液基细胞学检查与人乳头状瘤病毒检测及阴道镜联合应用对宫颈癌诊断的临床研究

陈金顺

（广东省同江医院妇产科，佛山 528300）

液基细胞学检查与人乳头状瘤病毒检测及阴道镜联合应用对宫颈癌诊断的临床研究

陈金顺

（广东省同江医院妇产科，佛山 528300）

目的 探讨液基细胞学检查(TCT)与人乳头状瘤病毒(HPV)检测及阴道镜联合应用对宫颈癌诊断的临床意义及应用价值。方法 回顾分析300例高危型HPV检测及TCT检查，对其中一项或两项异常者做阴道镜病理活检，宫颈上皮内瘤变（CIN）及以上病变为病理阳性，对病理结果阳性患者进行结果分析。结果 单独HPV（H组）DNA检测阳性35例，病理结果阳性21例，符合率60.0%；单独TCT（T组）检查阳性33例，病理结果阳性24例，符合率72.7%；HPV及TCT检测（H+T组）均为阳性20例，病理结果阳性19例，符合率95.0%。与H组及T组比较，H+T组符合率差异有统计学意义（P＜0.01）。结论 HPV及TCT与阴道镜联合检测宫颈癌可大大提高早期诊断的检出率，值得临床推广。关 键 词：人乳头状瘤病毒；液基细胞学检查；宫颈癌；诊断

宫颈癌是常见的女性生殖道恶性肿瘤之一，其发病率在女性恶性肿瘤中仅次于乳腺癌，是引起妇女癌症死亡的重要原因之一[1]。宫颈癌是一个从宫颈上皮内瘤变（CIN）至早期浸润癌直至浸润癌的由量变到质变的连续发展过程，若能得到规范的筛查从而尽早发现和治疗，可阻断其向子宫癌的发展。近年来，宫颈癌的早期检测方法得到了明显的改进。本研究利用液基细胞学检查（TCT）与人乳头状瘤病毒（HPV）检测及阴道镜联合应用对宫颈癌进行诊断，并与单独检测组进行比较，评价其临床应用价值。现报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 对2013年1月—2013年12月入院的300例发现宫颈异常患者都进行HPV-DNA和TCT检测，对其中1～2项阳性者做阴道镜病理活检，并将结果进行对比分析，所有患者在检查前3 d未使用阴道内药物及做阴道冲洗；24 h内无性行为；在非经期检查，检查时不用润滑剂。患者年龄19～64岁，平均（35.5±9.8）岁。

1.2 方法

1.2.1 HPV-DNA检测 采用专用HPV样刷在患者宫颈管内旋转3周采集样本，置于保存液中，4℃保存，使用美国Digene公司的仪器，用第二代杂交捕获(hybrid capture，HC2)法检测13种高危型HPV，基因杂交捕获II代技术是在体外进行的核酸杂交，利用化学发光法，使微孔板信号扩增，对HPV病毒的DNA进行检测。高危型HPV包含16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59和68型共13种，阳性阈值为HPV-DNA≥1.0 pg/mL。

1.2.2 TCT检测 采用新柏式液基细胞学进行宫颈细胞学检查，取专用宫颈刷插入宫颈管内约1 cm，顺时针旋转5～6圈，收集宫颈外口和宫颈管的脱落细胞，放入细胞保存液中，将装有标本的小瓶放入新柏氏制片仪中，仪器自动混勾细胞，打散黏液，通过白色滤过膜，随机取样制片。95%乙醇固定，巴氏染色。在显微镜下进行阅片，依据TBS系统进行诊断分型[2]。具体包括：无上皮内病变或恶性病变(NILM)，不典型鳞状细胞(ASC)包括不能明确意义(ASC-US)和不除外上皮内高度病变(ASC-H)，不典型腺细胞(AGC)，鳞状上皮内低度病变(LSIL)，鳞状上皮内高度病变(HSIL)，鳞状细胞癌(SCC)和腺癌(AC)。TBS报告正常或炎症为细胞学阴性，ASCUS及以上病变为细胞学阳性。

1.2.3 电子阴道镜检查 暴露宫颈，拭净宫颈表面分泌物做初步观察，经醋酸试验、碘试验后在可疑部位取活检行病理组织学检查。镜下阅片，并进行诊断分级，根据细胞异常程度可分为CINⅠ级(指宫颈上皮细胞轻度不典型增生)、CINⅡ级(指中度不典型增生)、CINⅢ级(指中度不典型增生或子宫颈原位癌)、鳞状上皮癌、腺癌。

1.3 统计学处理 采用SPSS 13.0软件对数据进行统计学处理。计数资料对比采用χ2检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 HPV-DNA、TCT阳性与病理阳性诊断结果比较 300例标本中，单独HPV-DNA（H组）阳性35例，占11.6%；病理结果阳性21例，符合率60.0%。单独TCT（T组）阳性33例，占11.0%；病理结果阳性24例，符合率72.7%。HPV-DNA及TCT检测（H+T组）均为阳性20例，占6.7%；病理结果阳性19例，符合率95.0%。与H组及T组比较，H+T组符合率差异有统计学意义（P＜0.01）。见表1。

2.2 HPV感染率与病理诊断结果比较 本研究中有51例患者因HPV-DNA和（或）TCT结果阳性而进行阴道镜下病理活检，HPV感染率在不同的病理结果中分别为≤CINⅠ级15例，占57.7%；≥CINⅡ级20例，占80%。与≤CINⅠ级患者比较，≥CINⅡ级的HPV感染率差异有统计学意义（P＜0.05）。见表2。

