MP—DNA、MP—IgM及MP—IgG在儿童肺炎支原体感染中的动态变化

黄淑媛等

[摘要] 目的 探讨MP-DNA、MP-IgM及MP-IgG在儿童肺炎支原体感染中的动态变化情况，为患儿的诊治提供依据。 方法 98例患儿均留取咽拭子和血清标本，采用实时荧光PCR检测患儿咽拭子标本中的MP-DNA；采用颗粒凝集法检测患儿血清中MP-IgM；采用ELISA检测患儿血清中MP-IgG。MP-DNA阳性或MP-IgM阳性或两者都是阳性者均确诊为肺炎支原体感染病例，观察分析确诊病例在不同病程时MP-DNA、MP-IgM及MP-IgG的动态变化规律。 结果 98例患儿在就诊当天MP-DAN的阳性率达76.53%，随着病程的延长，MP-DNA阳性率逐渐下降；MP-IgM的阳性率在就诊当天为36.73%，大约2周时达高峰，后缓慢下降；MP-IgG在就诊当天的阳性率很低，只有3.06%，大约4周时达高峰，至第8周时仍持续高值，三者在不同病程时期的检出阳性率差异有统计学意义（P<0.01），且在就诊当天、治疗后1、2、4及8周时差异均有统计学意义（P<0.01）。 结论 在肺炎支原体感染患儿不同的病程时期应动态监测MP-DAN、MP-IgM及MP-IgG，并进行综合分析，实现优势互补，以提高诊断的特异度和灵敏度，减少漏诊和误诊，使患者得到早期正确的诊断及治疗。

[关键词] 肺炎支原体；儿童；动态变化

[中图分类号] R375+.2 [文献标识码] A [文章编号] 1674-4721（2014）02（a）-0095-03

肺炎支原体（Mycoplasma pneumoniae，MP）是一种呼吸道感染的常见病原体，在儿童社区获得性肺炎中，有近40%由MP引起[1-2]。随着MP的变迁，MP已成为小儿肺炎的主要病原体，并且感染率呈上升趋势[3-4]，发病年龄也逐渐趋小。据临床报道，应用大环内酯类抗生素治疗MP感染的效果显著，而β-内酰胺类抗生素无效，故及时准确的诊断可以有效地控制病情，避免延误MP感染的治疗，避免滥用抗生素，并能降低严重感染患儿的死亡率，因此，早期诊断出MP感染尤为重要。本研究回顾性分析了本院收治的98例MP-DNA阳性或MP-IgM阳性或两者均为阳性的门诊及住院患儿的临床资料，探讨MP-DNA、MP-IgM及MP-IgG在儿童MP感染中的动态变化情况，为患儿的诊治提供依据。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择2009年1月～2013年3月以本福利中心及东莞市南城医院98例MP-DNA阳性或MP-IgM阳性或两者均阳性的门诊及住院MP感染患儿为研究对象，年龄6个月～13岁，其中，男52，女46例。

1.2 方法

每例患儿均取就诊当天、1周、2周、4周及8周的咽拭子检测MP-DAN，并同时抽血进行MP-IgM及MP-IgG检测；所有患儿均给予阿奇霉素（商品名：希舒美，辉瑞制药有限公司，0.1 g/袋），10 mg/（kg·d），1次/d，用3 d停4 d，1周为1个疗程，共治疗4周。

1.2.1 MP-IgG的测定 采用ELISA方法，由晶美生物工程公司提供的MP-IgG抗体试剂盒，操作参照试剂盒内说明书，标本OD值与阴性对照OD值比较，以OD值≥2.0为阳性。

1.2.2 MP-IgM的测定 采用颗粒凝集法，Sero-Dia-Myco Ⅱ试剂盒由日本Fujirebio Inc提供，血清抗体56℃灭活，操作方法按说明书进行，同时设立阳性与阴性对照孔，滴度≥80为阳性。

1.2.3 MP-DNA的测定 采用实时荧光PCR检测患儿咽拭子标本中的MP-DNA，试剂由中山大学达安基因股份有限公司提供，仪器采用美国生物系统ABI-7500荧光定量PCR仪。

1.3 统计学方法

采用SPSS 20.0统计学软件对相关数据进行分析，计数资料采用？字2检验，以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

