羊水脱落细胞巴氏小体探究

陈劼

(汉川市仙女山医院，湖北 汉川431600)

巴氏小体又称性染色体或X小体，是由雌性哺乳动物体细胞中失活的X染色体在间期细胞核中呈异固缩状态(染色质高度螺旋化)，形成直径约1μm，贴近于核膜边缘的染色小体[1]。正常男女之间的X染色质存在差异。

1 材料与方法

1.1 标本来源 2013年5月至2013年6月本单位妇产科正常分娩及剖宫产孕妇羊水。

1.2 仪器与试剂 10ml玻璃试管，离心机，玻片，显微镜，30ml棕色滴瓶，固定液(95%甲醇：冰乙酸＝3：1)，石炭酸复红染液(原液：碱性复红3g+70%乙醇100m l待用。应用液：取5%石炭酸18m l，原液2ml，冰乙酸2ml，甲醛2ml依次加入棕色滴瓶内混匀存放一星期后备用)。

1.3 检测方法

1.3 .1制片 以临床经验丰富的妇产科医生留取本院正常分娩及剖宫产孕妇羊水，每人10m l(要求无血液污染)，随机留取40份样本。羊水注入10ml玻璃试管，离心机2000r/min离心10 min，弃去上清液，保留沉淀细胞并加入固定液5ml固定30 min，再次同样转速离心10 min，弃上清液，用乳头吸管吸取沉淀细胞滴于洁净的玻片之上，制片1～3块，室温或37℃培养箱干燥。

1.3 .2染色 把石炭酸复红应用液滴于制备好的细胞膜片上，染色5～30min(视染液存放时间而定)，然后用95%酒精冲洗脱色至看不到兰色染料溢出为止，自然干燥。

1.3 .3镜检 一张成功的高质量脱落细胞染色片镜下细胞质几乎不着色，高倍镜下间期细胞核层次清晰，核膜轮廓完整，核紫红色。可计数细胞：核相对较大，核质呈均匀沙粒状及网状，无细菌杂质覆盖。含巴氏小体细胞的胞核内有一个约1.2μm×0.7μm大小、常附着膜边缘或靠近内侧呈深紫红色卵圆形凸形或三角形的浓缩染色质块，镜检100个可计数细胞中碰到的巴氏小体细胞，算出百分率。

2 结果

男胎巴氏小体≤3%有22例，8%≤女胎≤36%有15例，3%＜巴氏小体＜8%之间有3例其中男胎1名，女胎2名，见表1。

表1 40例标本中巴氏小体分布情况

3 讨论

文献记载口腔黏膜细胞中，巴氏小体百分率男性≤5%，18%≤女性≤42%[2]。本试验结果中男胎巴氏小体≤3%有22例，8%≤女胎≤36%有15例，女胎巴氏小体明显低于文献，从表中可以看出男女巴氏小体百分率仍呈现出明显分界线，说明羊水脱落细胞巴氏小体与胎儿性别密切相关[3]，准确率达92.5%，只是与口腔黏膜细胞判断标准不一样。尤其两者中间出现的3%＜巴氏小体＜8%过渡值，其间男胎女胎均有，此区间不可以作为判断的依据。出现以上差异，有可能与实验对象及材料不同有关，其次镜检者的实际经验，对可数细胞的认定不一样，也可出现差异，口腔间期细胞较多，羊水脱落细胞退化程度较高，间期细胞相对较少，也是出现差异的因素。染色方法的不同也会有百分率的不同[4]，胎儿染色体本身有可能异常[5]以至于出现羊水脱落细胞巴氏小体男女百分率与口腔黏膜细胞巴氏小体百分率的不一致。此外可运用孕妇血浆中胎儿游离DNA进行无创伤性产前基因诊断对此结论进行认证[6]。

[1]杨大祥.遗传学实验[M].第2版.北京:科学出版社,2010:113-119.

[2]陈凡国,候丙凯.巴氏小体案例在遗传学教学中的应用[J].遗传,2012,34(4):503-508.

[3]熊立凡.临床检验基础[M].第3版.北京:人民卫生出版社,2005:284.

[4]李桂英.两种X染色质检查方法的比较[J].现代医生,2008,24(13):2248-2249.

[5]于松,金镇.胎儿染色体疾病及单基因疾病侵入性产前诊断[J].中国实用妇科与产科杂志,2008,24(2):94-95.

[6]喻琼,邓志辉.利用孕妇血浆中胎儿游离DNA进行无创伤性产前基因诊断的研究进展[J].实验与检验医学,2012,30(1):1-3.