TCT与传统涂片在尿脱落细胞学检测中的对比研究

李红全 唐颛

膀胱癌是常见恶性肿瘤之一，膀胱镜和尿脱落细胞学检查是膀胱癌早期诊断或(和)随访监测的“金标准”;但膀胱镜检查的创伤性和传统尿脱落细胞学的低敏感度对诊断的作用受到限制;人们对非创伤性或高敏感性的诊断方法越来越感兴趣;液基薄层细胞学检测(thin-layer cytologital test，TCT)在妇科肿瘤筛查中广泛应用，大大提高妇科肿瘤细胞的检出率和诊断的准确性，但在尿液的应用的相关文献极少。本文就尿TCT制片与传统涂片对肿瘤细胞的诊断价值进行探讨分析，总结如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 收集2008年4月至2013年4月我院门诊和住院膀胱癌疑似患者268例，其中男176例，女92例;平均年龄60.2岁;所有病例均有不同程度血尿和(或)尿频、尿痛等与膀胱肿瘤相关的症状;经膀胱镜和组织病理学证实为膀胱恶性肿瘤68例。

1.2 仪器与试剂 Cytoprep-1离心机(长沙英泰仪器有限公司)，液基薄层细胞制片试剂(广州江元医疗科技有限公司)。

1.3 方法

1.3.1 嘱患者收集早晨第二次新鲜中段尿液100 ml以上，立即送检，连续3 d;采用配对设计方法，将每次尿液标本分为两份，随机进入TCT组和传统涂片组。

1.3.2 TCT方法:将标本置于4℃的冰箱内10 min，轻轻倒去一部分，保留50 ml，分别置于等量的两个离心管中，加入适量50%乙醇和冰醋酸混合溶液(1∶1)，离心5 min(2 000 r/min)，弃上清液，用吸管吸取尿沉渣，按1∶4的体积比例加入保存液，震荡混匀后静置10 min以上，弃清液，震荡离心管，行TCT制片，苏木精伊红染色，镜检。

1.3.3 传统涂片方法:将标本放置于4℃的冰箱内10 min，轻轻倒去一部分，保留50 ml，分别等量置于两个离心管中，离心5 min(2 000 r/min)，弃上清液，用吸管吸取尿沉渣均匀涂片，潮干后置于95%乙醇固定15 min，苏木精伊红染色，镜检。

1.4 质量评估与细胞学诊断 两者制片质量评估分满意和不满意;参照Ordon等［1］报道的标准，每张涂片以保存完好和形态清晰、上皮数量＞50个做为满意标准;诊断标准参照《诊断细胞病理学》［2］，采用4级分类法，诊断结果分为无异常细胞、非典型细胞、可疑恶性细胞和恶性细胞;统计分析时把前两种结果归为阴性诊断，后两种为阳性诊断;连续3次标本见1次及以上阳性即为阳性;所有标本均由同一位病理医师诊断。

1.5 统计学分析 应用SPSS 17.0统计软件，计数资料采用χ2检验，P＜0.05为差异有统计意义。

2 结果

2.1 标本满意率 TCT标本满意768例次，不满意36例次，满意率95.5%(768/804);传统涂片满意693例次，不满意111例次，满意率86.2%(693/804);TCT满意率明显高于传统涂片，差异有统计学意义(P＜0.01)。见表1。

表1 TCT与传统涂片标本满意率结果对比 例次(%)

2.2 TCT和传统涂片检查细胞学诊断结果对比

TCT检出:恶性细胞37例，可疑恶性细胞29例，非典型细胞25例，无异常细胞177例，阳性检出率24.6%;传统涂片检出:恶性细胞33例，可疑恶性细胞24例，非典型细胞27例，无异常细胞184例，阳性检出率22.0%;TCT阳性检出率高于传统涂片，差异有统计学意义(P＜0.01)。见表2。

表2 TCT与传统涂片检查细胞诊断结果对比 例(%)

2.3 TCT和组织病理学诊断结果 选取细胞学和组织病理学标本均满意，有明确诊断结果196例;TCT的敏感度 73.5%(50/68)、特异度 99.2%(127/128)。见表3。

表3 TCT与组织病理学结果对比 例(%)

2.4 传统涂片和组织病理学诊断结果 选取细胞学和组织病理学标本均满意，有明确诊断结果196例;传统涂片的敏感度为66.2%(45/68)、特异度99.2%(127/128)。见表4。

表4 传统涂片与组织病理学结果对比 例(%)

