microRNAs在肿瘤病理学研究中的进展

李玉军

专家述评

microRNAs在肿瘤病理学研究中的进展

李玉军

microRNAs（miRNAs）是一类长度约为20～23 nt的内源性小分子单链非编码RNA，其位于基因组内非编码区，进化上高度保守，可在转录后水平对基因表达进行调节［1－3］。miRNAs通过调控基因表达、在细胞增殖、凋亡、分化及个体发育等过程中发挥着非常重要的作用。近十多年的研究［4，5］已证实，miRNAs与肿瘤的发生及发展关系密切，通过调控其靶基因的表达从而影响肿瘤的发生发展，发挥着类似癌基因或抑癌基因的作用。这些与肿瘤相关的miRNAs对肿瘤的诊断、治疗及判断预后都具有重要的意义及应用前景。

1 miRNAs的发现、产生、成熟及作用机制

1993年，Lee等［6］首先在线虫的胚胎发育期发现一种长度约为22 nt的小分子非编码RNA，能调节线虫细胞发育时序，将其命名为lin－4。随后研究者发现lin－4通过碱基配对的方式结合到lin14mRNA的3＇末端非翻译区（3＇untranslational region，3＇UTR），可以抑制lin14蛋白表达。2000年Reinhart等［7］发现另一小分子单链非编码RNA－let－7。与lin－4的作用机制相似，let－7通过与lin－41和lin－57mRNA的3＇UTR结合实现转录抑制功能，从而影响线虫的时序性发育。从此以后，lin－4和let－7很快引起人们的关注，许多实验室从家鼠、拟南芥、线虫、果蝇及人类等多种真核生物的细胞中陆续发现了超过300余种此类小分子非编码RNA，科学家以miRNAs来命名这些呈现时空特异性表达模式的非编码小分子。

miRNAs的产生及成熟过程大致可分为核内及核外两个阶段。miRNAs基因经RNA聚合酶II或III转录形成长度约1000 bp的长链RNA初始转录产物（pri－miRNAs）。在细胞核中，Drosha及DGCR8酶对pri－miRNAs的基部进行剪切，形成约60～70 nt带有茎环结构的pre－miRNAs，然后通过转运蛋白Exportin－5运输到细胞质。在细胞质中，由Dicer酶识别并切割pre－miRNAs双链的3＇末端及5＇末端，形成19～23 nt的小分子RNA，即成熟的miRNAs［8］。

成熟的miRNAs在细胞中通过RNA诱导沉默复合体发挥作用［9，10］。成熟miRNAs通过种子序列匹配而结合到靶mRNAs上，通过与3＇UTR完全或不完全互补结合，对靶mRNAs进行降解或抑制其蛋白翻译，从而抑制靶基因的表达，发挥其生物学作用（图1）。多个miRNAs可以协同调节单个靶基因，一个miRNA也可以调节若干个靶基因。因此，miRNAs和靶基因之间形成了复杂的调控网络，维系着细胞正常功能的运转。

图1 miRNAs的产生及作用机制

2 miRNAs与肿瘤基础研究

2.1 肿瘤细胞miRNAs表达差异及其机制与正常细胞相比，肿瘤细胞中有大量的miRNAs存在表达差异。miRNAs表达失调最先在慢性B淋巴细胞性白血病（B chronic lymphoblastic leukemia，B－CLL）中被发现。在50%～60%的BCLL患者中，定位于淋巴细胞染色体13q14位置上的miRNA－15和miRNA－16的2个基因有缺失或表达下调现象［3］。随后，在人类多种肿瘤中都检测到miRNAs表达水平的变化。另有研究［12］分析了取自乳腺、结肠、肺、前列腺、胰腺、胃等6种常见肿瘤的标本和正常组织对照，发现研究的228个miRNAs中，有26种miRNAs表达上调，表达下调的只有17种。在甲状腺乳头状癌中，miRNA－221、miR NA－222和miRNA－146表达显著上调［12］。儿童Burkitt淋巴瘤及霍奇金淋巴瘤中，miR NA－155／BIC的前体出现高表达［13］。Bloomston等［14］对胰腺癌miRNAs表达谱进行分析，共发现21个miRNAs表达上调，4个miRNAs表达下调。miR NA－125b、miR NA－145、miR NA－21和miR NA－155在乳腺癌中均出现表达下调［15］。miR NA－143和miR NA－145在结肠肿瘤中均表达下调［16］。miR NA－21在肝癌、乳腺癌、恶性胶质瘤以及胰腺癌中均出现高表达［17－23］。这些发现表明miRNAs的差异表达在肿瘤发病中具有重要作用，有望用于肿瘤诊断。

