丹芪六君颗粒对荷瘤小鼠化疗后胃肠道不良反应影响的实验研究

林青 樊卫飞 王峻

（江苏省老年医院，江苏南京 210024）

丹芪六君颗粒对荷瘤小鼠化疗后胃肠道不良反应影响的实验研究

林青 樊卫飞 王峻

（江苏省老年医院，江苏南京 210024）

目的：探讨丹芪六君复方颗粒对荷瘤鼠化学药物治疗后胃肠道不良反应的影响。方法：小鼠随机分为正常组、模型组、奥美拉唑钠组和丹芪六君颗粒高、低剂量组，除正常组外其余各组小鼠均接种肿瘤细胞并予顺铂腹腔注射，各组分别用药14d。观察用药前后各组小鼠的体重、进食量、瘤重，统计抑瘤率。结果：丹芪六君颗粒高剂量组能够显著提高化疗小鼠的体重；丹芪六君颗粒高、低剂量组均可以明显提高化疗小鼠的进食量，降低瘤重；丹芪六君颗粒高、低剂量组小鼠瘤重显著低于奥美拉唑钠组；丹芪六君颗粒高剂量组抑瘤率显著高于奥美拉唑钠组。结论：丹芪六君颗粒能显著缓解荷瘤小鼠化疗后胃肠道不良反应，增加体重，增加进食量，抑制瘤块生长速度。

荷瘤小鼠 化疗 胃肠道反应 丹芪六君颗粒

化疗是治疗中晚期恶性肿瘤的常用方法，单纯化疗往往引起较严重的不良反应，其中最为常见的是胃肠道的不良反应，出现恶心呕吐、食欲减退、腹胀脘满、大便不调等症状，进一步导致体重下降，形体消瘦，生活质量减退，不能进一步耐受治疗等。丹芪六君颗粒是在古方六君子汤基础上加紫丹参、黄芪而成。古方主治脾胃气虚兼有痰湿阻络，症见恶心呕吐、胸脘痞闷、四肢无力、大便不调等，其所治疗诸症恰恰为化疗中常见。本研究在古方基础上加用丹参、黄芪，取其活血化瘀、益气扶正之用，通过建立荷瘤小鼠模型，进一步探讨丹芪六君颗粒对化疗后荷瘤小鼠胃肠道反应、体重、瘤重及存活情况的影响。

1 实验材料

1.1 实验动物清洁级昆明小鼠50只，雄性，体重（20±2）g，购自上海伊莱克斯实验动物中心。

1.2 瘤株腹水型S180瘤株、L929细胞株由江苏省肿瘤医院中心实验室提供。

1.3 药品及试剂注射用奥美拉唑钠（阿斯利康制药有限公司，规格：40mg/支，批号：H20030945）；丹芪六君颗粒主要由丹参颗粒、黄芪颗粒、党参颗粒、白术颗粒、茯苓颗粒、甘草颗粒、陈皮颗粒、半夏颗粒组成，剂量比为2∶2∶1∶1∶1∶0.5∶1∶1，颗粒剂购自江阴天江药业有限公司；注射用顺铂粉针剂（齐鲁制药有限公司，规格：20mg/支，批号：H37021357）。

2 实验方法

2.1 分组与造模[1]将小鼠随机分为5组，每组10只，分别为：正常组、模型组、丹芪六君颗粒高剂量组、丹芪六君颗粒低剂量组、奥美拉唑钠组。除正常组外其余各组大鼠均接种肿瘤细胞并化疗。

无菌条件下抽取传代第8天的S180小鼠的腹水，按1∶3比例用生理盐水稀释，反复冲打，充分混匀，在显微镜下计数，用生理盐水调整细胞浓度为1×107/mL，取0.2mL（含瘤细胞数2×106个）于每鼠右侧腋窝下碘酊消毒后皮下接种。瘤株接种前，均用0.2%台盼蓝染色，计算活细胞数为95%～98%。从抽取腹水时开始，到移植完最后一只小鼠的总时间控制在60min内。小鼠接种癌瘤株第10天，用生理盐水将20mg顺铂稀释成0.25mg/mL顺铂注射液，小鼠腹腔注射0.2mL/只，连续注射5d。

