溴甲酚绿，甲基红，乙醇（95%～99%），硼酸（分析纯），KH2PO4（分析纯），70%～72%高氯酸（ρ=1.60 g/mL，分析纯），2，4-二硝基酚（分析纯），酒石酸氧锑钾[K（SbO）C4H4O6] （分析纯），钼酸铵[（NH4）6Mo7O24·4H2O] （分析纯），左旋抗坏血酸（分析纯），H2BO3（化学纯），高锰酸钾（分析纯），还原铁粉（过3号筛），辛醇，去离子水。

2 样品的采集及制备

2.1 样品的采集

将山茱萸产区划分若干样方，选取生态因子相似的若干个样方取样，在每个样方中取成熟度相似的、健康的山茱萸植株，随机采集山茱萸果实并拍照记录。

2.2 样品的制备

取山茱萸去核，将果肉放入烘箱8 h，进行烘干，烘干后用粉碎机粉碎，并过3号筛，放入自封袋保存。共得到7个产地批次样品，样品信息见表1。

表1 样品信息表

3 山茱萸药材中氮（N）、磷（P）元素的含量测定

3.1 山茱萸药材中磷（P）元素的含量测定

①样品的制备：精密称取0.2000 g药材样品置于干燥的消煮管中，加水湿润，再加5 mL浓硫酸，放置5 h后消煮，溶液全部呈棕黑色时，加入双氧水消煮呈清液。②测定方法：将煮好的消煮液转移至100 mL容量瓶中，待溶液冷却后用去离子水定容，再用定量滤纸过滤，吸取滤液10 mL置100 mL容量瓶中，加去离子水约40 mL，加2，4-二硝基苯酚指示剂3滴，加6 mol/LNaOH调节至微黄色，再加2 mol/L H2SO4调至刚好无色，加钒鉬酸铵试剂10 mL，用去离子水定容至刻度，待测。供试品放置15 min后，用紫外分光光度计在波长450 nm下测定吸光度A，各批次样品实验结果见表2。③磷溶液的标准曲线：分别吸取50 μg/mL的P标准溶液1、2、3、4、6、8 mL于50 mL容量瓶中，依次按照上述步骤显色和测定，该标准系列P的浓度依次为0.5、1.0、1.5、2.0、3.0、4.0 μg/mL。以磷的浓度（μg/mL）为横坐标，吸光度（A）为纵坐标进行线性回归，回归方程为：y =0.0266x –0.0897，r=0.9998，表明磷浓度在0.5～4 μg/mL时与吸光度呈良好线性关系。

3.2 山茱萸药材中氮（N）元素的含量测定

吸取3.1①中未过滤的消煮液10 mL于消煮管中，加10 mL，10 mol/L NaOH蒸馏，用10 mL硼酸指示剂吸收蒸馏液，待溜出液体积至60 mL，用标准酸滴定，消耗标准酸（H2SO4C=0.00532 mol/L）的体积为V，各批次样品实验结果见表2。

表2 山茱萸果肉中氮、磷含量表

4 实验结果

山茱萸果肉中氮的含量在4.758～6.712 mg/g；果肉中磷的含量在1.318～5.651 μg/g，实验结果见表2。

5 讨 论

产地不同，山茱萸药材质量差距明显，从化学成分指标来看，不同产地山茱萸药材中马钱苷，熊果酸，总多糖，总有机酸，鞣质含 量 等 存 在 显 著 差 别[4,5]， 本 实 验 对 药 材 中 无 机 元 素 （N、P 等 元 素含量）进行测定，以期分析药材中无机元素含量是否对山茱萸药材品质有一定影响，对今后进一步研究山茱萸药材中化学成分指标与无机元素之间的相关性奠定基础，对无机元素与药材中化学成分指标的结合研究为解释药材道地性及药材的规范化种植开辟一条新的途径。

[1] 赵世萍,付桂香.山茱萸化学成分和药理学作用的研究进展[J].中草药,1997,28(3):187-188.

[2] 杨晋,陈随清.山茱萸化学成分研究[J].中草药,2005,36(12):1780-1782.

[3] 陈随清,杨晋,冀春如.山茱萸化学成分和质量控制研究进展[J].中国医药发展论坛,2002,1(5):56-58.

[4] 石延榜,张振凌,许丹妮.不同产地山茱萸药材质量的检测[J].时珍国医国药,2007,18(12):3052-3053.

[5] 陈随清,杨晋,王利丽,等.不同栽培品种山茱萸药材的化学质量评价[J].世界科学技术—中医药现代化,2006,8(2):68-73.

Determination of N, P content in Fructus Corni

ZHANG Tao, CHEN Hai-yan
(The Children's Hospital of Zhengzhou, Zhengzhou 450000, China)

Objective To determine the N, P content in the Cornus officinalis. Methods The Cornus officinalis was treated by digestion method, the N content of Cornus officinalis was determined by kjeldahl nitrogen method, the P content of Cornus officinalis was determined by phosphomolybdate colorimetry. Results The N content of Cornus officinalis is 4.758-6.712 mg/g; the P content of Cornus officinalis is 1.318-5.651 μ g/g. Conclusion The Determination of N, P content in Cornus officinalis could provide a reference for further research on the quality of Cornus officinalis, the study could Provide basis for the standardized cultivation of Cornus officinalis.

Cornus officinalis Sieb.et Zucc; The N, P content; The quality of cornus officinalis

R284.2

：B

：1671-8194（2014）30-0038-02