miRNAs在肿瘤组织中为什么会出现表达失调？其机制目前已发现至少有4种：（1）许多miRNAs基因被证实定位在肿瘤相关的基因组区域，即位于基因组中易伴随肿瘤发生的变异区域。Calin等［24］研究了186个miRNAs在人类染色体上的定位与肿瘤发生的相关性，发现50%的miRNAs基因频繁地出现在与肿瘤相关的基因区域或是脆性位点上，如纯合性缺失区、杂合性缺失区、扩增区、断裂点区、靠近抑癌基因或癌基因的部位等；（2）miRNAs转录水平的调控。如miRNA－34家族是抑癌基因p53的直接转录调控靶标［25］。miR NA－17－92多顺反子基因受原癌基因c－myc的调控［26］；（3）miRNAs表达的表观遗传调控。细胞发生恶性转化的表观遗传标志包括：DNA整体甲基化水平异常、CpG岛甲基化以及组蛋白修饰失调等。表观遗传调控异常会影响miRNAs的表达水平。在乳腺癌细胞中，组蛋白去乙酰化酶受抑制会引起miRNAs表达水平出现广泛而迅速的改变［27］。用组蛋白去乙酰化酶的抑制物4－苯丁酸和5－氮杂脱氧胞苷联合作用于膀胱癌细胞后检测313个miRNAs表达情况，发现有17个miRNAs出现3倍以上的表达上调，其中miRNA－127的表达水平变化最大［28］。miRNAs也可调控外在体系的表达。miRNA－148直接作用于DNA转甲基酶Ⅲ，催化DNA的甲基化［29］；miR NA－1调控组蛋白转甲酰基酶Ⅳ，而后者是一个重要的组蛋白修饰物［30］；（4）与miRNAs加工相关的基因及其蛋白异常变化。对非小细胞肺癌（non－small cell lung cancer，NSCLC）患者的大规模研究发现，在部分NSCLC中Dicer蛋白出现下调，而Drosha蛋白水平没有发生改变。Dicer酶的失效与miRNAs表达下调相关［31］。上述几种机制可独立发挥作用，也可以协同作用。另外，miRNAs和mRNA之间的黏合性也可因突变或多态性受到影响，并干扰其转录过程。研究［32］已发现miR NA－146前体上存在G／C单核苷酸多态性位点，该位点可影响miRNAs的成熟效率，并与肝细胞癌的发病风险相关。

2.2 miRNAs参与肿瘤发生发展过程正常细胞的生长、增殖、发育、分化和死亡是高度有序的过程，这一过程发生紊乱可导致肿瘤的产生。miRNAs在肿瘤发生发展的各个阶段均发挥了重要作用。

细胞增殖异常是肿瘤的重要特征，miRNAs可调控与细胞增殖相关的基因，改变细胞的正常周期，从而诱发了肿瘤。Yu等［33］研究发现，let－7可调节H－RAS和HMGA2基因而影响乳腺癌起始细胞的自我更新能力，从而影响乳腺癌细胞的成瘤能力。let－7还可通过下调pan－RAS、N－RAS和K－RAS，从而抑制胶质瘤细胞增殖［34］。miR NA－155是由人BIC基因编码的miRNA，miR NA－155可通过抑制MAD1、MX11、ROX／MNT等基因的表达，促进MYC基因的活性，从而促进细胞增殖，并且过表达miR NA－155的转基因小鼠可出现B细胞异常增殖［35］。

