PPARγ对胎盘发育作用的研究进展※

吴 珊,杨丽莎,谢 杨,左剑波,蔡文杰，薛立群

（1.湖南农业大学动物医学院,湖南长沙410128；2.湖南省畜牧兽医研究所，湖南长沙410131）

PPARγ对胎盘发育作用的研究进展※

吴 珊1,杨丽莎1,谢 杨1,左剑波2,蔡文杰2，薛立群1

（1.湖南农业大学动物医学院,湖南长沙410128；2.湖南省畜牧兽医研究所，湖南长沙410131）

PPARγ属于配体依赖性核受体转录因子，是调节目标基因表达的核受体转录因子超家族成员，对胎盘的发育及其血管的发生具有重要的作用。本文综述了近些年来人们在PPARγ与胎盘发育方面取得的研究进展，重点介绍了PPARγ的基本特性以及对胎盘发育及胎盘血管生成的调节作用。

胎盘；发育；PPARγ；畜牧；研究进展

在畜牧生产中，多胎动物的窝产仔数性能具有重要的经济价值。它主要受到情期排卵数、子宫容量及胎盘效率等因素的影响。在排卵数和子宫容量因素相对稳定的情形下，妊娠个体间胎盘发育的差异性可能导致胎盘效率的不同。胎盘是胎儿在母体内生长发育的重要器官。胎儿通过胎盘血液循环系统，与母体之间完成气体、营养物质以及代谢产物的转运与交换。鉴于胎盘的发育及血管化程度决定了胎盘效率，人们试图利用有限的子宫容量，通过提高胎盘效率，增加子宫的空间效应与营养供应能力，扩大多胎动物的产仔效率。随着人们对胎儿及其胎盘发育研究的不断深入，新发现过氧化物酶体增殖物激活受体(peroxisome proliferator-activated receptor,PPARs)对胎盘的发育及其血管的发生具有重要的作用。相关研究不仅为探讨胚胎发育迟缓或胚胎死亡的机制提供新理论视角，也为提高多胎动物窝产仔性能提供理论指导。

1 过氧化物酶体增殖物激活受体(PPARs)

PPARs属于配体依赖性转录因子,是调节目标基因表达的核受体转录因子超家族成员。根据结构的不同，PPARs可分为 PPARα(NR1C1)、PPARβ/δ(NR1C2)和 PPARγ(NR1C3)三种类型，分别由各自的基因编码。PPARs的3种亚型在结构、功能、组织学分布上均有差异，其中PPARγ广泛分布在脂肪组织、心脏、肝脏、胰腺、脾脏、胃肠等组织中，具有多种生物学作用，参与调节脂质代谢、免疫细胞活化、组织重构、血管发生、类固醇生成等生理活动。此外，研究还发现，PPARγ在胎盘中也有大量表达，在胎盘发育及胎盘血管的形成等过程中发挥重要作用。

PPARs的活性受配体调节。PPARs与配体结合而被激活，能够与核受体视黄醛衍生物X受体（RXR）聚合成为异源二聚体，进而结合到靶基因启动子区域的PPAR反应元件（PPRE）上，调控靶基因的转录，产生特定的生物学效应。PPARs的配体物质可分为内源性配体和外源性的配体。内源性配体物质主要来源于体内形成的多不饱和脂肪酸、类花生酸（8-HETE，PGJ2，PGA1，PGI2，Leukotriene B4）、溶血磷脂酸、氧化低密度脂蛋白。外源性配体物质包括一些植物的药用成分和人工合成的化学制剂与药物等，例如植物的金雀异黄素，治疗糖尿病的噻唑烷酮类化合物（Thiazolidinediones,TZD）或格列酮类（罗格列酮、曲格列酮、吡格列酮等），贝特类降脂药，一些非甾体抗炎镇痛药物（如消炎痛、布洛芬）等。