2.2 给药正常组：不给药；模型组：生理盐水0.4mL/（kg·d）灌胃。根据人与小鼠药物等效剂量（按体表面积换算）的2.5倍和10倍决定中药颗粒组的给药剂量。丹芪六君颗粒高剂量组：丹芪六君颗粒16g/（kg·d）灌胃；丹芪六君颗粒低剂量组：丹芪六君颗粒4g/（kg·d）灌胃；奥美拉唑钠组：奥美拉唑钠75mg/（kg·d）灌胃。

各组小鼠灌胃容积均为0.02mL/g，1次/d，连续14d。均于瘤细胞接种后第2天开始用药，末次给药24h后断颈处死小鼠，称取重量，剥取瘤块以检测相关指标。

2.3 观察指标（1）小鼠用药前后一般情况及体重、进食量变化；（2）瘤块的重量，计算抑瘤率[2]：抑瘤率（%）=（模型组瘤重-给药组瘤重）/模型组瘤重×100%。

3 实验结果

3.1 一般情况比较与正常组小鼠比较，其余各组小鼠均逐渐出现进食量减少，体重减轻，毛发稀疏，运动迟缓等现象，以丹芪六君颗粒高剂量组最轻，丹芪六君颗粒低剂量组表现次之，奥美拉唑钠组表现介于中间，模型组表现最差。

3.2 各组小鼠用药前后体重的比较用药前各组小鼠体重差异无统计学意义（P＞0.05）。用药14d后，正常组与丹芪六君颗粒高剂量组小鼠体重与用药前比较显著增高（P＜0.01），其他组体重变化不显著。用药后，与模型组、奥美拉唑钠组比较，正常组和丹芪六君颗粒高、低剂量组小鼠体重显著增加（P＜0.01）。丹芪六君颗粒高剂量组小鼠体重显著高于低剂量组（P＜0.01）。见表1。

表1 各组小鼠用药前后平均体重的变化（±s）

表1 各组小鼠用药前后平均体重的变化（±s）

注：与本组用药前比较，**P＜0.01；与模型组用药后比较，▲▲P＜0.01；与奥美拉唑钠组用药后比较，△△P＜0.01；与丹芪六君颗粒低剂量组用药后比较，##P＜0.01。

组别动物数（只）体重（g）用药后17.63±2.5丹芪六君颗粒高剂量组1019.45±1.727.26±3.1**▲▲△△##丹芪六君颗粒低剂量组1019.10±2.319.82±2.2▲▲△△奥美拉唑钠组1017.84±2.716.95±2.1用药前正常组917.42±2.428.13±2.5**▲▲△△模型组1016.52±2.6

3.3 用药后各组小鼠进食量、瘤重的变化及各组抑瘤率比较

与模型组比较，正常组和丹芪六君颗粒高、低剂量组小鼠进食量显著增加（P＜0.01）；与奥美拉唑钠组比较，丹芪六君颗粒高剂量组进食量显著增加（P＜0.01）。与模型组比较，丹芪六君颗粒高、低剂量组和奥美拉唑钠组小鼠瘤重显著降低（P＜0.01或P＜0.05）；与奥美拉唑钠组比较，丹芪六君颗粒高、低剂量组小鼠瘤重显著降低（P＜0.05）。丹芪六君颗粒和奥美拉唑纳都有抑制肿瘤生长的作用，丹芪六君颗粒高剂量组抑瘤率明显高于奥美拉唑钠组（P＜0.05）。见表2。

表2 用药后各组小鼠进食量、瘤重、抑瘤率的比较

4 讨论

化疗是肿瘤的主要治法之一，针对恶性肿瘤细胞无限增殖、分化异常的特点，化疗药物可起到“细胞毒”和“促进分化”等作用，达到杀死癌细胞、抑制癌细胞生长繁殖和促进癌细胞分化之目的。但正常的组织细胞也遭到不同程度的损害，尤其是生长活跃的胃肠道黏膜上皮细胞，从而出现严重的消化道反应，如恶心呕吐、口腔炎、食欲减退、腹部不适及便秘等，加剧了患者化疗后的损伤，阻碍了临床进一步化疗的可能。

国外研究早已发现质子泵抑制剂（PPIs）对多种人恶性肿瘤细胞株具有化疗增敏作用，并能选择性地诱导癌细胞凋亡，对正常细胞则无明显影响[3]。Yeo等[4]发现泮托拉唑可选择性地诱导胃癌细胞凋亡，对正常胃黏膜细胞则无作用，瘤内注射泮托拉唑的裸小鼠，肿瘤体积显著小于对照组，并可见大规模肿瘤细胞凋亡。沈永华等[5]实验发现给予奥美拉唑或泮托拉唑灌胃的荷瘤裸小鼠，血清TNF-α和IL-6水平显著低于癌性恶病质组，体质量和摄食、饮水量亦有不同程度的改善。所以，本研究选择质子泵抑制剂奥美拉唑作为西药对照组进行对照。