抵抗凋亡也是促进肿瘤发展的重要因素。miR NA－15a／16、miR NA－34、miR NA－29等均可抑制BCL－2蛋白的表达，使肿瘤细胞抗凋亡能力增高［36－38］。在人类上皮性肿瘤细胞中过表达miR NA－143／145可抑制MDM2表达，通过干扰miRNAs－MDM2－p53环路可促进细胞凋亡［39］。

侵袭和转移也是恶性肿瘤发展的重要生物学特征，miRNAs广泛参与肿瘤侵袭转移过程的调控。miRNA－21是目前报道较多的可调控肿瘤转移的miRNA，其对乳腺癌、肝细胞性肝癌、胆管癌、食管鳞癌、前列腺癌、结直肠癌以及黑色素瘤细胞的转移均有促进作用［40－46］。miR NA－126参与调控非小细胞肺癌细胞的黏附、侵袭和迁移，这一过程可能是由接头蛋白Crk介导的［47］。Nakada等［48］通过微阵列和定量PCR技术，对肾透明细胞癌和嫌色细胞癌中的470个人类miRNAs进行检测，发现miR NA－141和miR NA－200c可能通过调控ZFHX1B而抑制E－钙黏蛋白的转录，进而影响肿瘤细胞的黏附和迁移。

新生血管的生成，可以为肿瘤生长提供营养和氧气。miRNAs可通过直接或间接调节肿瘤血管生成来影响肿瘤的进展。多个研究小组的报道都证实miRNAs可影响肿瘤血管生成。miR NA－221／222可通过负性调节c－kit的表达从而抑制脐带血管内皮细胞形成管的能力，也可通过下调eNOS抑制血管内皮细胞增殖和迁移［49，50］。miR NA－17－92簇可通过影响凝血酶敏感蛋白1的表达而调节血管生成［51］。

3 miRNAs与肿瘤的诊断、预后和治疗

miRNAs的表达具有明显的组织特异性和肿瘤发生的阶段特异性，肿瘤发生发展的不同阶段具有不同的miRNAs表达谱。miRNAs也可作为癌基因或抑癌基因参与肿瘤发生发展过程。因此，miRNAs在肿瘤的诊断和分类、预后判断以及治疗方面具有潜在的临床应用价值。

3.1 miRNAs与肿瘤诊断肿瘤细胞和正常细胞miRNAs表达谱的差别，以及不同类型肿瘤miRNAs表达谱的特异性，为肿瘤的诊断及鉴别诊断提供了非常有益的参考指标。Lu等［52］使用流式微球细胞分析技术表达谱的方法对334例样本中的217种人类miRNAs进行检测，发现miRNAs的表达谱可较准确地区分正常细胞和癌细胞，并可鉴别分化不良的肿瘤。miR NA－205及miR NA－21在胰腺导管腺癌中会出现过多表达，由于这两种miRNA表达的上调发生于胰腺导管细胞的表型改变，因此miR NA－205和miR NA－21被认为可以作为诊断胰腺导管腺癌的标志物［53］。Volinia等［3］聚类分析了363个来自于6种常见的实体瘤（乳腺癌、结肠癌、肺癌、胰腺癌、胃癌以及前列腺癌）以及177个正常对照样本，结果显示不同组织器官表达的miRNAs各异。

随着miRNAs检测手段的不断发展，近年来检测血液样本中miRNAs可以为癌症的诊断提供无创性的检测方法。相对肿瘤组织而言，外周血血清较易获得和检测，临床应用便捷，且miRNAs在血清中可长期稳定存在。因此，血清miRNAs表达谱检测有可能成为一种癌症无创诊断的手段。文献研究［54］发现，血清miR NA－92可用作结直肠癌的分子标志物，可以诊断Ⅰ～Ⅳ期的结直肠癌，灵敏度可达89%，特异性达到70%。血清中miR NA－141的表达水平可作为前列腺癌的诊断标志物［55］。目前，尽管miRNAs有助于临床肿瘤的诊断，但是距离真正应用于临床仍有很大距离，仍需大量临床病例资料的系统研究。

