1例小肠结肠炎耶尔森菌人畜感染情况研究

刘 谊，冯建远，李燕春，刘莉莉，祁 腾，周子人

小肠结肠炎耶尔森菌是一种肠道致病菌，在世界范围内常有报道它污染食品和水的案例[1]。在临床上会引起腹泻、小肠结肠炎、肠系膜淋巴腺炎、反应性关节炎、结节性红斑和霉菌性动脉瘤[2-3]。上个世纪80年代中国爆发过2次超过500人的小肠结肠炎耶尔森菌感染事件[4]。其存在广泛的动物宿主，猪是人类最普遍的感染源[5-8]。小肠结肠炎耶尔森菌有很多动物宿主，包括猪、牛、山羊、狗和老鼠，致病的血清型只有O∶3 和O∶9[9]。小肠结肠炎耶尔森菌在四川省的感染情况如何，研究报道却较少。为此，我们于2010-2011年对四川省家猪、腹泻病人等样品进行了专项监测，发现1例幼儿小肠结肠炎耶尔森菌感染病例，其病原特点与病患老家猪分离株显示了较高的同源性，现将结果报道如下。

1 材料与方法

1.1标本来源 腹泻病人来源于郫县监测哨点医院，共150例，猪咽拭子222份采集于绵阳市。

1.2主要仪器试剂 PCR仪(美国ABI公司)，脉冲场电泳仪(BIORAD)，凝胶成像仪(BIORAD)，改良磷酸盐缓冲液(PBS)(北京陆桥)，耶尔森菌选择琼脂(CIN)(美国BD公司)，尿素培养基(日本荣研化学株式会社)，API 20E(梅里埃)。

1.3方法 样品通过PBS缓冲液4 ℃增菌20 d，利用CIN选择培养基和API 20E分离鉴定细菌，通过PCR方法[10]鉴定ail、ystA、ystB(位于染色体)[9]、yadA、virF(位于质粒)[12]、rfbc(位于wbb基因簇)[13]、foxA[14]等毒力基因。利用脉冲场凝胶电泳(PFGE)对分离到的小肠结肠炎耶尔森菌进行分子分型[11]。

2 结 果

2.1腹泻病人检测 2010-2011年从郫县150例腹泻病人中分离到Y.e3株，其中1株血清型为O∶3，生物型为3型，该菌株是2011年1月12日从一幼儿体内分离到的，经过5个月时间连续采集大便样，在1月12日和3月24日的样品中分别分离到O∶3血清型小肠结肠炎耶尔森菌(见表1)。在5月18日和6月15日样品中没有分离到Y.e，并且这2次样本PCR检测也为阴性。分离株的毒力基因结果见表1。

表1 小肠结肠炎耶尔森菌毒力基因检测结果

2.2溯源研究 经流行病学调查，该患儿老家在四川绵阳市，发病前10 d回过绵阳老家，刚好我省2010年在绵阳市进行了畜间小肠结肠炎耶尔森菌感染情况调查，2010年9月在绵阳市采集猪咽拭子99份，分离到菌株9株，12月绵阳市采集猪咽拭子123份，分离到菌株5株，血清型都是O∶3，生物型都是3型，毒力基因检测结果ail、ystA、yadA、virF、rfbc、foxA都是阳性，ystB阴性，这与幼儿体内分离到的Y.e毒力基因一致。脉冲场凝胶电泳结果表明从该幼儿体内分离到的Y.e与四川省绵阳市家猪体内分离到的2株Y.e完全同源，PFGE基因型没有差异，与另外12株菌同源性大于93%(见图1)。

图1 小肠结肠炎耶尔森菌脉冲场电泳(PFGE)结果

3 讨 论

郫县幼儿在2011年元旦节回到绵阳市农村老家，接触过家猪，在1月12日患水便样腹泻。我们在3月24日、5月18日和6月15日连续采集幼儿粪便。特别是从3月24日这次的样品分离到小肠结肠炎耶尔森菌，说明了该幼儿去医院治愈腹泻后的一段时间内，Y.e还是存在于他的体内，通过实验数据可以看出这个时间至少有2个月，表明小肠结肠炎耶尔森菌会存在于治愈病人的体内，而不会引起宿主的腹泻症状。

从患儿大便中分离到的小肠结肠炎耶尔森菌不管是血清型、生物型还是毒力基因(表1)都跟猪体内分离到的Y.e都一样，通过PFGE试验也表明从幼儿体内分离到的2株小肠结肠炎耶尔森菌与绵阳家猪分离到的2株小肠结肠炎耶尔森菌完全同源(图1)。因而推测，人通过接触，家猪将小肠结肠炎耶尔森菌传染给了人，同时流行病学上调查结果也得到佐证，解释了这个病例的传染来源。

因此，该病例是很特殊并且很有价值。我们证实了小肠结肠炎耶尔森菌从家猪传染给人的过程，且小肠结肠炎耶尔森菌会存在于治愈患儿的体内，而不会引起宿主的腹泻，至于成人会不会也有这种情况尚不得而知。对于小肠结肠炎耶尔森菌存在于治愈患儿体内但又不会引起腹泻的原因及机理，需要在以后的工作中进一步研究。

参考文献：

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[10]Wang X, Qiu H, Jin D, et al. O∶8 serotypeYersiniaenterocoliticastrains in China[J]. Int J Food Microbiol, 2008, 125(3): 259-266. DOI: 10.1007/s10096-009-0773-x

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