高效液相色谱法同时测定食品中苯甲酸(钠)、山梨酸(钾)、安赛蜜、糖精钠和脱氢乙酸(钠)的研究

2014-02-22喻俊磊

质量探索 2014年4期

关键词：安赛蜜糖精钠山梨酸

喻俊磊

（江西省产品质量监督检测院，江西南昌 330029）

高效液相色谱法同时测定食品中苯甲酸(钠)、山梨酸(钾)、安赛蜜、糖精钠和脱氢乙酸(钠)的研究

喻俊磊

（江西省产品质量监督检测院，江西南昌 330029）

探讨采用高效液相色谱法同时测定食品中的苯甲酸、山梨酸、安赛蜜、糖精钠和脱氢乙酸五种食品添加剂含量的方法。样品经超声提取，采用C18色谱柱，以0.02mol/L乙酸胺-甲醇为流动相，用二极管阵列检测器于230 nm波长处检测。该方法灵敏度高,重现性和选择性好，回收率高，易于操作，是检测食品中5种添加剂的有效定量方法。

高效液相色谱法苯甲酸(钠) 山梨酸(钾) 糖精钠安赛蜜(乙酰磺胺酸钾) 糖精钠脱氢乙酸(钠)

随着我国社会的进步和经济的发展，消费者对食品的安全性日益关注，最近几年，由于食品安全问题层出不穷，人们越来越重视食品添加剂所带来的安全隐患，特别是防腐剂 [山梨酸（SA）、苯甲酸（BA）、脱氢乙酸（DHA）] 和人工合成甜味剂 [糖精钠（SS）、安赛蜜 (AK)] 的使用。防腐剂、甜味剂广泛应用在各种食品、饮料中，它具有杀灭或抑制微生物增殖和赋予食品以甜味的作用，但过量摄入会对人体带来伤害，还可引发癌症。在我国食品添加剂使用卫生标准中，对其使用范围和最大使用限量均有明确规定。市场上食品中防腐剂和人工合成甜味剂超标的现象比较普遍，而现有检测这几种项目的方法并不一致，导致对同一样品需进行不同的前处理方法，不但工作效率低，也增加了工作成本。因此同时快速检测成为必要。本文建立在国标的基础上探讨采用反相高效液相色谱同时测定食品防腐剂、甜味剂的方法，方法灵敏有效、简便快速，在实际工作中有很强的实用性。

1 材料与方法

1.1 仪器与试剂

仪器 Agilent-1200型高效液相色谱仪(配二极管阵列检测器)，超声波清洗器，食品粉碎机，PH计，天平：分度值为0.001mg。0.02mol/L 乙酸铵、甲醇（色谱纯）、1：1 氨水溶液、乙酸锌溶液(200 g/L)；亚铁氰化钾溶液(100 g/L) ；氢氧化钠溶液(10 g/L)；碳酸氢钠溶液(20g/L)。苯甲酸、山梨酸、糖精钠、脱氢乙酸标准 (纯度＞99%)，糖精钠、苯甲酸标准(1.0mg/ml)。

1.2 色谱条件

色谱柱：Eclipse XDB-C18柱，250mm×4.6mm，5 μm；柱温：35℃；流动相：甲醇(色谱纯)+0.02mol/ L乙酸铵溶液(5：95)；流速：1 mL/min；检测器：二极管阵列检测器，参考波长230 nm；进样量：5μL。

1.3 标准曲线制备

精密称取山梨酸、苯甲酸、脱氢乙酸、安赛蜜和糖精钠标准品各 100mg于100ml容量瓶中，加5ml碳酸氢钠溶液溶解，加水定容至刻度，摇匀，配制成1000μg/ml山梨酸、苯甲酸、脱氢乙酸、安赛蜜和糖精钠的混合标准储备溶液。临用前用纯水将混合标准储备溶液(1000μg/ml)稀释为0、10、20、40、80、160、320μg/m l混合标准系列，于液相色谱仪进样10μL，每个浓度进样3次，各标准物质以峰面积对应标准浓度绘制标准曲线。

1.4 样品前处理方法的选择

参照国标方法GB/T23495-2009和GB/T23377-2009[1-3]，各组分的样品前处理方法不同，本文充分考虑各组分的理化特性，针对不同类型样品，采用不同前处理方法。果汁饮料、碳酸饮料类等基质比较简单的液体样品，超声脱气后，直接于液相色谱分析定量；乳制品饮料、酱油类等高蛋白的液体样品，需加沉淀剂沉淀蛋白质，定容过滤后，于液相色谱分析定量；蜜饯、糕点、酱菜类等固体样品，则需加氢氧化钠溶液使样品处理液呈碱性，辅以超声提取，使各组分以盐形式更好溶于处理液中，如样品富含脂肪、蛋白质，还需加入沉淀剂沉淀脂肪、蛋白质，4000r/min离心5min，取上清液经0.45μm的滤膜过滤后于液相色谱分析定量。

2 结果与讨论

2.1 色谱图

在1.2色谱条件下AK、BA、SS、SA和DHA的保留时间分别是4.0、5.1、7.1、8.8、9.3 min，各组分都与基线分离，与共存的其他物质分离良好，其混合标准溶液、阳性样品制备液及样品加标制备液色谱图见图1-3。

图1 20μg/ml AK、BA、SS、SA和DHA混标溶液色谱图

图2 AK、BA、SS、SA和DHA样品本底制备液色谱图

图3 AK、BA、SS、SA和DHA样品加标制备液色谱图

2.2 检测方法的准确度和精密度

用饮料和糕点做样品，分别加入 1000μg/mL 标准溶液 1mL 进样品中定容 50mL，相当于加入了20μg/ mL 标准溶液进行回收率试验，加标回收结果显示，安赛蜜回收率为 96.2%～99.8%；苯甲酸回收率为95.4%～101.2%；山梨酸回收率为98.7%～103.3%；糖精钠回收率为95.8%～99.6%；脱氢乙酸回收率为96.1%～100.9%。结果准确可靠，重现性良好。结果见表 1。