3.2 miRNAs与肿瘤预后利用恶性肿瘤中的miRNAs表达谱可鉴定出许多与癌症预后预测相关的信号。研究［20，56，57］显示，miR NA－21高表达的乳腺癌、结肠癌、前列腺癌患者预后较差。Takamizawa等［58］报道肺癌中let－7的表达水平下降，且与更低的术后存活率密切相关。在胰腺癌的miRNAs表达谱中，一共包含6个miRNAs的亚群，在有较长生存期的患者和24个月内死亡的患者中出现表达差异；另外，高表达miRNA－196a－2预示较差的预后［15］。Li等［59］报道，一个包括miR NA－10b、miR NA－21、miR NA－223、miR NA－338、let－7a、miR NA－30a－5p、miR NA－126这7个miRNAs在内的miRNAs谱可用于胃癌患者的生存预测。在肝癌中，miR NA－221的表达上调与患者更短的复发时间相关［60］。另有研究［61］发现，miR NA－199a／b－3p在肝癌患者中的低表达与较差的生存预后有关。以上研究说明，miRNAs表达谱不仅可以作为肿瘤的诊断标志，同时也可作为肿瘤的预后标志。

3.3 miRNAs与肿瘤治疗miRNAs在诸多肿瘤中表达的研究证实了miRNAs在肿瘤发生发展中的作用，并显示miRNAs有可能作为肿瘤治疗的新靶点。例如，Elyakim等［62］在原位移植肝癌细胞的小鼠腹腔内注射miR NA－191抑制物，40 d后发现实验组的移植瘤块明显比对照组小。利用慢病毒载体可将let－7导入乳腺癌干细胞，可以明显降低乳腺癌干细胞的体外自我更新能力和增殖能力，且显著抑制其体内成瘤和转移能力［33］。Kim等［63］发现，在乳腺癌细胞系及乳腺癌患者的癌组织中，miR NA－145与其靶基因如c－MYC、IGF－1R、Fascin－1表达量之间存在着负相关性。他们将腺病毒表达的miR NA－145导入乳腺癌细胞系以及乳腺癌小鼠进行体内外试验，发现腺病毒构建的miRNA－145均能抑制乳腺癌细胞的生长，而且miRNA－145与5－氟尿嘧啶联合使用显现出更加强烈的抑癌作用，因此研究者认为miR NA－145在乳腺癌的治疗中具有应用价值。将脂质纳米与miR NA－34a模拟物的制剂分别经瘤内和尾静脉注射入非小细胞肺癌荷瘤小鼠，均能有效抑制肿瘤的生长并诱导肿瘤细胞凋亡，且发现经尾静脉注射后小鼠瘤块更小［64］。

4 小结

miRNAs作为一类新的分子靶标显现出了广阔的应用前景。目前，miRNAs应用于肿瘤的治疗仍然存在许多难题和弊端。因为细胞内每个miRNA分子可调控上千个靶基因，所以单纯进行某些特定的miRNA转染及单纯对某一个内源性miRNA进行基因打靶或拮抗都可能会导致非特异性的靶基因mRNA的降解或转录后翻译阻遏，从而产生多种副作用。其次RNA不稳定，易降解。如何提高miRNAs治疗转染的高效性、稳定性及特异性等都是需要面对和解决的问题。以miRNAs为策略的抗肿瘤治疗为肿瘤的生物治疗开辟了新途径，但miRNAs从实验室到用于肿瘤的治疗应用还有很长的路要走。

1 BartelDP．MicroRNAs：genomics，biogenesis，mechanism，and function．Cell，2004，116：281－297．

2 LimLP，GlasnerME，YektaS，etal．Vertebrate microRNA genes．Science，2003，299：1540．

3 Volinia S，Calin GA，Liu CG，et al．A microRNA expression signature of human solid tumors defines cancer gene targets． Proc Natl Acad Sci USA，2006，103：2257－2261．

4 Voorhoeve PM，leSageC，SchrierM，etal．A genetic screen implicates miRNA－372 and miRNA－373 as oncogenes in testicular germ cell tumors．Cell，2006，124：1169－1181．

