急性创伤性脑损伤模型核转录因子-KB(NF-KB) 表达变化规律探讨

春

1.广东省徐闻县人民医院神经外，广东 徐闻 524100;2.广东医学院附属医院神经外科，广东 湛江 524001

Abstract:ObjectiveTo investigate the acute traumatic brain injury after a nuclear transcription factor-KB(NF-KB)expression variation.MethodsThis set of experiments conducted experiments using Wistar rats, and 80 patients were randomly divided into sham group of rats with brain trauma injury group. Variation observed in rats after traumatic brain injury NF-KB expression using immunohistochemistry.ResultsTBI brain injury group of nerve injury lesion area in six hours-120 hours after injury time stage, the expression of NF-KB was significantly higher, and there is a significant difference compared with the sham control group,P<0.05,statistically significant.ConclusionAcute traumatic brain injury NF-KB expression was significantly increased, and therefore NF-KF exception may be the main factors leading to secondary brain injury by inhibiting the expression of NF-KB in order to achieve the prevention of secondary brain injury occur.

Keywords:Acute traumatic brain injury;Nuclear transcription factor-KB;Variation

创伤性脑损伤对脑组织造成的损伤依据类型及时间可分为原发性脑损伤与继发性脑损伤，通常脑外伤可致脑组织原发性脑损伤，但其后发生的继发性脑损伤是影响颅脑外伤临床治疗效果及患者致死率、致残率的主要因素之一[1]。研究表明脑炎性反应在引起颅脑组织继发性脑损伤中起重要作用，其中核转录因子-KB(NF-KB)是细胞因子及炎症介质表达的主要转录因子之一，通过NF-KB的激活可产生肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、IL等促炎因子在炎症发应征发挥作用，通过研究NF-KB与继发性脑损伤的相关关系对治疗急性创伤性脑损伤具有重要价值[2]。本组实验通过动物实验研究急性创伤性脑损伤后NF-KB的表达变化规律，以此判断其对继发性脑损伤的影响。现将实验结果报道如下。

1 材料与方法

1.1 材料 选取健康Wistar大鼠80只作为研究实验对象，雌雄不限，大鼠体重在200～300g，平均体重(261.3±11.5)g，随即将其分为两组，假手术对照组与脑外伤损伤组，假手术对照组30例，脑外伤损伤组60例；NF-kBp65鼠抗大鼠单抗(北京中杉生物工程有限公司)；SP超敏KIT 9706、R-二联氨苯胺显色试剂盒DABKKIT0031(福州迈新生物工程有限公司)。

1.2 实验方法 大鼠创伤性脑损伤的建立依据Feeney自由落体脑损伤模型制作，大鼠采用水合氯醛进行腹腔麻醉。脑损伤建立冲击力度选择400gcm以达到右顶叶脑组织挫裂伤。创伤后数据观察时相点选择6h、24h、72h、120h，每时间随机选取7例大鼠采集血清样本并处死大鼠收集脑组织，应用多聚甲醛液固定大鼠脑组织24小时后石蜡包埋进行实验切片，其中1/2切片标本进行苏木精-伊红染色，另1/2切片标本进行免疫组化染色实验，采用SP法检测切片标本中的NF-KB数值并记录，并采用SPIC彩色图文分析系统及摄像机计算免疫组化阳性染色的平均光密度值(IOD)；通过测量脑组织含水量评价大鼠是否存在脑水肿。

2 结果

2.1 脑损伤后NF-KB的表达变化情况 根据免疫组化SP法采集两组大鼠的NF-KB表达情况并比较，结果见表1。

通过表1比较可知，假手术组基本无NF-KB免疫反应，脑外伤损伤组在各时相点均可检出较多NF-KB阳性细胞，两组比较差异，具有统计学意义(P<0.05)。

表1 两组大鼠脑损伤后NF-KB表达比较

注：与假手术组比较，*P<0.05。

2.2 两组大鼠脑水肿的评估效果 根据脑组织含水量结果评估大鼠是否发生脑水肿，结果见表2。

通过表2比较可知，脑损伤组大鼠脑组织含水量各时相点明显高于假手术对照组，具有统计学意义(P<0.05)。

表2 两组大鼠脑组织水容量的比较情况

注：与假手术组比较，*P<0.05。

3 讨论

炎性介质及细胞因子在脑组织继发性脑损伤过程中发挥较为重要的作用，其创伤后的表达与继发性脑损伤存在密切联系，因此针对性控制炎性介质与细胞因子的高度表达对提高急性创伤性脑损伤的临床治疗效果及稳定病情程度具有重要作用[3]。其中NF-KB的激活是释放促炎细胞因子导致过度炎症反应及组织损伤的主要原因，因此对NF-KB的表达规律研究对开辟新的防治继发性脑损伤途径具有重要意义[4]。

根据本组动物实验结果分析发现，脑损伤组大鼠的NF-KB表达显著高于假手术组，且在各时相点表达具有差异性，在6h时NF-KB表达活跃，72h时NF-KB表达下降但仍显著高于假手术组，并且脑损伤组大鼠的脑组织含水量普遍高于假手术组，可提示急性创伤性脑损伤后NF-KB的表达可导致继发性脑损伤发生机率的升高，同时导致脑水肿发病率较高。由此进行资料整理及实验回顾可知，NF-KB作为一种多向性转录激活功能调节因此可受到应激、炎症、自由基等多种因素激活而发挥调控编码作用导致多种细胞因子、粘附分子等参与免疫、炎症反应生理、病理过程基因的表达调控，而NF-KB的高度表达可加重患者的炎症反应进一步造成继发性脑损伤，因此在急性创伤性脑损伤后通过抑制NF-KB的表达对降低患者炎症反应、继发性脑损伤发生率具有重要作用[5-6]。

综上所述，急性创伤性脑损伤后NF-KB表达显著增高可能是导致继发性脑损伤的主要因素，因此可通过抑制NF-KB的表达从而实现防止继发性脑损伤的发生，为临床治疗急性创伤性脑损伤提高创新思路，可有效提高临床治疗效果，降低急性创伤性脑损伤致死率、致残率。

[1]刘盛明,苑玉清,侯敏,等.创伤性脑损伤脑组织NF-kB表达变化规律及PDTC对其影响[J].四川医学，2013,34(2)：167-169.

[2]熊莉娜，熊枝繁，涂艳.核转录因子．KB、表皮生长因子受体在食管鳞状细胞癌组织中的表达及意义[J].实用医学杂志，2010,26(16)：2941-2942.

[3]朱慧华，万少华，夏耘，等.NF—KB在膀胱移行细胞癌病理组织中的表达[J].放射免疫学杂志2011,24(1):60-62.

[4]徐跃，郭莲.急性创伤性脑损伤后凝血病患者的血糖水平与预后的相关性研究[J].中国全科医学，2011,14(2):614-616.

[5]曹顺华，姚秋辉，王东春.重型颅脑损伤患者颅内压监测及护理体会[J].中国全科医学，2010，13(5)：1572.

[6]王萌炜，石可, 吴伟,等.急性创伤性脑损伤患者AQP4的表达及其与预后的关系[J].实用预防医学，2012，19(10):1540-1542.