2 PPARγ与胎盘发育

研究表明，PPARγ在胎盘组织中呈现高表达，并在胎盘发育中起到重要作用，影响滋养层细胞的增殖与分化。研究发现，啮齿动物中PPARγ在胎盘海绵滋养层细胞和迷路滋养层细胞中大量表达（Barak Y等,1999；Asami-Miyagishi R等，2004），PPARγ 的缺失可引起胎盘发育异常。BARAK等学者的研究发现，缺失PPARγ基因的小鼠胚胎出现严重的胎盘缺陷，胚胎在发育第10天死亡；但通过嵌合恢复PPARY基因的胚胎可以修复胎盘发育缺陷，胚胎正常发育至出生（Barak Y等,1999）。这种PPARγ缺失小鼠的胎盘发育出现胎盘迷路区变小，血管无渗透功能，母体的血窦扩张破裂；迷路滋养层细胞不能正常分化，海绵滋养层细胞异常地吞噬母体红细胞等病理学变化。同样，在缺失PPARγ的异源共聚体RXRα的小鼠中也观察到类似的变化并发生胚胎死亡（Sapin et al.,1997）。

在人胎盘组织中PPARγ主要在滋养层细胞中表达，出现在绒毛滋养层细胞（VCT）、合体滋养层细胞（ST）、绒毛外滋养层细胞（EVCT）和锚定绒毛部位的滋养细胞柱，参与调节滋养层细胞的分化与侵袭。体外细胞实验表明，PPARγ具有诱导滋养层细胞分化作用（Schaiff,WT等,2000），可以抑制绒毛外滋养层细胞的侵袭和迁移（Tarrade,A等,2001）。人的许多妊娠疾病是因胎盘滋养层细胞的分化及功能异常所致，如先兆子痫、胎儿生长迟缓等。在人的胎盘中被活化的PPARγ可以诱导滋养层细胞的脂质沉积，绒毛的细胞滋养层细胞分化，抑制滋养层细胞侵袭。PPARγ和RXR激动剂单独或联合使用可增加初级滋养细胞的脂质吸收和积聚（SchaiffWT等,2006）；活化的PPARγ可刺激胎盘细胞滋养层细胞分化为绒毛滋养层细胞，增强其内分泌功能,进而调节细胞滋养层细胞分化及侵入等过程,利于胎盘形成和发育。然而，母胎界面集聚的氧化低密度脂蛋白（LDLs）含有PPARγ激动剂和高水平的肝X受体 (LXR)的配体（羟固醇），胎盘集聚过多的氧化低密度脂蛋白可能导致子痫前期的发生（Fournier T等,2008）。此外，体内诱导激活PPARγ可以影响胎盘形态的变化以及脂肪酸的聚集使胎儿生长迟缓（Schaiff等，2007）。因此，母胎界面配体过度激活PPARγ将损害着床、胎盘化和胚胎发育（Fournier T等,2011）。

PPARγ在其他动物组织如妊娠围植入期猪子宫组织、猪子宫绒毛膜、狗胎盘和母羊的胎盘子叶都有较高的表达，提示它们在妊娠过程可能发挥着重要作用（孔路军等，2006；Lord 等，2006；Zhu等，2010；Kowalewski等，2011）。研究发现，妊娠母猪子宫内膜有PPARγ表达，妊娠25天子宫内膜PPARγ1 mRNA水平比妊娠15天明显升高；在发情周期第15天、妊娠第15天和25天的子宫内膜以及妊娠25天的胚胎滋养层细胞中都能检测到PPARγ 1的表达（Kowalewski等，2011）。

3 PPARγ与胎盘血管的发生

胎盘是哺乳动物胎儿发育的重要器官，胎儿和母体之间依赖于胎盘血液循环完成气体交换，获取营养物质和排泄代谢产物。因此，胎盘血管的形成对于胎盘循环的建立以及胎儿的生长发育是十分关键的。通过血管发生（vasculogenesis）和血管生成（angiogenesis）过程，母体胎盘和胎儿胎盘分别形成广泛的血管网系统，建立胎盘血液循环系统。在胎盘及其血管的发育中，血管发生是从成血管细胞开始形成血管结构的过程，滋养层与胚外体腔中胚层结合形成指状突起原始绒毛，继而中胚层分化出血管和结缔组织而发展为绒毛，成为与母体进行物质交换的胎儿胎盘部分。在这一过程中，首先是绒毛的间充质细胞分化形成血管内皮祖细胞和造血前体细胞，经过这些细胞增殖、迁移、条索状聚集和细胞群裂隙的出现，分别形成原始的毛细血管管腔以及血液。此外，随着尿囊迅速生长抵达滋养层，尿囊血管以血管生成方式将血管及血流引入尿囊所接触区域的绒毛，形成血管网络。与此同时，随着胚胎及胎儿发育对子宫血液供应需求的增加，母体胎盘血管系统相应发生血管扩张、通透性增强并生成新的血管，伸入胎盘结构形成致密血管网或与母体血池相连，发展为与胎儿胎盘血管系统互为独立的母体胎盘血管系统。在胎盘血管化的过程中，多种血管生成调节因子以及相应受体，如血管内皮生长因子家族(VEGFs)、成纤维生长因子家族(FGFs)、缺氧诱导因子(HIF)以及血管生成素(Ang)等参与血管生成的调节。近些年来人们新发现PPARγ参与血管生成的调节，与胎盘血管生成有密切关系。