5 Johnson SM，GrosshansH，ShingaraJ，etal．Ras is regulated by the let－7 microRNA family．Cell，2005，120：635－647．

6 Lee RC，FeinbaumRL，AmbrosV．TheC．elegans heterochronic genelin－4 encodes small RNAs with antisense complementarity to lin－14．Cell，1993，75：843－854．

7 Reinhart BJ，SlackFJ，BassonM，etal．The21－nucleotidelet－7RNA regulates developmental timing in Caenorhabditis elegans．Nature，2000，403：901－906．

8 Cullen BR． Transcription and processing of human microRNA precursors．Mol Cell，2004，16：861－865．

9 Lund E，GuttingerS，CaladoA，etal．Nuclear export of microRNA precursors．Science，2004，303：95－98．

10 Kim VN．MicroRNA precursors inmotion：Exportin－5mediates theirnuclearexport．TrendsCell Biol，2004，14：156－159．

11 Calin GA，Dumitru CD，Shimizu M，et al．Frequent deletions and down－regulation ofmicro－RNA genesmiR－15 andmiR－16 at13q14 in chronic lymphocytic leukemia．Proc Natl Acad Sci USA，2002，99：15524－15529．

12 He H，Jazdzewski K，LiW，et al．The role ofmicroRNA genes in papillary thyroid carcinoma．Proc Natl Acad Sci USA，2005，102：19075－19080．

13 Metzler M，W ilda M，Busch K，et al．High expression of precursor microRNA－155／BICRNA in children with Burkitt lymphoma．Genes ChromosomesCancer，2004，39：167－169．

14 Bloomston M，FrankelWL，Petrocca F，etal．MicroRNA expression patterns to differentiate pancreatic adenocarcinoma from normal pancreas and chronic pancreatitis．Jama，2007，297：1901－1908．

15 Iorio MV，Ferracin M，Liu CG，et al．MicroRNA gene expression deregulation in human breast cancer．Cancer Res，2005，65：7065－7070．

16 MichaelMZ，O＇Connor SM，van HolstPellekaan NG，etal．Reduced accumulation ofspecificmicroRNAsin colorectalneoplasia．MolCancerRes，2003，1：882－891．

17 Connolly E，MelegariM，Landgraf P，etal．Elevated expression of the miR－17－92 polycistron andmiR－21 in hepadnavirus－associated hepatocellular carcinoma contributes to themalignant phenotype．Am J Pathol，2008，173：856－864．

18 Gramantieri L，Fornari F，Callegari E，etal．MicroRNA involvement in hepatocellular carcinoma．JCellMolMed，2008，12：2189－2204．

19 Qian B，Katsaros D，Lu L，etal．HighmiR－21 expression in breast cancerassociatedwith poordisease－freesurvival in early stagedisease and high TGF－beta1．BreastCancer ResTreat，2009，117：131－140．

20 Yan LX，Huang XF，Shao Q，et al．MicroRNA miR－21 overexpression in human breastcancer isassociated with advanced clinical stage，lymph node metastasis and patient poor prognosis．RNA，2008，14：2348－2360．

21 Chen Y，Liu W，Chao T，et al．MicroRNA－21 down－regulates the expression of tumor suppressor PDCD4 in human glioblastoma cell T98G．Cancer Letter，2008，272：197－205．

22 Gabriely G，Wurdinger T，Kesari S，et al．MicroRNA 21 promotes glioma invasion by targetingmatrixmetalloproteinase regulators．Mol Cell Biol，2008，28：5369－5380．

23 Lee EJ，Gusev Y，Jiang J，etal．Expression profiling identifiesmicroRNA signature in pancreatic cancer．Int JCancer，2007，120：1046－1054．

24 Calin GA，SevignaniC，Dumitru CD，etal．HumanmicroRNA genes are frequently located at fragile sitesand genomic regions involved in cancers．Proc Natl Acad SciUSA，2004，101：2999－3004．

