朝医方千金文武汤提取工艺优化

2014-04-08杨金葳通讯作者郭建鹏

中国民间疗法 2014年3期

杨金葳林莹通讯作者：郭建鹏

（1.长春金赛药业有限责任公司，吉林长春130012 2.长白山生物资源与功能分子教育部重点实验室（延边大学））

目前临床使用朝医经典方剂千金文武汤（《东医四象新编》）用于治疗糖尿病（Diabetes mellitus，DM）具有显著疗效。本文以该方剂药味中共有活性部位总黄酮的提取量为指标，优选最佳提取工艺。

仪器与试药

UV-2201型紫外可见分光光度计（日本岛津制作所）；FA2004型电子天平（上海良平仪器仪表有限公司）；芦丁（购自中国药品生物制品检验所，批号：818-9401）；药材为：葛根（Pueraria lobata［willd.］ohwi）、黄芩（Scutellaria baicalensis Georgi）、山药（Dioscorea opposita Thunb.）、麦门冬（Ophiopogon japonicus［Thumb.］Ker-Gawl.）、五味子（Schisandra chinesis［Turcz.］Bail）、桔梗（Platycodon grandiflorum［Jacq.］A.DC.）、白芷（Angelica dahurica［Fisch.ex Hoffm.］Benth.et Hook.f.）；水为纯水，其他试剂均为分析纯。

方法与结果

1.处方分析：千金文武汤处方由葛根、山药、黄芩、麦门冬、五味子、桔梗、白芷七味药组成，具有补肺敛肺、润燥化痰、生津解表的功效，主要用于太阴人下消，小便不禁等证［1］，目前朝医临床常用其治疗DM。方中主药葛根中黄酮类成分葛根素［2］、黄芩中黄酮类成分黄芩苷［3，4］有明确降血糖或降血脂作用。故以葛根、黄芩为主，结合其他药味，选择总黄酮为该方剂提取的指标成分。

总黄酮含量测定方法学考察：采用紫外分光光度法，建立总黄酮含量的测定方法［5］。

2.溶液的配制。

对照品溶液：精密称取干燥至恒重的芦丁5.7mg，用适量水溶解后定容至100ml，即得。

样品溶液：称取处方量药材，加入12倍量水浸泡1h，加热煎煮提取1h，滤过，再加入10倍量水提取1h，滤过，合并滤液，定容至1 200ml，即得。

供试品溶液：精密吸取样品溶液1ml于蒸发皿中，加1g聚酰胺粉吸附，于恒重干燥箱中，50℃挥干溶剂，转入层析柱，用30 ml石油醚洗脱，弃石油醚，再用30ml甲醇洗脱总黄酮，收集洗脱液，减压蒸干，残渣用甲醇溶液溶解并定容至25ml即得。

3.线性关系的考察：精密量取对照品溶液1、2、3、4、5、6、7、8、9、10 ml至10 ml容量瓶中，用水定容，在256nm处测定吸光度。以吸光度值（Y）对浓度（X）进行回归，得到其回归方程。结果表明，对照品溶液浓度与吸光度值呈良好的线性关系。

4.精密度考察：精密量取上述对照品溶液，重复测定5次，RSD为0.77%，表明仪器精密度良好。

5.稳定性考察：精密量取同一供试品溶液，分别于0、2、4、8、12、24h进行测定，RSD为0.91%，表明供试品溶液在24h内稳定。

6.重现性考察：精密称取同一批样品溶液5份，按供试品溶液项下制备，按上述方法测定，RSD为0.95%，表明本法重现性良好。

7.加样回收率考察：精密量取已知含量的样品溶液共6份，分别精密加入对照品适量，按供试品溶液项下制备，测定，计算回收率。本法平均回收率为97.77%，RSD为1.54%，表明本法准确度较好，方法可行。

8.样品浓度与吸光度线性关系考察：精密量取1ml样品溶液，用蒸馏水定容至50 ml，分别精吸1、2、3、4、5ml置10ml容量瓶中，用蒸馏水定容，在256nm处测吸光度值。以吸光度值（Y）对浓度（X）进行回归，得其回归方程。结果表明，样品浓度与吸光度值呈良好的线性关系，表明以总黄酮含量作为样品测定指标合理、可行。