共有98例患儿入选，随着病情的好转及治愈，至第8周时只有75例患儿参与随访。就诊当天患儿MP-DAN的阳性率最高，达76.53%，随着病程的进展，MP-DNA的阳性率逐渐下降；MP-IgM的阳性率至第2周时达高峰，然后缓慢下降；MP-IgG在就诊当天的阳性率很低，至第4周时达高峰，至第8周时仍持续高值。MP-DNA、MP-IgM及MP-IgG在不同病期检出率差异均有统计学意义（P<0.01），故三者对MP感染的诊断价值高低因病程不同而异（表1，图1）。

表1 患儿不同病程MP-DNA、MP-IgM及MP-IgG阳性率的比较[n（%）]

图1 患儿不同病程MP-DNA、MP-IgM及MP-IgG阳性率的

动态变化情况直方图

3 讨论

MP感染在全球范围内均有发生，是继细菌、病毒后，引起儿童呼吸道感染又一常见的病原，且MP感染的发病率有逐年上升趋势，危害较大，严重者可引起全身炎症反应综合征及心功能不全等肺外并发症[5]。MP对β-内酰胺酶类抗生素无效，对大环内酯类抗生素疗效显著。因此，早期正确诊断及如何提高MP感染的诊断水平受到普遍关注。MP的分离培养虽然对诊断和鉴别有决定性意义，但是由于耗时较长，培养较困难，且检出率低，故在临床上很少应用，血清特异性抗体测定是目前临床诊断MP感染的最常用的实验室证据[6-7]。

MP-IgM是机体受MP感染后最早出现的特异性抗体，于发病后1～2 d即可检出，大部分患者在感染后1周内出现，少部分患儿在感染后7～10 d出现，约2周时达到高峰，可以持续12～16周甚至更长的时间[8]，IgM抗体阳性可作为早期或急性期感染的诊断指标。本研究提示，患儿MP-IgM在就诊当天的阳性率为36.73%，至第2周时为79.59%，达到高峰，直至第8周时仍有较高的阳性率。MP-IgG的出现较晚，从病程第2周起阳性率开始增高，至第4周时达高峰，第8周时仍居高不下，基本与文献报道一致。

国内普遍认为，MP-IgM在感染3～7 d后出现，比MP-IgG出现早，提示MP近期和当前感染，但MP-IgM阳性并不总是表示当前的感染状态，部分患者可达半年之久，在某些病例中，MP-IgM 在感染1年后仍然持续存在；另外，MP-IgM 在再次感染MP后含量极微，或者无法检测到[9]。MP-IgM抗体的检测受多种因素的影响。①年龄：婴幼儿免疫系统尚处于发展期，发育还未完全，在MP感染后患儿抗体生成不足，影响抗体检出阳性率；②病程：抗原刺激机体免疫应答产生抗体需要一段时间，MP-IgM抗体发病1周左右时才开始上升，对于病程<1周的患儿，检测MP-IgM抗体时容易造成漏诊、误诊；③机体免疫状态：对于免疫功能低下的患儿，其免疫反应低，IgM升高幅度很小，导致MP-IgM抗体的阳性率低。因此，血清MP-IgM抗体的检测在临床应用中有一定的局限性[7，10]，仅依赖于MP-IgM 的检测，有可能造成误诊或漏诊。而IgG较IgM出现晚，在体内持续时间较长，可以作为回顾性诊断和亚急性感染状态的指标，进行病原学追踪。故需结合MP-DNA和MP-IgG以减少漏诊和误诊，并进行病原学追踪。

与MP-IgM相比，MP-DNA阳性率在发病初期就很高，且不受病程是否达到高峰及感染程度的影响，而产生抗体需要一定时间[11]。尚晓云[12]发现，不少经临床及实时定量PCR确诊的MP感染患儿，仅在出院前的最后1次MP-IgM检测才出现阳性，有些病后1周MP-IgM为阴性的MP感染患儿，其病情可能较阳性者严重。如果研究者只选择MP-IgM阳性的患儿，就有可能可能忽略了即将进展为重症临床表现的患儿[13]。因此，在发病初期MP-DNA对MP感染患儿具有很高的诊断价值，可以作为MP感染的早期诊断指标。MP-DNA在发病初期的阳性率较高，随着治疗和病情的转归，阳性率迅速下降转阴，表明MP-DNA可以直观地反映MP在体内感染和复制的情况。通过观察MP-DNA动态变化，可以为临床动态观察治疗效果提供依据[14]，故应联合动态监测MP-DNA和MP-IgM来减少漏诊和误诊的发生。本研究通过观察MP-DNA在不同病程的动态变化，发现患儿的MP-DNA随着病程的延长和康复好转其阳性率逐渐下降，表明MP-DNA可以直观地反映MP在体内的感染和复制情况，可以为临床动态观察治疗效果提供依据，可用于患儿病情转归的预测评估。