25 He L，He X，Lim LP，etal．AmicroRNA componentof the p53 tumour suppressor network．Nature，2007，447：1130－1134．

26 He L，Thomson JM，Hemann MT，etal．AmicroRNA polycistron asa potentialhuman oncogene．Nature，2005，435：828－833．

27 ScottGK，MattieMD，Berger CE，etal．Rapid alteration ofmicroRNA levels by histone deacetylase inhibition．Cancer Res，2006，66：1277－1281．

28 Saito Y，Liang G，Egger G，et al．Specific activation ofmicroRNA－127with downregulation of the proto－oncogene BCL6 by chromatinmodifying drugs in human cancer cells．Cancer Cell，2006，9：435－443．

29 Duursma AM，Kedde M，Schrier M，et al．miR－148 targets human DNMT3b protein coding region．Rna，2008，14：872－877．

30 Datta J，Kutay H，Nasser MW，etal．Methylationmediated silencing of MicroRNA－1 gene and its role in hepatocellular carcinogenesis．Cancer Res，2008，68：5049－5058．

31 Karube Y，Tanaka H，Osada H，et al．Reduced expression of Dicer associated with poor prognosis in lung cancer patients．Cancer Sci 2005，96：111－115．

32 Xu T，Zhu Y，WeiQK，etal．A functionalpolymorphism in themiR－146a gene is associated with the risk for hepatocellular carcinoma．Carcinogenesis，2008，29：2126－2131．

33 Yu F，Yao H，Zhu P，etal．let－7 regulates self renewal and tumorigenicity ofbreastcancer cells．Cell，2007，131：1109－1123．

34 Lee ST，Chu K，Oh HJ，etal．Let－7microRNA inhibits the proliferation ofhuman glioblastoma cells．JNeurooncol，2011，102：19－24．

35 Costinean S，Zanesi N，Pekarsky Y，et al．Pre－B cell proliferation and lymphoblastic leukemia／high－grade lymphoma in E（mu）－miR155 transgenicmice．Proc Natl Acad Sci USA，2006，103：7024－7029．

36 He L，He X，Lim LP，etal．AmicroRNA componentof the p53 tumour suppressornetwork．Nature，2007，447：1130－1134．

37 Cimmino A，Calin GA，FabbriM，etal．miR－15 andmiR－16 induce apoptosis by targeting BCL2．Proc Natl Acad Sci USA，2005，102：13944－13949．

38 Xiong Y，Fang JH，Yun JP，etal．EffectsofmicroRNA－29 on apoptosis，tumorigenicity，and prognosis of hepatocellular carcinoma．Hepatology，2010，51：836－845．

39 Zhang J，Sun Q，Zhang Z，etal．Loss ofmicroRNA－143／145 disturbs cellular growth and apoptosisofhuman epithelial cancersby impairing theMDM2－p53 feedback loop．Oncogene，2013，32：61－69．

40 Zhu S，Wu H，Wu F，etal．MicroRNA－21 targets tumor suppressor genesin invasion andmetastasis．CellRes，2008，18：350－359．

41 Meng F，Henson R，Wehbe－Janek H，etal．MicroRNA－21 regulates expression of the PTEN tumor suppressor gene in human hepatocellular cancer．Gastroenterology，2007，133：647－658．

42 Selaru FM，Olaru AV，Kan T，et al．MicroRNA－21 is overexpressed in human cholangiocarcinoma and regulates programmed cell death 4 and tissue inhibitor of metalloproteinase 3．Hepatology，2009，49：1595－1601．

43 Hiyoshi Y，Kamohara H，Karashima R，et al．MicroRNA－21 regulates the proliferation and invasion in esophageal squamous cell carcinoma．Clin CancerRes，2009，15：1915－1922．

44 LiT，LiD，Sha J，etal．MicroRNA－21 directly targetsMARCKSand promotes apoptosis resistance and invasion in prostate cancer cells．Biochem BiophysRes Commun，2009，383：280－285．

45 Asangani IA，Rasheed SA，Nikolova DA，etal．MicroRNA－21（miR－21）post－transcriptionally downregulates tumor suppressor Pdcd4 and stimulates invasion，intravasation and metastasis in colorectal cancer．Oncogene，2008，27：2128－2136．

