比色法测定清肺消炎丸中胆酸的含量

马福家　曾晓娟　司晓莉

摘 要 目的：建立清肺消炎丸中胆酸含量的测定方法。方法：采用比色法，以硫酸溶液显色，检测波长为385 nm。结果：清肺消炎丸中胆酸的含量限度为不低于0.31 mg/粒，胆酸浓度在0.104 2～0.795 8 mg/ml范围内与吸收度呈良好的线性关系（r=0.999 9， n=5），平均回收率为99.29% （RSD=0.32%， n=6）。结论：该法简便、快速、稳定、可靠，可用于测定清肺消炎丸中胆酸的含量。

关键词 清肺消炎丸 人工牛黄 胆酸 比色法

中图分类号：O657.32； R286 文献标识码：A 文章编号：1006-1533（2014）03-0058-02

Colorimetry determination of the content of cholalic acid in Qingfei Xiaoyan pills

MA Fujia， ZENG Xiaojuan， SI Xiaoli

（Department of pharmacy， Hospital 455 of PLA， Shanghai 200052， China）

ABSTRACT Objective： To establish a method for the determination of cholic acid in Qingfei Xiaoyan pills. Methods： Cholic acid was determined by colorimetry at a wavelength of 385 nm. Results： The content limit of cholic acid in Qingfei Xiaoyan pills is not less than 0.31mg per pill. The standard curve of cholic acd was linear over the range of 0.104 2～0.795 8 mg/ml with r=0.999 9， n=5. The average recovery （n=6） was 99.29% （RSD=0.32%）. Conclusion： This method is simple， fast， stable and reliable and can be used for the quality control of Qingfei Xiaoyan pills.

KEY WORDS Qingfei Xiaoyan pills； artificial bezoar； cholic acid； colorimetry

清肺消炎丸由麻黄、石膏、地龙、牛蒡子、葶苈子、牛黄、苦杏仁（炒）和羚羊角8味中药组成，具有清肺化痰，止咳平喘的功效。临床上用于治疗痰热阻肺、咳嗽气喘、胸胁胀痛、吐痰黄稠[1]。本品中人工牛黄含有效成份胆酸，其含量的测定是控制人工牛黄质量的一个重要指标，但是未见清肺消炎丸中胆酸的含量测定方法，只有胆酸的定性鉴别[2-3]。为能更好地控制清肺消炎丸的质量，本文采用比色法测定其胆酸的含量[4]。

1 仪器与试剂

德国赛多利斯仪器有限公司BP211D型1/10万电子天平，美国瓦里安公司紫外可见分光光度计（Cary 50 UV-Vis），电热恒温水浴锅（江苏南通通海电器厂）等。胆酸标准品（中国药品生物制品检定所）批号为0078-9312，清肺消炎丸（天津中新药业集团股份有限公司达仁堂制药厂，批号：110419），硫酸溶液（取H2O 65 ml，加浓硫酸50 ml，摇匀，即得）。

2 方法与结果

2.1 溶液的制备

标准溶液的制备：精密称取胆酸标准品25 mg，置25 ml量瓶中，加60%冰醋酸溶解并定容至刻度，摇匀。精密吸取5 ml，置另一25 ml量瓶中，加60%冰醋酸至刻度，摇匀，备用。

样品溶液制备：精密称取30粒清肺消炎丸的重量，置25 ml量瓶中，加60%冰醋酸适量，置70 ℃水浴中不断振摇，加热20 min，取出，放冷，过滤，加60%冰醋酸至刻度，摇匀，备用。

阴性对照溶液的制备：称取不含胆酸的阴性空白制剂，按“样品溶液制备”项下制备阴性对照溶液。

2.2 测定波长的选择

精密吸取胆酸标准液1 ml，置具塞刻度试管中，加硫酸溶液14.0 ml，摇匀，置70 ℃水浴中加热l0 min，取出放冷，以相应的试剂为空白，扫描200～800 nm波长范围内的吸收光谱。结果胆酸对照品溶液在385 nm波长处有最大吸收峰，故以385 nm为测定波长。

2.3 标准曲线

用胆酸标准液，照分光光度法（中华人民共和国药典附录Ⅴ）在385 nm波长处测定吸收度A，以A为纵座标，浓度C为横座标，绘制标准曲线，得回归方程为Y = 0.368 3 X + 0.011 9， r = 0.999 8。结果表明，胆酸浓度在0.104 2～0.795 8 mg/ml范围内浓度与吸收度有良好的线性关系。

2.4 精密度实验

取胆酸对照品溶液，按上述方法重复测定6次，吸光度分别为0.103 3、0.104 2、0.103 9、0.103 2、0.103 6和0.104 4，平均值为0.103 8，吸光度的RSD为0.46%。结果表明，本方法精密度良好。

2.5 重现性试验

分别精密吸取胆酸标准液0.5 ml 6份，按标准曲线项下操作，测得吸光度分别为0.188 7、0.189 8、0.190 3、0.190 7、0.189 1和0.189 5，平均值为0.189 7，吸光度的RSD为0.39%。结果表明，此方法有较好的重现性。

2.6 溶液的稳定性试验

取标准曲线项下的胆酸溶液，按上述条件每间隔40 min测定一次吸光度，结果在6 h内吸光度稳定。

2.7 回收率测定

精密称取60粒清肺消炎丸的重量及胆酸标准品20 mg，置25 ml量瓶中，按样品溶液制备项下操作，所得滤液按标准曲线项下测定，结果见表1。

2.8 样品测定

取3批样品，按样品溶液制备项下操作，平行制备3份，所得滤液按标准曲线项下测定吸收度，并根据回归方程计算每粒清肺消炎丸中胆酸含量（mg），结果见表2。

3 讨论

按方法同时制备阴性对照溶液，在200～800 nm的波长范围内扫描，无吸收，说明阴性对照溶液不干扰胆酸的含量测定，选择385 nm作为胆酸含量测定的检测波长。

清肺消炎丸的原标准中无人工牛黄的含量测定，经多次测定，清肺消炎丸中胆酸的含量限度为不低于0.31 mg/粒。

通过上述方法学考察，建立了清肺消炎丸中胆酸的含量测定方法， 能够更好地控制该品种的质量，使其质量标准更趋严谨、科学、完整，并且该方法简便快捷，结果准确，重现性、回收率好，能有效控制清肺消炎丸的质量。

参考文献

[1] 国家药典委员会. 中华人民共和国药典一部[M]. 北京： 化学工业出版社， 2010， 1117-1118.

[2] 罗辉， 王原， 李昂， 等. HPLC法测定清肺消炎丸中盐酸麻黄碱的含量[J]. 世界科学技术（中医药现代化）， 2009， 11（3）： 461-464.

[3] 罗晓茹， 曹红， 邢俊波， 等. 人工牛黄及其制剂中胆酸含量测定的研究进展 [J]. 解放军药学学报， 2009， 25（3）： 247-249.

[4] 曾晓娟， 马福家， 司晓莉. 比色法测定小儿化毒散中胆红素的含量[J]. 上海医药， 2013， 34（19）： 43-45.

（收稿日期：2013-05-15）