水相比色法测定游离酚含量

方铭岳 马海东 邵宇政 王 彬

（汕头市质量计量监督检测所，广东 汕头 515000）

某些特定材质的食品和饮料的容器在使用过程中可能会释放出对人体有害的游离酚，我国对这类材质的容器浸泡液中游离酚的浓度有明确的限制。

4-氨基安替吡啉比色法测定游离酚含量具有较好的灵敏度和准确度，是国家标准中规定的浸泡液微量游离酚的检验方法。大部分容器内壁涂料浸泡液所含游离酚浓度较低，因此用以比色的标准系列溶液也相应地配制成较低的浓度。在这种情况下，为了保证一定的灵敏度，不得不使用氯仿萃取显色反应产物以提高其浓度。氯仿具有较强的挥发性和一定的毒性，在使用中难免带来各种不便，例如萃取过程必须控制一致的时间以避免溶剂挥发程度的不同，操作过程检验人员需采取防护措施，另外，若有机相干燥不彻底易形成乳浊液影响吸光度。为了避免上述问题，需要定量提高浸泡液中游离酚的浓度。由于苯酚具有挥发性，在浓缩的过程中应加入NaOH调节pH值将其定量转化为酚钠以避免蒸发水分时苯酚的流失。

1 实验部分

1.1 仪器

紫外可见分光光度计 酸式滴定管 蒸馏瓶 各规格移液管、容量瓶

1.2 试剂

同GB/T 5009.69-2008比色法部分

1.3 改进后方法与原方法的比较

1.3.1 实验过程

待测液的准备：配制三种浓度（0.01μg/mL、0.05μg/mL、0.12μg/mL）苯酚水溶液（用标定后的苯酚标准使用液加无酚水稀释而成）

样品浸泡液（按GB/T 5009.69浸泡方法准备）

将上述四种溶液分成等体积（各250mL）的两份待用

标准系列溶液的配制及待测液的处理

方法1

标准曲线制备：将标定后的苯酚标准使用液在25mL容量瓶中配制成以下浓度水溶液（0μg/mL、0.4μg/mL、0.8μg/mL、1.6μg/mL、2.4μg/mL、3.2μg/mL、4.0μg/mL、6.0μg/mL），依次加入缓冲液，4 氨基-安替吡啉溶液，铁氰化钾溶液各1.00mL，每加入一种溶液后应充分摇匀，放置10min后用零管调节零点，于波长460nm处测定吸光度，绘制标准曲线。

浸泡液游离酚的测定：向各待测液加入1.0gNaOH，溶解后移入蒸馏瓶，在蒸馏装置中蒸至剩余20mL左右体积，往蒸馏瓶中加入一滴甲基橙指示剂，滴加浓磷酸（约2mL）至溶液呈橙红色，酸化完成后加入5mL硫酸铜溶液，继续蒸馏操作，另取25mL容量瓶，加入0.5mLNaOH溶液（4g/L）,将接收管插入液面下收集馏出液，将馏出液定容至标线（若馏出液不足25mL，可往蒸馏瓶补充少量无酚水继续蒸馏）。显色过程与标准曲线制备步骤进行相同操作，显色完毕后在紫外可见分光光度计测定460nm处的吸光度。

方法2

（对照实验）按照国标方法完成标准系列溶液的配制和样品浸泡液的测试。

1.3.2 实验结果与讨论

方法1测试结果：

表1 方法1标准曲线数据值

编号 标准溶液游离酚浓度μg/mL 吸光度41.6 0.269652.4 0.331063.2 0.392474.0 0.451086.0 0.5962 Y=0.0758X+0.1459 r=0.9998

表2 各待测液测试结果

方法1与原方法对照试验结果：

表3 样品浸泡液测试结果

2 分析与讨论

（1）从测试结果可看出，在适当浓度水溶液中，安替吡啉和游离酚显色反应的标准曲线在460nm波长处仍能很好地符合朗伯-比尔定律，可对该浓度范围内的游离酚进行定量分析，准确性、重现性良好；

（2）采用改进后的方法测定游离酚，可在蒸馏浸泡液的步骤通过调节溶液pH实现对浸泡液游离酚的有效浓缩与定量转移，馏出液可在显色反应后直接比色测得浓度值，经过以下公式简单换算得出原浸泡液游离酚浓度，结果准确可靠。情况需要时甚至可以用非整数比浓缩的馏出液比色和进行浓度换算。

c1=c2V2/V1

c1：浸泡液游离酚浓度（μg/mL）

c2：馏出液游离酚浓度实测值（μg/mL）

V1：浸泡液体积（mL）

V2：馏出液体积（mL）

（3）用原方法对新方法进行比较，结果表明改进后的方法操作简单可行，节省时间，而且结果准确。

3 结语

改进前的比色法测定游离酚过程十分繁琐、费时费力，给检验工作带来了不小的困扰，采用简化后的方法，不仅节省了一定的时间、避免接触挥发性有毒溶剂氯仿，而且在实际测定中体现了良好的准确性，希望该方法能为日后的检验工作提供一些参考。