46 Yang CH，Yue J，Pfeffer SR，etal．MicroRNAmiR－21 regulates the metastatic behavior of B16 melanoma cells．JBiol Chem，2011，286：39172－39178．

47 Crawford M，Brawner E，Batte K，et al．MicroRNA－126 inhibits invasion in non－small cell lung carcinoma cell lines．Biochem Biophys ResCommun，2008，373：607－612．

48 Nakada C，Matsuura K，Tsukamoto Y，etal．Genome－widemicroRNA expression profiling in renalcell carcinoma：significantdown－regulation ofmiR－141 andmiR－200c．JPathol，2008，216：418－427．

49 Poliseno L，Tuccoli A，Mariani L，et al．MicroRNAsmodulate the angiogenic propertiesofHUVECs．Blood，2006，108：3068－3071．

50 Suarez Y，Fernandez－Hernando C，Pober JS，etal．Dicer dependent microRNAs regulategeneexpression and functions in human endothelial cells．Circ Res，2007，100：1164－1173．

51 Suarez Y，Fernandez－HernandoC，Yu J，etal．Dicer－dependentendothelialmicroRNAs are necessary for postnatal angiogenesis．Proc Natl Acad SciUSA，2008，105：14082－14087．

52 Lu J，GetzG，Miska EA，etal．MicroRNA expression profiles classify human cancers．Nature2005，435：834－838．

53 du Rieu MC，Torrisani J，Selves J，et al．MicroRNA－21 is induced early in pancreatic ductal adenocarcinoma precursor lesions．Clin Chem，2010，56：603－612．

54 Ng EK，ChongWW，Jin H，etal．Differential expression ofmicroRNAsin plasmaofpatientswith colorectal cancer：a potentialmarker for colorectalcancerscreening．Gut，2009，58：1375－1381．

55 Mitchell PS，Parkin RK，Kroh EM，et al．CirculatingmicroRNAs as stable blood－based markers for cancer detection．Proc Natl Acad Sci USA，2008，105：10513－10518．

56 Roldo C，Missiaglia E，Hagan JP，etal．MicroRNA expression abnormalities in pancreatic endocrine and acinar tumorsare associated with distinctive pathologic features and clinical behavior．JClin Oncol，2006，24：4677－4684．

57 Schetter AJ，Leung SY，Sohn JJ，etal．MicroRNA expression profiles associated with prognosisand therapeutic outcome in colon adenocarcinoma．JAMA，2008，299：425－436．

58 Takamizawa J，Konishi H，Yanagisawa K，et al．Reduced expression of the let－7 microRNAs in human lung cancers in association with shortened postoperative survival．Cancer Res，2004，64：3753－3756．

59 LiX，Zhang Y，Zhang Y，etal．Survival prediction of gastric cancer byaseven－microRNA signature．Gut，2010，59：579－585．

60 Gramantieri L，Fornari F，Callegari E，etal．MicroRNA involvement in hepatocellular carcinoma．JCellMolMed，2008，12：2189－2204．

61 Hou J，Lin L，Zhou W，et al．Identification ofmiRNomes in human liver and hepatocellular carcinoma revealsmiR－199a／b－3p as therapeutic target for hepatocellular carcinoma．Cancer Cell，2011，19：232－243．

62 Elyakim E，Sitbon E，Faerman A，etal．hsa－miR－191 isa candidate oncogene target for hepatocellular carcinoma therapy．Cancer Res，2010，70：8077－8087．

63 Kim Seok－Jun，Oh Ji－Sun，Shin Ji－Young，et al．Development of microRNA－145 for therapeutic application in breast cancer．JControlled Release，2011，155：427－434．

64 Wiggins JF，Ruffino L，Kelnar K，etal．Developmentofa lung cancer therapeutic based on the tumor suppressor microRNA－34．Cancer Res，2010，70：5923－5930．

2013－12－15）

（本文编辑：杨军）

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266003 青岛市，青岛大学附属医院病理科

10．3969／j．issn．1674－7151．2014．01．001