综上所述，临床中遇到怀疑为MP感染的患儿时最好同时检测MP-DNA、MP-IgM及MP-IgG，以提高诊断的特异度和灵敏度，减少漏诊和误诊的发生，使患者得到早期正确的诊断及治疗，而动态检测MP-DNA、MP-IgM及MP-IgG，既可在诊断中优势互补，又可了解疾病的病程及转归情况，为临床诊断治疗提供参考。

[参考文献]

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[12] 尚晓云.儿童肺炎支原体感染的相关临床问题[J].中国小儿急救医学，2010，17（5）：385-389.

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（收稿日期：2013-11-26 本文编辑：袁 成）

国内普遍认为，MP-IgM在感染3～7 d后出现，比MP-IgG出现早，提示MP近期和当前感染，但MP-IgM阳性并不总是表示当前的感染状态，部分患者可达半年之久，在某些病例中，MP-IgM 在感染1年后仍然持续存在；另外，MP-IgM 在再次感染MP后含量极微，或者无法检测到[9]。MP-IgM抗体的检测受多种因素的影响。①年龄：婴幼儿免疫系统尚处于发展期，发育还未完全，在MP感染后患儿抗体生成不足，影响抗体检出阳性率；②病程：抗原刺激机体免疫应答产生抗体需要一段时间，MP-IgM抗体发病1周左右时才开始上升，对于病程<1周的患儿，检测MP-IgM抗体时容易造成漏诊、误诊；③机体免疫状态：对于免疫功能低下的患儿，其免疫反应低，IgM升高幅度很小，导致MP-IgM抗体的阳性率低。因此，血清MP-IgM抗体的检测在临床应用中有一定的局限性[7，10]，仅依赖于MP-IgM 的检测，有可能造成误诊或漏诊。而IgG较IgM出现晚，在体内持续时间较长，可以作为回顾性诊断和亚急性感染状态的指标，进行病原学追踪。故需结合MP-DNA和MP-IgG以减少漏诊和误诊，并进行病原学追踪。

与MP-IgM相比，MP-DNA阳性率在发病初期就很高，且不受病程是否达到高峰及感染程度的影响，而产生抗体需要一定时间[11]。尚晓云[12]发现，不少经临床及实时定量PCR确诊的MP感染患儿，仅在出院前的最后1次MP-IgM检测才出现阳性，有些病后1周MP-IgM为阴性的MP感染患儿，其病情可能较阳性者严重。如果研究者只选择MP-IgM阳性的患儿，就有可能可能忽略了即将进展为重症临床表现的患儿[13]。因此，在发病初期MP-DNA对MP感染患儿具有很高的诊断价值，可以作为MP感染的早期诊断指标。MP-DNA在发病初期的阳性率较高，随着治疗和病情的转归，阳性率迅速下降转阴，表明MP-DNA可以直观地反映MP在体内感染和复制的情况。通过观察MP-DNA动态变化，可以为临床动态观察治疗效果提供依据[14]，故应联合动态监测MP-DNA和MP-IgM来减少漏诊和误诊的发生。本研究通过观察MP-DNA在不同病程的动态变化，发现患儿的MP-DNA随着病程的延长和康复好转其阳性率逐渐下降，表明MP-DNA可以直观地反映MP在体内的感染和复制情况，可以为临床动态观察治疗效果提供依据，可用于患儿病情转归的预测评估。

综上所述，临床中遇到怀疑为MP感染的患儿时最好同时检测MP-DNA、MP-IgM及MP-IgG，以提高诊断的特异度和灵敏度，减少漏诊和误诊的发生，使患者得到早期正确的诊断及治疗，而动态检测MP-DNA、MP-IgM及MP-IgG，既可在诊断中优势互补，又可了解疾病的病程及转归情况，为临床诊断治疗提供参考。

