超声提取虎杖中大黄素的工艺研究

倪友香纪乐军

（1 江苏省金湖县食品药品监督管理局，江苏 金湖 211600；2 江苏神华药业有限公司，江苏 金湖 211600）

超声提取虎杖中大黄素的工艺研究

倪友香1纪乐军2

（1 江苏省金湖县食品药品监督管理局，江苏 金湖 211600；2 江苏神华药业有限公司，江苏 金湖 211600）

目的 研究虎杖中大黄素超声法提取工艺。方法 通过正交试验考察料液比、酒精浓度、提取时间3个因素，以提取浸膏得率和大黄素含量为评价指标，采用加权评分法进行综合评价分析。结果 超声提取虎杖中大黄素的最佳工艺参数为：料液比1∶10、酒精浓度80%、提取时间60 min，在此条件下进行提取，干膏得率最高可达18.87%，干膏中大黄素含量最高可达0.69%。结论 超声提取虎杖中大黄素提取时间短、提取率高。

超声提取；虎杖；大黄素

虎杖系蓼科蓼属多年生草本植物Poligonum Cuspidatum Sieb eucc的根和根茎[1]，又称假川七、土川七、红三七、三七或日本蓼。微苦，微寒。归肝、胆、肺经。根、茎用药，有活血散痰、祛风解毒、消炎止痛、去湿热黄疸、治慢性气管炎、降低血脂等功效。虎杖中含有多种有效成分，包括蒽酮类、黄酮类等化合物[2]。其中蒽酮类化合物的主要代表为大黄素。临床研究表明虎杖中的大黄素具有抗肿瘤、抗微生物[3]、免疫调节、降压功效等多种药理作用[4,5]。

超声提取（也称为超声波萃取）是近几年发展起来的一种中药提取新技术，由于其提取温度低、提取率高、提取时间短的独特优势被普遍应用于各种中药材有效含量的提取，是替代传统剪切工艺方法实现高效、节能、环保式提取的现代高新技术手段[6]。

1 材料与仪器

1.1 材料：大黄素对照品（含量测定用），中国药品生物制品检定所；甲醇，色谱醇；三氯甲烷、硫酸等其他为分析纯；水为超纯水；虎杖，安徽市亳州恒诚医药有限公司，经检测合格。

1.2 仪器：SY-超声波提取器，上海宁商超声仪器有限公司；FA22048万分之一天平，上海精密科学仪器有限公司；DZF-0B型真空干燥箱，上海跃进医疗器械厂；RE-52AA旋转蒸发器，上海亚荣生化仪器厂；LC-10AT高效液相色谱仪，日本岛津。

2 方法与结果

2.1 试验方法：选出料液比（A）、乙醇浓度（B）和提取时间（C）三个试验因素，每个因素分3个水平（表1），设计正交试验。药材粉碎后按照试验设计进行提取，提取结束后进行离心分离。离心滤液进行减压浓缩至稠膏，放入真空烘箱中进行减压干燥至干膏。计算干膏得率并检测干膏中大黄素的含量[7,8]。

表1 因素水平表

2.2 评价指标的确定：以大黄素含量和干膏得率作为综合评价指标，采用加权评分法进行综合评价。以大黄素含量为主要指标，权重系数取0.6，干膏得率为辅助指标，权重系数取0.4，综合评分=（大黄素含量/最高大黄素含量）×100×0.6+（干膏得率/干膏最高得率）×100×0.4[9]。2.3 大黄素含量测定方法[10]

2.3.1 色谱条件。填充剂：十八烷基硅烷键合硅胶；流动相：甲醇-0.1%磷酸溶液（80∶20）；检测波长：254 nm；柱温：25 ℃。

2.3.2 对照品的制备：大黄素对照品24 h减压干燥，精密称定，加入甲醇，制成每1 mL含48 μg的溶液，即得。

2.3.3 供试品溶液的制备：取干膏粉碎，过40目筛，取粉末约0.1 g，精密称定，精密加入三氯甲烷25 mL和2.5 moL/L硫酸溶液20 mL，称定重置，80 ℃水浴回流2 h，放冷至室温，再称定重置，应三氯甲烷补足减失的重量，摇匀。分取三氯甲烷液，精密量取10 mL蒸干，残渣加甲醇使溶解，转移至10 mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，过滤，取滤液即得。