在促血管生成的过程中，血管内皮生长因子（VEGF）发挥着重要作用，包括激活血管内皮，引起细胞外基质重构、内膜细胞迁移、增殖和分化，使之新血管形成。然而，在PPARγ功能研究中发现，PPARγ激动剂曲格列酮和环格列酮在体外实验中可以抑制瘦素激活Akt的磷酸化，抑制VEGF诱导人脐静脉血管内皮细胞的迁移（Goetze S等,2002.；Hamblin M等,2009)。研究还发现，PPARγ在血管内皮细胞中表达，抑制一些生长因子介导的血管内皮细胞增殖并引起凋亡（Law RE等，2000；Marx N等,1999）。体外实验显示，PPARγ激动剂配体可以抑制血管内皮细胞增殖、迁移以及平滑肌细胞、单核细胞和某些肿瘤细胞的生长，表明PPARγ具有抑制血管新生作用（Kim KY等,2006；Scoditti E等,2010)。在人脐静脉内皮细胞中，促使PPARγ mRNA和蛋白表达的同时，PPARγ配体（15-deoxy-d-12,14-prostaglandin J2和噻唑烷二酮类药物）抑制血管内皮细胞的增殖和小管形成，抑制VEGF受体和尿激酶纤溶酶原激活物表达，增加尿激酶纤溶酶原抑制物（PAI-1）表达,产生抑制VEGF诱导血管生成的作用（Xin X等,1999；Bourcier MN等,1999）。同样也发现，药物曲格列酮和罗格列酮等作为PPARγ配体物质可以抑制VEGF诱导的牛血管内皮细胞的增殖、迁移和小管形成。在动物试验中人们也观察到，胎盘缺失PPARγ的情况下，小鼠胎盘的发育和滋养层分化发生异常,胎盘的促血管生长因子（如Prl2c2）表达增加，胎盘的血管发生出现异常现象。此外，在妊娠的野生型小鼠中也发现，经PPARγ激动剂罗格列酮处理后，胚胎生长发育迟缓，胎盘只有少量清晰可见的血管，胎盘组织也遭到破坏，形态异常，胎盘中来自母体的血红细胞显著减少，胎盘和胚胎的发育生长均受到了损伤（Karim Nadra等,2010）。PPARγ的抗血管生成的作用机制较复杂，包括抑制VEGF受体和尿激酶纤溶酶原激活物的表达，抑制Akt的磷酸化和一氧化氮（NO）的产生与细胞凋亡，增加尿激酶纤溶酶原抑制物（PAI-1）的表达等。有研究认为，PPARγ可因抑制VEGF的作用而产生抗血管生成作用，阻断VEGF通过PKCα（蛋白激酶Cα）依赖性途径诱导CREB(环磷腺苷效应元件结合蛋白)调节COX-2表达的作用（Egeria Scoditti等,2010）。研究也发现，PPARα和PPARγ的激动剂通过VEGF依赖性机制刺激血管的发生(Biscetti F等,2008)，并与增加VEGF的表达和加强内皮一氧化氮合成酶(eNOS)和蛋白激酶Akt的磷酸化的有关。PPARγ的激动剂也可以通过对内皮祖细胞的作用促进血管生成。无疑，血管生成过程十分复杂，可能还涉及多重尚不了解的调节途径。PPARγ激活血管生成的网络化作用依赖于不同途径之间的相互作用和串扰，也包括其它PPAR亚型作用之间的平衡。