2.3 TCT检查与病理诊断结果比较 50例患者中，炎症改变24例、异常涂片26例。其中ASC（ASC-US、ASC-H）11例，检出CINⅠ级5例、CINⅡ级2例；LSIL 9例，检出CINⅠ级5例、CINⅡ级2例，CINⅢ级1例；HSIL 6例，检出CINⅠ级1例、CINⅡ级3例、CINⅢ级2例。随着细胞学异常级别的升高，宫颈高度病变检出率显著增加。见表3。

3 讨论

宫颈癌在全球女性中仅次于乳腺癌的最常见的妇科恶性肿瘤之一，死亡率在女性恶性肿瘤中居首位，并有逐年上升的趋势[3]。在世界范围内，每年约有51万妇女被诊断为宫颈癌，其中85%发生在发展中国家。我国宫颈癌每年新增病例约13.5万，占全球发病总量的1/3，其死亡率占女性恶性肿瘤的第2位，是严重危害我国女性健康的重大疾病[4]。宫颈癌的发生是一个从CIN至早期浸润癌直至浸润癌的由量变到质变的连续发展过程，CIN如果得到及时正确治疗会完全治愈，具有进一步发展或恢复正常的双重性[5]。因此，对宫颈癌的早期筛查和及时预防可最大限度避免宫颈癌发生。

表1 HPV-DNA、TCT阳性与病理阳性诊断结果比较

表2 HPV感染率与病理诊断结果比较 [例(%)]

表3 TCT检查与病理诊断结果比较 [例(%)]

宫颈癌是为数不多的原因明确的恶性肿瘤，现已证明与宫颈癌发生密切相关的因素是生殖道HPV感染，高危型HPV与宫颈癌及CIN的发生相关，尤其HPV 16型具有很强的致病性[6]。本研究表明，HPV检测是发现高度CIN的一种敏感的、有效的方法，且HPV的感染在高度CIN发生率增加。由于高危型HPV感染与CIN及宫颈癌有密切关系，高危型HPV检测与细胞学联合筛查宫颈癌和CIN，尤其适用于高危人群的大面积普查。通过HPV检测，可预测宫颈癌的发病风险，以指导筛查的时间间隔，对治疗后的患者可将HPV检测作为其疗效判断和随防监测的手段。

细胞学检查是CIN筛查及诊断的主要方法。新发展的TCT检测改变了常规涂片的操作方法，几乎保留了所得到的全部标本，细胞固定及时，形态结构不容易改变，细胞随机均匀分布，并且湿固定的细胞核结构清晰，易于鉴别，大大地提高了诊断的准确性。本研究表明，ASC性质的明确有重要的临床意义，可提示部分患者有高度CIN及宫颈鳞癌的可能，应当进行进一步处理。

阴道镜是介于肉眼和低倍显微镜之间的一种内镜，是国内外学者公认的辅助诊断CIN的重要方法。其将宫颈放大10～40倍，观察组织的表面颜色、构型、边界、终末血管网，发现异常病变，准确定位进行多点活检，评价病变性质。值得注意的是，阴道镜图像的解释有一定的主观性，以致影响活检部位的选择和阴道镜诊断，使阴道镜检查与活检病理诊断符合率的报道差异较大。

在本研究中，H+T组符合率显著高于H组及T组（P＜0.01），表明高危型HPV、TCT检测联合阴道镜检查可早期、准确诊断宫颈高度病变。其中HPV作为分子检测指标，TCT用于筛查宫颈病变，阴道镜作为一种良好的诊断工具可提供准确的活检部位。三者联合应用可提高宫颈病变的诊断率，减少漏诊误诊的发生，值得临床推广。

[1] Desantis C, Ma J, Bryan L, et al. Breast cancer statistics, 2013[J]. CA: A Cancer Journal for Clinicians, 2014, 64(1): 52-62.

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[4] 应倩，夏庆民，郑荣寿，等．中国2009年宫颈癌发病与死亡分析[J]．中国肿瘤，2013，22(8)：612-616．

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[6] 郝瑞凤，王培玉．宫颈癌流行病学及高危因素探讨[J]．医学综述，2011，10(15)：1479-1480．

Clinical Investigation of Combination with Liquid-based Cytological Test, HPV, and Colposcope on the Diagnosis of Cervical Cancer

Chen Jinshun

Objectives To investigate the clincial characteristics and vales of combination with liquid-based cytological test (TCT), HPV, and colposcope on the diagnosis of cervical cancer.MethodsAll 300 patients checked with HPV or TCT in our hospital were retrospectively analyzed for the clinical data. The colposcope was conducted in patients with one or two abnormal values. CIN and more serious were considered as pathological positive, and then the positive patients were analyzed for the clinical data.ResultsThere was 35 DNA positive cases and 21 pathological positive cases in the single HPV group (compliance rate 60.0%), 33 TCT positive cases and 24 pathological positive cases in the single HCT group (compliance rate 72.7%), 20 HPV+TCT positive cases and 19 pathological positive cases in the single HCT group (compliance rate 95.0%). The compliance rate of HPV+TCT group was signifi cantly higher than that of HPV or TCT single group (P＜0.01).ConclusionsTCT combined with colposcopy and HPV detection can greatly improve the early diagnosis of cervical cancer detection rate and is worthy of promotion.

HPV; TCT; cervical cancer; diagnosis

1672-7185（2014）14-0044-03

10.3969/j.issn.1672-7185.2014.14.028

2014-05-08）

R711

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