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（收稿日期：2013-11-26 本文编辑：袁 成）

国内普遍认为，MP-IgM在感染3～7 d后出现，比MP-IgG出现早，提示MP近期和当前感染，但MP-IgM阳性并不总是表示当前的感染状态，部分患者可达半年之久，在某些病例中，MP-IgM 在感染1年后仍然持续存在；另外，MP-IgM 在再次感染MP后含量极微，或者无法检测到[9]。MP-IgM抗体的检测受多种因素的影响。①年龄：婴幼儿免疫系统尚处于发展期，发育还未完全，在MP感染后患儿抗体生成不足，影响抗体检出阳性率；②病程：抗原刺激机体免疫应答产生抗体需要一段时间，MP-IgM抗体发病1周左右时才开始上升，对于病程<1周的患儿，检测MP-IgM抗体时容易造成漏诊、误诊；③机体免疫状态：对于免疫功能低下的患儿，其免疫反应低，IgM升高幅度很小，导致MP-IgM抗体的阳性率低。因此，血清MP-IgM抗体的检测在临床应用中有一定的局限性[7，10]，仅依赖于MP-IgM 的检测，有可能造成误诊或漏诊。而IgG较IgM出现晚，在体内持续时间较长，可以作为回顾性诊断和亚急性感染状态的指标，进行病原学追踪。故需结合MP-DNA和MP-IgG以减少漏诊和误诊，并进行病原学追踪。

与MP-IgM相比，MP-DNA阳性率在发病初期就很高，且不受病程是否达到高峰及感染程度的影响，而产生抗体需要一定时间[11]。尚晓云[12]发现，不少经临床及实时定量PCR确诊的MP感染患儿，仅在出院前的最后1次MP-IgM检测才出现阳性，有些病后1周MP-IgM为阴性的MP感染患儿，其病情可能较阳性者严重。如果研究者只选择MP-IgM阳性的患儿，就有可能可能忽略了即将进展为重症临床表现的患儿[13]。因此，在发病初期MP-DNA对MP感染患儿具有很高的诊断价值，可以作为MP感染的早期诊断指标。MP-DNA在发病初期的阳性率较高，随着治疗和病情的转归，阳性率迅速下降转阴，表明MP-DNA可以直观地反映MP在体内感染和复制的情况。通过观察MP-DNA动态变化，可以为临床动态观察治疗效果提供依据[14]，故应联合动态监测MP-DNA和MP-IgM来减少漏诊和误诊的发生。本研究通过观察MP-DNA在不同病程的动态变化，发现患儿的MP-DNA随着病程的延长和康复好转其阳性率逐渐下降，表明MP-DNA可以直观地反映MP在体内的感染和复制情况，可以为临床动态观察治疗效果提供依据，可用于患儿病情转归的预测评估。

综上所述，临床中遇到怀疑为MP感染的患儿时最好同时检测MP-DNA、MP-IgM及MP-IgG，以提高诊断的特异度和灵敏度，减少漏诊和误诊的发生，使患者得到早期正确的诊断及治疗，而动态检测MP-DNA、MP-IgM及MP-IgG，既可在诊断中优势互补，又可了解疾病的病程及转归情况，为临床诊断治疗提供参考。

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[8] 王贵年，马进强，苏艾云.肺炎支原体感染的实验室诊断进展[J].诊断学理论与实践，2009，8（4）：458-460.

[9] 马敏，曹兰芳，陆伟蓉.血清MP-IgM、MP-IgA和MP-IgG在儿童肺炎支原体感染诊断中的意义[J].中华国际医学杂志，2003，3（2）：4-6.

[10] 董传莉，谢怀珍.不同年龄组支原体肺炎分析[J].蚌埠医学院院报，2008，33（3）：333-335.

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[12] 尚晓云.儿童肺炎支原体感染的相关临床问题[J].中国小儿急救医学，2010，17（5）：385-389.

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[14] Kashyap B，Kumar S，Sethi GR，et al.Comparison of PCR，culture & serological tests for the diagnosis of Mycoplasma pneumoniae in counity acquired lower respiratory tract infections in children[J].Indian J Med Res，2008， 128（2）：134-139.

（收稿日期：2013-11-26 本文编辑：袁 成）