2.3.4 样品含量的测定：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5 μL，注入液相色谱仪，测定，即得。

表2 超声提取正交试验设计及结果

2.4 试验结果：见表2。

由表2中的极差分析可以看出，影响超声提取虎杖中大黄素的主要因素为提取时间，其次为酒精浓度，料液比影响不大。因此虎杖超声提取工艺定为：提取时间60 min，提取酒精浓度80%，由于料液比影响不大，因此为了节约酒精用量，选用1∶10的料液比。由此确定工艺为A1B3C3。

2.5 验证试验：为考察上述工艺参数的稳定性，设计验证试验进行工艺验证，取虎杖三等份，加入10倍80%的酒精，提取60 min，提取液过滤，滤液减压浓度至稠膏，稠膏在真空烘箱中进行减压干燥，计算三批干膏得率和大黄素含量，结果见表3。

表3 3批工艺验证试验

3 结 论

通过料液比、酒精浓度和提取时间三因素三水平正交试验研究得出，超声提取虎杖中大黄素的最佳工艺条件：料液比为1∶10，提取时间60 min，提取酒精浓度为80%。在此条件下进行提取，干膏得率最高可达18.87%，干膏中大黄素含量最高可达0.69%。

[1] 杨秀贤,王昕.从虎杖中提取大黄素的生产工艺[J].天津市医药科学研究所,1996,27(2):87.

[2] 刘树兴,程丽英.虎杖有效成分的开发现状及展望[J].中国食品添加剂,2004,15(6):80-82.

[3] 刘晓蓉.虎杖提取物抑菌作用的研究[J].广州食品工业科技,2003,19(3):18-20.

[4] 张喜平.大黄素的药理作用研究概况[J].中国药理学通报,2003, 19(8): 851.

[5] 阳崇德,张秀贤.大黄素的药理研究进展[J].中国药业,2003,12(3):78-79.

[6] 秦梅颂.超声提取技术在中药中的研究进展[J].安徽农学通报,2010,(13):54-56.

[7] 赵瑞芝,袁小红.均匀设计法优选虎杖提取工艺[J].中国医药学杂质,2006,26(1):17-18.

[8] 胡春霖,正可利.超声波法虎杖中总黄酮提取工艺研究[J].宝鸡文理学院学报,2013,33(4):1-8.

[9] 陈飞龙,谭晓梅.正交试验法优选沈爽片提取工艺的研究[J].中药材,2009,32(1):129-131.

[10] 国家药典委员会.中华人民共和国药典2010年版一部[M].中国医药科技出版社,2010:194-195.

The Research for Ultrasonic Extraction of Emodin in Giant Knotweed

NI You-xiang1, JI Le-jun2
(1 Jinhu Food and Drug Administration, Jinhu 211600, China; 2 Jiangsu Shenhua Pharmaceutical Co., Ltd., Jinhu 211600, China)

Objective To study the ultrasonic extraction of emodin in giant knotweed. Methods Examined the solid-liquid ratio, alcohol concentration, extraction time, three factors through the orthogonal experiments. The evaluation index is extract dry ointment yield and the content of emodin. Using the weighted scoring method for comprehensive evaluation analysis. Results Ultrasonic extraction of emodin in the giant knotweed optimum technological parameters are: solid-liquid ratio 1∶10; alcohol concentration 80%, extraction time 60 min. Under this condition, the dry ointment yield up to 18.87%, the content of emodin up to 0.69%. Conclusion Ultrasonic extraction of emodin in giant knotweed, shorten the time and increase the yield.

Ultrasonic extraction; Giant knotweed; Emodin

R286.1

：B

：1671-8194（2014）31-0020-02