3 讨论

膀胱癌是最常见的恶性肿瘤之一，位居世界肿瘤第7位，发病率占癌症总数的3.2%［3］;早期诊断比较困难［4］，膀胱镜和尿脱落细胞学检查是诊断、随访监测膀胱癌的“金标准”;但膀胱镜检查为创伤性操作，易引患者不适并可能导致尿路感染;尿传统细胞学检查虽然特异度高，但低敏感度，因此对膀胱癌诊断的作用受到一定限制;Arora等［5］报道，其敏感度为65.8%，特异度为100%;国内叶见波等［6］报道敏感度为65%，特异度为99.3%，本研究结果尿传统细胞学敏感度为66.2%，特异度为99.2%;与前二者报道的敏感度及特异度相近。因此人们对非创伤性和高敏感度的诊断方法越来越感兴趣;TCT是20世纪90年代发展起来的一项细胞检测新制片技术，目前广泛用于妇科宫颈肿瘤筛查，并逐步扩展到细胞学检测的其他领域，如尿脱落细胞［6，7］;本研究结果 TCT 制片的敏感度为73.5%，高于传统涂片;特异度99.2%;TCT制片与传统涂片的特异度的差异无统计学意义(P＞0.05)。Niedworok等［8］研究尿传统涂片检测对高级别尿路上皮癌的诊断敏感度3次分别为85.9%、83.6%、89.2%;国内陈岳等［9］研究结果传统涂片检测对高级别尿路上皮癌的诊断敏感性高，低级别敏感性低;本研究结果TCT制片与传统涂片两者对高级别尿路上皮癌的敏感度都高于低级别;可能与低级别尿路上皮癌脱落的癌细胞异型性小，并且数量较少，造成诊断困难有关;近年部分学者运用尿液膀胱肿瘤标志物(如核基质蛋白22等)检测证实可进一步提高敏感度［10，11］。

TCT比传统涂片敏感度高的原因如下:(1)尿脱落细胞收集方式，TCT标本经离心沉淀后置于专用保存液中，使细胞几乎100%保留。(2)在细胞保存液中含有固定剂、细胞分离提取剂等成分，它不但可以除去尿中的大部分血细胞、炎性细胞及碎片等非诊断杂质，还可以及时固定并保持尿中细胞的原始形态结构。(3)在制片过程中，采用标准化的操作，避免手工操作的随意性;经过梯度离心，自然沉降等过程进一步分离血细胞、炎性细胞等杂质;同时因病变细胞比正常细胞比重大，沉降速度快，靠细胞表面的张力均匀分布，与玻片形成稳固的结合;因此TCT制片大大提高了对病变细胞的捕获能力，并细胞单层排列，防止脱片或白片;(4)TCT制片的湿固定法使细胞核结构更清晰;同时TCT制片使细胞固定在较小的范围内，便于阅片者观察，不易形成视力疲劳。(5)在传统制片尿中细胞不能完全保留，丢失部分诊断细胞;不能有效除去非诊断杂质，细胞过度重叠，干扰诊断;涂片视野大，阅片者易形成视力疲劳等。

尿TCT与传统制片标本的质量评估均暂无统一标准;沈周俊等［11］报道的标准为:尿涂片标本要求保存完好，形态结构晰，上皮数＞50个;本研究两组标本均参照此标准，尿传统涂片的满意度为86.2%，TCT标本满意度为95.5%，结果表明TCT组的满意度明显高于传统涂片组，组间比差异具有统计学意义(P＜0.01)。

综上所述，尿TCT制片标本满意度和敏感度明显高于传统涂片，两者的特异度相同;TCT在尿脱落细胞学检查中的应用值得推广。

1 Ordon M，Boemer S，Zlotta AR，et al.The fate of an unsatisfactory unine cytology test among patents with urothelial carcinoma.BJU Int，2009，104:1641-1645.

2 马正中主编.诊断细胞病理学.第1版.郑州:河南科学技术出版社，2000.218-227.

3 (美)埃布尔(Eble，J.N.)原著.泌尿系统及男性生殖器官肿瘤病理学和遗传学.冯晓莉译.北京:北京人民出版社，2006.96-98.

4 Hogervorst JG，Schouten LJ，Konings EJ，et al.Dietary acry lam ide in take and the risk of renal cell，bladder，and prostate cancer.Am J Clin Nutr，2008，87:1428-1438.

5 Arora VK，Sarungbam J，Bhatia A，et al.Usefulness of NMP22 as an adjunct to a typical urine cytology and low-grade urothelial carcinoma.Diagn Cytopathol，2010，38:56-58.

6 叶见波，朱有凯，周祥祯，等.尿液基细胞学与传统细胞学对膀胱癌诊断价值的比较.现代肿瘤医学，2010，18:2209-2211.

7 Piaton E，Faynel J，Hutin K，et al.Conventional liquid-based techniques versus cytyc thin preparation processing of urinary samples:a qalitative approach.BMC Clin Pathol，2005，5:9-16.

8 Niedworok C，Rembrink V，Hakenberg OW，et al.The value of urinary cytology in the diagnosis of high grade urothelial tumors.Urologe A，2009，48:1018，1020-1022，1024.

9 陈岳，徐勇，王锦，等.晨起第一次新鲜中段尿用于膀胱癌细胞学诊断的临床价值.中华泌尿外科杂志，2010，31:700-703.

10 Song JM，Du LL，Zhao XW，et al.Expression and clinical singnificance of nuclear matrix protein 22 and cytokeratin 18 in transitiomal cell carcinoma of the bladder.Zhonghua Zhong Liu Za Zhi，2009，31:274-277.

11 沈周俊，胡明明.膀胱癌尿液肿瘤标志物的研究和应用现状.临床外科杂志，2009，17:726-728.