中医学认为化疗药物多为苦寒之品，易损及脾胃，而脾胃乃后天之本，气血生化之源，人体的生长发育都有赖于脾胃所运化的水谷精微的滋养。脾气不足，则运化失司，水湿内停，痰浊内生，精气不升，浊气不降，日久痰瘀阻络发生毒副反应。减轻化疗后胃肠道不良反应的研究已成为临床化学药物治疗研究的热点，在各种方法中，中医药复方制剂已经日益受到人们的重视。本研究选方是在古方六君子汤基础上加紫丹参、黄芪而成[6]，功能以健脾化湿、化瘀通络、益气扶正为主。

现代药理分析发现，丹参主要成分为丹参酮，能增强巨噬细胞的吞噬功能，具有抗炎作用，能调节蛋白代谢和免疫功能，可抗凝、改善血液黏稠性；黄芪的主要成分为黄芪皂苷、黄芪多糖等，具有扩张血管，保护血管内皮细胞，改善微循环的作用，还具有较好的促进血管生成的作用[7-8]；党参含菊糖，能直接促进特异性免疫淋巴细胞的分化、增殖，提高非特异免疫的NK细胞活性，增强巨噬细胞的吞噬能力，提高机体的免疫能力；白术对化疗导致的白细胞降低有明显提升作用；茯苓内含有的茯苓聚糖是提高人体免疫功能的多糖物质；半夏有很好的镇吐作用。

本研究结果表明，奥美拉唑钠并没有显著改善化疗小鼠的进食量，从而也就不能够增加化疗小鼠的体重。无论低剂量还是高剂量丹芪六君子颗粒均可以提高化疗小鼠的进食量，但低剂量丹芪六君子颗粒没有增加小鼠的体重，而高剂量丹芪六君子颗粒能够显著提高化疗小鼠的体重，与正常小鼠间无显著性差异。奥美拉唑钠和丹芪六君子颗粒均对化疗有辅助作用，3组的瘤重均显著低于模型组，3组的抑瘤率均显著高于模型组，而其中丹芪六君子颗粒的这种辅助作用更强，且与剂量有依赖性。

综上，丹芪六君颗粒能明显改善化疗后小鼠的全身状况，减轻胃肠道反应，在一定程度上促进进食量，增加体重，改善生存质量，抑制肿瘤生长率。本研究所用丹芪六君子颗粒按照常规临床经验配方混合，配方比例是否为最佳以及在延长生存期方面的作用机制还有待进一步研究。

[1]张宏方，马居里，郭兰生，等.中药调衡方对S180荷瘤小鼠抗肿瘤的实验研究.陕西中医，2005，26（1）：85

[2]李仪奎.中药药理实验方法学.2版.上海：上海科学技术出版社，2006：777

[3]Luciani F，Spada M，De Milito A，et al.Effect of proton pump inhibitor pretreatment on resistance of solid tumors to cytotoxic drugs.J Nail Cancer Inst，2004，96（22）：1702

[4]Yeo M，Kim DK，Kim YB，et al.Selective induction of apoptosis with proton pump inhibitor in gastric cancer cells.Clin Cancer Res，2004，10（24）：8687

[5]沈永华，陈敏，沈卫东，等.质子泵抑制剂对SGC-7901胃腺癌裸小鼠癌性恶病质的作用.胃肠病学，2011，16（1）：11

[6]刘春安，彭明.抗癌中草药大辞典.武汉：湖北科学技术出版社，l994：340

[7]张嵩，牟晓燕，王红梅，等.黄芪多糖诱导的树突状细胞增强CIK细胞的杀伤作用.中国免疫学杂志，2009，25（2）：140

[8]陈鹊汀，刘智勤，蒋玉凤，等.当归补血汤对化疗药物5-Fu增效减毒的实验研究.北京中医药大学学报，2007，30（11）：757

R73-354文献识别码A

1672-397X（2014）03-0078-03

林青（1982-），女，医学硕士，住院医师，研究方向：中医内科学基础与临床（风湿免疫方向）。

樊卫飞，fwfei1974@qq.com

2013-10-31

编辑：吴宁

2011年江苏省中医药局课题（LB11002）