山茱萸中环烯醚萜苷类的研究进展

李观林

(正大天晴药业集团股份有限公司, 江苏 南京 210038)



山茱萸中环烯醚萜苷类的研究进展

李观林

(正大天晴药业集团股份有限公司, 江苏 南京 210038)

综述山茱萸中环烯醚萜苷类的相关研究进展，分别阐述环烯醚萜苷类的化学成分、环烯醚萜苷的提取分离和含量测定及其药理作用，为今后开展相关研究提供参考。

山茱萸；环烯醚萜苷类；化学成分；提取分离；含量测定；药理作用

山茱萸(CornusofficinalisSieb. et Zucc.)，别称山萸肉、山芋肉，具补益肝肾、收敛固涩、固精缩尿止带止崩、生津止渴之功效，用于腰膝酸痛、头晕耳鸣、内热消渴、遗精滑精、崩漏带下等证。环烯醚萜苷类成分是山茱萸中的主要成分之一，近年来有关山茱萸中的环烯醚萜苷类的总结并不多见，本文就环烯醚萜苷类的化学成分、环烯醚萜苷的提取分离和含量测定及其药理作用进行综述。

1 山茱萸中环烯醚萜苷类化学成分

山茱萸中的环烯醚萜苷类化合物主要有：莫诺苷(morroniside)、7-O-甲基莫诺苷(7-O-methylmorroniside)、马钱苷(loganin)、7-脱氢马钱素(7-dehydrologanin)、马鞭草苷(verbenalin)、獐牙菜苷(sweroside)及山茱萸新苷 (cornuside)。

2 环烯醚萜苷的提取分离和含量测定

2.1 提取分离方法

环烯醚萜类成分极性较大，其水提物中杂质较多。为了提高总苷中有效成分的含量，皮文霞等[1]以莫诺苷和马钱素及总固形物为评价指标，考察比较传统分离苷类的吸附剂活性炭与现在常用的大孔树脂富集山茱萸总苷中有效成分的工艺条件及参数，两者相比，大孔树脂富集山茱萸总苷优于活性炭，前者对莫诺苷和马钱素的洗脱率约为96%，后者约为85%。并且，大孔树脂以30%乙醇洗脱液中两苷含量最高。李小娜等[2]制备出马钱苷和莫诺苷对照品。结合大孔树脂富集、硅胶柱色谱分离、制备，HPLC法对山茱萸水提醇沉提取物进行分离纯化，通过波谱学方法鉴定出马钱苷和莫诺苷，用归一化法定量，质量分数均大于98%，所得马钱苷和莫诺苷可作为中药定性、定量分析使用的对照品。

2.2 含量测定方法

山茱萸总苷的含量测定方法主要有高效液相色谱法和紫外分光光度法。刘成红等[3]建立了山茱萸有效成分马钱苷的高效液相色谱分析方法。色谱柱为分析柱Shim-pack VP-ODS (250mm×4.6mm，5μm)，乙腈-水(15∶85)为流动相。该方法准确，灵敏度高，重复性好，适用于山茱萸的质量控制。杜小伟等[4]报道了高效液相色谱法测定不同产地制山茱萸中马钱苷的含量。色谱柱为SUPELCO C18柱(5μm，4.6mm×250mm)，流动相为乙腈-水(15∶85)。测定结果可以看出各地制山茱萸的马钱苷含量比较稳定，在0.506% ～0.917%，可以作为评价制山茱萸质量及含制山茱萸中成药质量的参考。皮文霞等[5]采用HPLC法及UV法共同监控山茱萸制剂提取纯化工艺。HPLC法采用Lichrospher C18柱4.6mm×250mm，甲醇-水(30∶70)为流动相，检测波长240 nm。UV法中扫描波长为240nm。两法对照品均为莫诺苷和马钱苷,结果为山茱萸药材的乙醇提取物、醇提水沉物以及过大孔树脂的洗脱物中两苷含量分别为2.8%、15.6%及46.9%。UV扫描图可看出，经乙醇提取及水沉以后的样品内含杂质较多，而经大孔树脂洗脱后，总苷的扫描图形状已与莫诺苷及马钱子苷接近。将UV与HPLC相结合可更直观地监控山茱萸总苷提取纯化的每一步骤。

3 药理作用

3.1 降血糖及治疗糖尿病并发症

山茱萸环烯醚萜总苷有明显的降血糖作用，对糖尿病肾病及糖尿病血管并发症均有良好保护作用[6]。山茱萸环烯醚萜总苷具有较好的抗非酶糖化作用， 能抑制糖化终产物(AGEs)的沉积，延缓糖尿病肾病的发生。AGEs在糖尿病并发症的形成中往往起重要作用。AGEs具有不可逆性，在体内蓄积将引起广泛的蛋白质交联，诱发各种病变,如胶原蛋白的异常交联使胶原纤维刚性增加、弹性降低、细胞外基质增生等。山茱萸环烯醚萜总苷能抑制糖尿病大鼠肾皮质AGEs的形成，使其受体mRNA表达水平下降，具有减轻糖尿病肾病的作用[7]。此外还有研究显示，环烯醚萜总苷能抑制高糖或AGEs对肾小球系膜细胞(GMC)的过度增殖及细胞周期变化，修复高糖或AGEs致GMC的Na+-K+-ATP酶活性降低[8]，提高SOD和GSH-Px活力，降低ROS及MDA水平，增强抗氧化能力。说明其能通过抑制氧化应激来对抗AGEs致GMC的损伤作用，从而达到防治糖尿病肾病的目的。此外，山茱萸中的环烯醚萜总苷对Ⅱ型糖尿病的视网膜毛细血管病变具有一定的改善作用，能显著升高糖尿病大鼠载脂蛋白A(Apo-A)水平 ，降低糖尿病大鼠血清总胆固醇 (CHOL)、甘油三脂 (TG)、低密度脂蛋白 (LDL-C)、载脂蛋白B(Apo-B)水平。对糖尿病引起的视网膜毛细血管内皮细胞(EC)数目明显增加 ，周细胞(PC)数目明显减少，从而导致的E/P值上升，环烯醚萜总苷能显著降低糖尿病大鼠视网膜毛细血管的E/P值[9]。