胎盘血管生成过程严格受一些促血管生成和抗血管生成分子相互作用的调节，特异性作用于血管内皮细胞，如血管内皮生长因子（VEGF）和小鼠或大鼠催乳素超家族的Prl2c2和Prl7d1。研究表明，Prl2c2在小鼠胎盘滋养层巨细胞中表达，是主要的血管生成因子，对体外培养的内皮细胞具有趋化诱导作用，在体内可以刺激新血管的形成。此外，Prl2c2主要刺激植入期母体蜕膜组织重组和血管生长。相反，巨细胞和成胶质细胞层表达的Prl7d1具有抑制血管生成的作用，是主要的抗血管生成因子。在PPARγ缺失的小鼠中发生胎盘Prl2c2升高和Prl7d1降低的变化，这种PPARγ缺失与Prl7d1降低的一致性变化被认为与PPARγ缺失情况下巨细胞和成胶质细胞发育受限有关；相反，Prl2c2在PPARγ缺失胎盘中升高，但在PPAR激动剂罗格列酮处理的胎盘中Prl2c2降低并抑制胎盘血管生长，说明PPARγ对Prl2c2的表达具有直接抑制作用（Karim Nadra等,2010）。因此，Prl2c2和Prl7d1之间的平衡受到严格控制，以避免出现与病理性血管生成相关的胎盘生长异常。

如上所述，胎盘血管生成的过程对于胎盘循环的建立以及胎儿的生长发育是十分关键的.胎盘血管发育异常造成的胎儿发育不足，是胎儿发育延缓的重要原因。因此，深入研究PPARγ对胎盘及其血管发育的调节作用具有重要意义和价值。□

［1］ Asami-Miyagishi R,Iseki S,Usui M,Uchida K,Kubo H,Morita I.Expression and function of PPARgamma in rat placental development[J].Biochem Biophys Res Commun,2004，315：497-501.

［2］ Barak Y,Nelson MC,Ong ES,Jones YZ,Ruiz-Lozano P,Chien KR,et al.PPAR gamma is required for placental,cardiac,and adipose tissue development[J].Mol Cell,1999，（4）:585-595.

［3］ Biscetti F,Gaetani E,Flex A et al.Selective activation of peroxisome proliferator-activated receptor(PPAR)a and PPARγ induces neoangiogenesis through a vascular endothelial growth factor-dependent mechanism[J].Diabetes,2008,57(5):1394-1404.

［4］ Bourcier MN,Sukhova GK,Libby P,Plutzky J.PPAR-gamma activation in human endothelial cells increases plasminogen activator inhibitor type-1 expression:PPARgamma as a potential mediator in vascular disease[J].Arterioscler Thromb Vasc Biol,1999,19:546-551.

［5］ Egeria Scoditti,Marika Massaro，et al.,PPARγ agonists inhibit angiogenesis by suppressing PKCa-and CREB-mediated COX-2 expression in the human endothelium[J].Cardiovascular Research,2010,86:302-310.

［6］ Fournier T,Guibourdenche J.PPARγ and human trophoblast differentiation[J].J Reprod Immunol.2011,90(1):41-49.

［7］ Fournier T,Thérond P，PPARgamma and early human placental development[J].Curr Med Chem.2008,15(28):3011-3024.

［8］ Goetze S,Bungenstock A,Czupalla C et al.Leptin induces endothelial cell migration through Akt,which is inhibited by PPARg-ligands[J].Hypertension，2002，40:748-754.

［9］ Hamblin M,Chang L,Fan Y,Zhang J,Chen YE.PPARs and the cardiovascular system[J].Antioxid.Redox Signal.2009,11(6):1415-1452.

［10］ Karim Nadra,Laure Quignodon,et al..PPAR in Placental Angiogenesis[J].Endocrinology,2010,151(10):4969-4981.

［11］Marx N,Bourcier T,Sukhova GK,Libby P,Plutzky J.PPARγ activation in human endothelial cells increases plasminogen activator inhibitor type-1 expression:PPARγ as a potential mediator in vascular disease[J].Arterioscler Thromb Vasc Biol.,1999,19:546-551.

［12］Khrystyna Levytska,Sascha Drewlo,Dora Baczyk,and John Kingdom .PPARγ Regulates Trophoblast Differentiation in the BeWo Cell Model[R].PPAR Research,2014,1-13.

Q78；S814.8

A

1006-4907（2014）03-0003-04

10.3969/j.issn.1006-4907.2014.03.002

※注：本论文得到国家自然科学基金项目（编号：31172377）的资助。通讯作者：薛立群。

2014-02-23