血清胰蛋白酶原2在诊断急性胰腺炎中的临床应用价值

崔婷婷，张 莉，曹建彪，吴琦玮，郭汉斌

(1.首都医科大学石景山教学医院 北京市石景山医院消化内科，北京 100043； 2.解放军北京军区总医院全军肝病治疗中心，北京 100700)

急性胰腺炎是临床常见的腹痛原因之一，至今既无特异性临床症状，也没有任何诊断方法是金标准[1]，常以上腹剧痛、背部放射痛，恶心、呕吐等为主诉入院[2]，多数患者痊愈后，胰腺功能和机构可恢复正常，但约20%病情凶险[3]，病死率高达10%～20%[4]。淀粉酶是当前实验室用于诊断急性胰腺炎的常用检测项目，其活性增高大于或等于正常上限的3倍支持急性胰腺炎诊断，但约25%患者入院时淀粉酶无明显增高[2]，且其他急腹症中亦可有淀粉酶升高，故单纯应用血清淀粉酶容易造成急性胰腺炎的漏诊或误诊。国外有研究表明,急性胰腺炎患者血清胰蛋白酶原2明显升高，约为正常人的50倍，提示其可作为急性胰腺炎的诊断指标[5]。本研究旨在应用ROC曲线分析血清胰蛋白酶原2用于诊断急性胰腺炎的临床价值。

1 资料与方法

1.1一般资料 选自2009年12月至2011年6月在解放军北京军区总医院和2011年6月至2012年2月在北京市石景山医院就诊患者，收集发病<12 h、未经生长抑素治疗的74例急性胰腺炎患者血清标本，为急性胰腺炎组。急性胰腺炎组男44例、女30例，年龄19～86(47.1±18.2)岁。入组患者均依据《中国急性胰腺炎诊治指南(草案)》[3]诊断标准，明确诊断为急性胰腺炎，并同期选取于石景山医院门诊行健康体检的就诊人员85例为健康对照组。健康对照组男48例、女37例，年龄19～81(42.1±18.9)岁，入组者均无上消化道症状及腹部器质性疾病病史；无代谢性疾病，无心、肺、肝、肾和神经、精神疾病及酗酒、药瘾等不良嗜好，并除外妊娠及哺乳期妇女。本研究经解放军北京军区总医院、北京市石景山医院伦理委员会伦理审查批准，所有受试者均签署知情同意书。

1.2方法

1.2.1标本收集 入组患者均留取空腹静脉全血，标本采集后于2～8 ℃冷藏保存<2 d，经1000×g离心10 min后取血清分装至EP(eppendorf)管内，于-70 ℃冻存备用，统一检测。

1.2.2血清胰蛋白酶原2定量检测 检测前8 h将冻存标本放置于4 ℃冷藏室解冻，检测前1 h取出至室温，常规酶联免疫吸附试验操作流程(双抗体夹心法)检测。胰蛋白酶原2检测试剂盒(由北京永瀚星港生物技术有限公司惠赠)，酶标仪为全自动多功能酶标仪(芬兰雷勃公司生产，型号：Multiskan MK3)。上述各项操作均严格按照试剂盒说明书要求进行。

1.2.3统计学方法 应用SPSS 16.0统计软件进行数据分析，采用探索性分析计算中位数、四分位数、全距，应用Wilcoxon 秩和检验分析两组间血清胰蛋白酶原2水平差别，并计算血清胰蛋白酶原2鉴别健康对照组、急性胰腺炎组的灵敏度、特异度，应用受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线，找出最佳截断点(ROC曲线最左上方的点)，计算ROC曲线下面积AUC(area under curve)。通常ROC曲线下面积为<0.5时，认为该指标无诊断价值；>0.9时，表示诊断准确性较高，诊断准确性与曲线下面积呈正比。

2 结 果

2.1两组血清胰蛋白酶原2水平比较 急性胰腺炎组血清胰蛋白酶原2水平高于健康对照组，差异有统计学意义(Z=-10.87，P<0.01)(表1)。

表1 急性胰腺炎组和健康对照组血清胰蛋白酶原2水平的检测值 (μg/L)

2.2血清胰蛋白酶原2鉴别急性胰腺炎组和健康对照组的灵敏度和特异度 以点[SEN 0.9，(1-SPE0.00)]，为最佳临界点，其对应的临界值为2.55 μg/L，曲线下的面积为0.982(P<0.01)，此时血清胰蛋白酶原2鉴别急性胰腺炎组和健康对照组的灵敏度和特异度分别为90%和100%(图1)。

AUC=0.982,P<0.01,拒绝无效假设(AUC=0.5)

3 讨 论

目前临床上急性胰腺炎诊断主要依靠临床特点及淀粉酶、腹部CT诊断(急性胰腺炎特征性腹痛；血清淀粉酶活性增高大于或等于正常上限3倍；急性胰腺炎特征性影像学表现)，但约10%的急性胰腺炎患者临床症状不典型[6]，且老年人及伴有意识失常、意识障碍的患者腹痛则无法评估，且淀粉酶特异度较差，在重症胰腺炎、高脂血症相关性胰腺炎、慢性酒精摄入者、较晚入院患者灵敏度较低[7]，而腹部超声则易受进食、胃肠道积气影响，常难以做出准确判断。胰腺CT检查准确性较高，且可以反映胰腺炎严重程度，但其价格较高，限制了作为常规应用手段诊断急性胰腺炎。由于以上各种局限性，急性胰腺炎时有漏诊、误诊或延迟诊断，而对于重症胰腺炎，早期、及时的诊断对于改善预后、减少病死率至关重要。因此，近年来研究者们不断致力于寻找简单、便捷、经济且准确度较高的诊断方法。胰蛋白酶原2是一种相对分子质量为25×103的蛋白质，绝大部分以胰腺腺泡酶原的形式分泌到胰液中，在肠内被肠激酶激活，变成高活性的其他消化酶的激活剂。胰腺中的胰蛋白酶原2水平很高，但血液中胰蛋白酶原2水平很低，因为正常情况下，仅有很小的一部分漏到血循环中。当急性胰腺炎时胰腺组织受损明显，胰蛋白酶原2大量入血，血中胰蛋白酶原2水平随之升高[8]，胰腺组织受损越严重，漏入血液循环中的胰蛋白原2越多，检测水平越高[9]。本研究结果显示，健康对照组血清中存在少量的胰蛋白酶原2，急性胰腺炎组胰蛋白酶原2水平显著高于健康对照组，与上述理论相符。本试验健康对照组、急性胰腺炎组中位数与既往国外文献报道[5]数值略有不同，考虑与人种、试验方法、标本采集时机不同等因素相关。根据ROC曲线，选取灵敏度+特异度最大所对应的点，即以2.55 μg/L为临界值，此时血清胰蛋白酶原2鉴别急性胰腺炎、正常人的灵敏度和特异度分别为90%和100%，结合临床症状，高度怀疑急性胰腺炎者，可进一步完善腹部CT检查明确诊断。

综上所述，血清胰蛋白酶原2有可能作为急性胰腺炎诊断参考指标之一，另外血清胰蛋白酶原2检测操作简单快速，无创性，经济，便于临床初筛，且本试验中可观察到重症急性胰腺炎血清胰蛋白酶原2浓度显著高于轻度胰腺炎，提示其可用于鉴别急性胰腺炎严重程度，可进行进一步临床研究。

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