3.2 免疫抑制作用

山茱萸总苷抑制免疫主要作用于TL-2/TL-2受体系统，此与环孢霉素A的作用机理相似，有研究发现，二者在淋巴细胞增殖等方面有协同抑制作用[10]。山茱萸总苷可抑制T、B淋巴细胞增殖，抑制T淋巴细胞产生IL-2、T淋巴细胞表面CD3、CD4、CD8的表达及提高CD4/CD8的比值[11]。此外，山茱萸总苷对类风湿关节炎也有明显的防治作用，其机理为抑制CⅡ特异性体液免疫和Th1型细胞免疫[12]。

3.3 抗炎作用

付桂香等[13]采用弗氏完全佐剂形成大鼠佐剂性关节炎(AA)模型，考察山茱萸环烯醚萜苷对T淋巴细胞增殖、炎性细胞因子IL-1、TNF-α、IL-6及迟发型超敏反应(DTH)、前列腺素E2(PGE2)的作用。结果发现山茱萸环烯醚萜苷具有较好的免疫抑制抗炎作用，其机理可能是抑制了炎性介质IL-1、IL-6、TNF-α和PGE2的产生。李建昌等[14]也发现，山茱萸总苷的抗炎作用与其抗氧化作用相关。

3.4 其它作用

有文献报道[15]，山茱萸环烯醚萜总苷能够抑制神经细胞tau蛋白过度磷酸化，保护细胞微管结构，因此可能具有治疗隔海马穹隆伞切断拟Alzheimer病(AD)的应用前景。还有文献报道，马鞭草苷(环烯醚萜苷成分)具有兴奋子宫，并促进哺乳动物乳汁分泌的药理作用。

4 结语

综上所述，山茱萸作为我国传统中药，有悠久的应用历史，其在医药和保健品等方面应用的需求量逐年增加。山茱萸环烯醚萜总苷作为山茱萸中的主要有效成分，已越来越受到重视，尤其能显著改善糖尿病血管并发症，若考虑开发成相应的药物制剂，将具有广阔的市场前景。

[1] 皮文霞,蔡宝昌,潘扬,等.大孔树脂与活性炭富集山茱萸总苷的实验研究[J].中国中药杂志,2002,27(8):583-584.

[2] 李小娜,霍长虹,殷玮,等.山茱萸中马钱苷和莫诺苷对照品的制备[J].中草药,2006,37(8):1168-1170.

[3] 刘成红,魏萍,张淑兰.高效液相色谱法测定山茱萸中马钱苷的含量[J].解放军药学学报, 2005,21(2):144-146.

[4] 杜小伟,范力力,王京辉,等.不同产地制山茱萸中马钱苷的含量测定[J].中国中药杂志,2006,31(17):1466-1467.

[5] 皮文霞,蔡宝昌. HPLC法及UV法共同监控山茱萸制剂提取纯化工艺[J].现代中药研究与实践,2003,17(4):58-59.

[6] 许惠琴,朱荃.山茱萸环烯醚萜总苷对实验性糖尿病肾病变的保护作用[J].南京中医药大学学报,2003,19(6):342-345.

[7] 许惠琴,郝海平,皮文霞,等.山茱萸环烯醚萜总苷对糖尿病大鼠肾皮质糖化终产物及其受体mRNA表达的影响[J].中药药理与临床,2003,19(4):9-12.

[8] 许惠琴,刘洪,沈健,等.山茱萸环烯醚萜总苷对高糖或AGEs培养肾小球系膜细胞增殖和Na+-K+-ATP酶活性的影响[J].中药药理与临床,2006,22(6):27-29.

[9] 曹亮,金艳,钱莉亚,等.环烯醚萜总苷对Ⅱ型糖尿病大鼠血脂及视网膜毛细血管病变的影响[J].中国天然药物,2005,3(4):252-256.

[10] 李建民,周勇,项静辰,等.山茱萸总苷对正常小鼠T淋巴细胞免疫功能影响的实验研究[J].北京中医药大学学报,2000,23(6):30.

[11] 李建民,周勇,张丽,等.山茱萸总苷对TUVEC表达ICAM-1、CD44的影响[J].中国免疫学杂志,2000(16):604.

[12] 郭丽丽,周勇,王旭丹,等.山茱萸分离提取物对脾淋巴细胞增殖的影响[J].北京中医药大学学报,2001,24(3):38-40.

[13] 付桂香,李建民,周勇,等.山茱萸总苷抗炎免疫抑制作用及其机理的大鼠实验研究[J].中华微生物学和免疫学杂志,2007,27(4):316-320.

[14] 李建昌.山茱萸总皂苷提取纯化及其体外抗氧化性研究[D]. 西安：陕西师范大学,2006.

[15] 褚燕琦,李玮,张兰,等.山茱萸环烯醚萜苷对蛋白磷酸酶抑制剂冈田酸拟阿尔采末病细胞模型的作用[J].中国药理学通报,2006,22(8):960-963.

(责任编辑：宋勇刚)

2014-05-04

李观林(1988-)，男，正大天晴药业集团股份有限公司工程师,研究方向为活性药物筛选。

R285.6

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1673-2197(2014)18-0048-02